蒋薇
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目广西教育厅科研项目广西研究生教育创新计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 无乳链球菌感染方式对罗非鱼血常规和抗体消长规律的影响
- 2022年
- 【目的】明确表皮损伤或某种原因造成的炎症是否是罗非鱼无乳链球菌病暴发的重要诱因,为罗非鱼养殖业疫情预警及无乳链球菌疫苗研制提供参考依据。【方法】将180尾体质量约40 g的吉富罗非鱼随机分为健康组、皮肤创伤组和肠炎组,通过浸泡方式感染无乳链球菌(1.5×106CFU/mL),分别设3个对应的空白对照组(不感染无乳链球菌)。无乳链球菌感染前及感染后24、48、72、96、120、144和168 h等8个时段,分别每组随机挑选15尾罗非鱼采血,将血液涂片后以吉姆萨染色,观察细胞形态并统计外周血白细胞、中性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞数量,同时记录罗非鱼死亡数量。每周以ELISA测定1次罗非鱼血清IgM抗体水平,持续10周。【结果】与健康组罗非鱼相比,皮肤创伤组和肠炎组罗非鱼死亡时间提前,存活率显著降低(P<0.05,下同)。3种感染方式的罗非鱼外周血白细胞、中性粒细胞和淋巴细胞数量在感染初期均呈明显的上升趋势,至感染后168 h皮肤创伤组和肠炎组罗非鱼显著高于健康组罗非鱼(P<0.01,下同),说明无乳链球菌感皮肤创伤或患有肠炎的罗非鱼相对于健康鱼能引起更强烈的免疫反应;皮肤创伤组罗非鱼的外周血单核细胞数量在感染后72~168 h均极显著高于健康组罗非鱼,而肠炎组罗非鱼只在感染后24 h极显著高于健康组罗非鱼。相对于健康组和皮肤创伤组罗非鱼,肠炎组罗非鱼血清抗体水平上升时间更早,持续高水平时间更长;健康组和皮肤创伤组的罗非鱼血清特异性抗体出现时间相近,但皮肤创伤组罗非鱼抗体维持高水平的时间更长。【结论】罗非鱼在无乳链球菌感染前后并发机械性或免疫性病理损伤及炎症,会导致感染死亡率升高,即感染无乳链球菌后会加重因转池、运输、寄生虫感染等造成鱼体表皮受损,或饲料霉变等原因造成的肠炎,进而导致罗非鱼死亡率上�
- 顾海闻农源蒋薇王冬英王冬英陈汉忠陈汉忠
- 关键词：罗非鱼无乳链球菌白细胞抗体水平
- 应用双抗体夹心ELISA检测罗非鱼感染无乳链球菌后组织和血清中抗原变化被引量：1
- 2023年
- 为了建立快速有效的罗非鱼无乳链球菌病早期诊断方法以便服务于及时疫情预警,试验通过双抗体夹心ELISA法确定罗非鱼不同组织(血液、脑、肝、头肾和脾)无乳链球菌阴/阳性临界值后,对感染无乳链球菌不同感染剂量(50cfu/mL、100cfu/mL、200cfu/mL和400cfu/mL)、不同感染时间(12 h、24 h、48 h、72 h、96 h、120 h、144 h、168 h)罗非鱼的不同组织样品中的病原抗原进行检测。结果显示,双抗体夹心ELISA法确定脑、头肾、肝、脾及血清中抗原的阴/阳临界值分别为:0.192、0.198、0.196、0.173和0.163;感染后12 h处理组脑组织OD 450值均显著高于对照组(P<0.01);除24 h外感染组头肾组织OD 450值远大于对照组,且差异具有时间依赖性(P<0.01);感染后24 h肝组织OD 450值达到峰值,96 h恢复正常值;感染后12 h,脾脏组织OD 450值显著高于对照组(P<0.05);感染后12h血清OD 450值极显著高于对照组(P<0.01),24 h恢复正常,72 h~96 h显著升高。研究表明,感染后12 h,脑、头肾、脾及血清均能检出无乳链球菌抗原,表明双抗体夹心ELISA法检测敏感性好,适合罗非鱼无乳链球菌病的早期病原检测;脑、脾、头肾、肝、血清等均可作为检测无乳链球菌抗原的样本,但是感染后不同时间、不同组织的细菌含量可能不同,建议同时检测不同组织以确保结果更准确。
- 曾子轩蒋薇罗雨昕陈汉忠王冬英
- 关键词：罗非鱼无乳链球菌双抗体夹心ELISA抗原检测
- 大片形吸虫免疫胶体金检测试纸条的研制及初步应用被引量：3
- 2017年
- 为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛大片形吸虫检测方法,本试验利用抗大片形吸虫ES抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株7D1和7D4分别制备和纯化得到单克隆抗体7D1和7D4;采用柠檬酸三钠还原法制备颗粒大小为30nm的胶体金,再用胶体金标记纯化单克隆抗体7D1,在硝酸纤维素膜的质控带和检测带处分别包被羊抗鼠IgG二抗和单克隆抗体7D4,经反应条件优化,组装成了大片形吸虫免疫检测试纸条。经测试该检测试纸条对ES抗原的检测下限为0.94μg/mL,与胰扩盘吸虫、前后盘吸虫、支原体、弓形虫、伊氏锥虫均无交叉反应,特异性好。采集广西地区334份水牛新鲜粪样并用试纸条检测,阳性率为38.62%。结果表明,试纸条方法操作简单、快速、易于判定,特异性好,敏感性高,适合基层大面积普查和现场检测大片形吸虫。
- 王华俊刘宇蒋薇赵雪丽曹伟伟陈汉忠闫若潜
- 关键词：大片形吸虫单克隆抗体胶体金试纸条
- 大片形吸虫病早期诊断夹心ELISA方法的建立及应用被引量：2
- 2016年
- 为建立一种早期诊断大片形吸虫病的试验方法,本试验对5株分泌抗大片形吸虫分泌排泄抗原(ES)单克隆抗体的杂交瘤细胞进行复苏、制备单克隆抗体,配对筛选出7D1、7D2单克隆抗体,将7D2作为包被抗体,7D1作为酶标抗体,通过条件优化,建立早期诊断大片形吸虫病的夹心ELISA方法。结果显示,当包被抗体稀释度为1∶6 400(0.208μg/mL)、采用5%脱脂奶粉封闭、酶标记抗体稀释度为1∶10 000(0.200μg/mL)时,最早可检测到感染此病第7天小鼠的血清循环抗原,其敏感性可达到1∶3 200(0.156μg/mL),与其他几种寄生虫抗原均无交叉反应,具有较高的特异性和稳定性。本试验成功建立了早期检测大片形吸虫病的夹心ELISA方法,为大片形吸虫病的诊治及开发早期诊断大片形吸虫病的试剂盒奠定了基础,具有临床应用价值。
- 李雪魏志鹏赵明龙许心婷刘宇吴文德蒋薇黄甜龙飞翔陈汉忠
- 关键词：单克隆抗体大片形吸虫夹心ELISA
