高华
- 作品数：4 被引量：9H指数：1
- 供职机构：广西大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程理学更多>>
- 生物酶法合成1,5-戊二胺的研究进展被引量：8
- 2017年
- 随着经济的飞速发展,全球每年对聚酰胺、聚氨酯等多聚物产品的需求量呈现逐年增长的趋势。1,5-戊二胺是合成聚酰胺等多聚物的重要单体,生物法合成1,5-戊二胺是一种具有潜在竞争力的绿色环保、资源可持续利用的方法。本文将从代谢途径中的关键酶,大肠杆菌、谷氨酸棒状杆菌以及甲醇芽孢杆菌中戊二胺代谢途径工程改造的最新研究进展4个方面进行综述,并对其前景进行展望。
- 邓洁高震高华吴巧芬蒋承建
- 关键词：大肠杆菌谷氨酸棒状杆菌
- 亚热带红树林土壤沉积物中L-天冬氨酸-α-脱羧酶菌株Providencia GZ1的鉴定及酶的特性研究
- L-天冬氨酸α-脱羧酶(EC4.1.1.11)，是微生物泛酸(由泛解酸和β-丙氨酸组成)生物合成途径中的关键酶，由pan D基因编码，以丙酮酰基为催化活性中心，具有严格的底物特异性，可以催化L-天冬氨酸脱α-羧基生成β-...
- 高震赵华显邓洁高华吴巧芬徐悦欧倩蒋承建
- 关键词：Β-丙氨酸
- 亚热带红树林土壤沉积物中新的DHAP合酶基因dax1的研究
- 3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖-7-磷酸合成酶(DAHPS EC 2.5.1.54)是苯丙氨酸代谢途径中的关键酶，催化限速步骤E4P和PEP生成DAHP的反应，是莽草酸途径的第一个限速酶，影响整条代谢途径的速度，同时它也受到...
- 高华赵华显邓洁吴巧芬高震徐悦欧倩蒋承建
- 关键词：L-苯丙氨酸
- 一个新的L-半胱亚磺酸脱羧酶基因的分析和突变被引量：1
- 2017年
- 【目的】完成一个来源于碱性污染土壤宏基因组文库的新的L-半胱亚磺酸脱羧酶基因undec1A的鉴定,研究其酶学性质并利用非理性设计技术对其进行分子改造。【方法】以p ETBlue-2为表达载体构建包含undec1A基因的重组表达质粒,转化至宿主细胞E.coli Tuner(DE3)p Lac?中构建重组表达克隆,采用镍亲和层析完成了酶蛋白的分离纯化,完成其生化特征研究,利用连续易错PCR技术对Undec1A蛋白进行分子改造。【结果】生物信息学分析结果揭示Undec1A蛋白与已知的L-半胱亚磺酸脱羧酶存在类似的辅酶结合位点和底物识别催化基序等。分子对接结果显示氨基酸残基Val237、Asp239、Asp266、Ile267、Ala268和Lys298等决定了与底物分子L-半胱亚磺酸的识别和结合催化。以L-半胱亚磺酸作为底物,重组Undec1A蛋白的最适作用p H为7.0,最适作用温度为35°C;分子动力学常数K_m为(1.557±0.015)mmol/L,V_(max)为(49.07±3.19)μmol/(L·min),k_(cat)为(45.80±1.32)/min。利用连续易错PCR技术完成了亲本酶的分子改造,分离筛选到了一个酶活力更高的突变酶Undec1A-1180。在优化条件下,Undec1A-1180的比活力较亲本酶提高了约5.62倍。【结论】本研究为构建牛磺酸的生物合成工艺提供了理论参考,因而具有重要的实践意义。
- 邓洁吴巧芬高华徐悦欧倩武波蒋承建
- 关键词：牛磺酸宏基因组文库突变酶
