赵碧
- 作品数:5 被引量:8H指数:2
- 供职机构:贵州大学动物科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金贵州省优秀青年科技人才计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- RNA干扰的研究进展
- 本文就RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术的历史、作用机制、生物学特点及应用作简要概述。由于RNAi干扰作用具有高效性和高特异性特点,能有效阻抑不必要或有害基因表达,对细胞及机体正常功能的发挥和维...
- 赵碧文明
- 关键词:动物传染病基因沉默
- 文献传递
- 鸭肠炎病毒核衣壳蛋白质互作蛋白质基因荧光定量PCR检测方法的建立被引量:7
- 2015年
- 为进一步阐明鸭肠炎病毒(DEV)的致病机理,本试验建立检测鸭肠炎病毒核衣壳蛋白质(NP)的互作蛋白质(PKCI)基因荧光定量PCR方法。针对PKCI基因设计特异性引物,经PCR扩增目的基因构建重组质粒p MD18-T-PKCI,将其作为阳性标准品构建荧光定量PCR标准曲线,并对建立的荧光定量PCR方法进行重复性、特异性和敏感性试验。结果显示:标准曲线的线性关系为Y=-3.31x+42.00,相关系数为-1.00,扩增效率为100%,熔解曲线仅出现单特异峰,对H5亚型、H7亚型和H9亚型禽流感病毒及新城疫病毒、鸭肝炎病毒均未检测到荧光信号。表明本试验建立的方法具有良好的稳定性、特异性和灵敏性。
- 赵碧熊朝丽徐茂文周碧君程振涛文明
- 关键词:鸭肠炎病毒荧光定量PCR
- 鸭源PKCI miRNA表达载体的构建及鉴定被引量:1
- 2014年
- 为给蛋白激酶C抑制蛋白(PKCI)在鸭肠炎病毒增殖的作用机制奠定基础,根据PKCI基因mRNA序列及miRNA设计原则,合成4对miRNA寡聚单链DNA,退火成双链dsDNA,用载体构建试剂盒进行重组质粒构建,插入miRNA表达载体(pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR)构建表达质粒,转化至感受态细胞DH5α,筛选并提取重组质粒进行测序分析。结果表明:在含壮观霉素的LB平板可生长出含目的基因的重组细菌菌落;测序表明成功构建了鸭源PKCI基因miRNA表达载体,重组质粒pSilencer-PKCI-1~pSilencer-PKCI-4的插入部分大小为71~134bp、68~131bp、68~130bp和68~131bp;重组质粒miRNA有鼠类miR-155骨架结构,即左侧为天然miR-155结构,右边为发卡结构的末端环区(internal loop)和配对区域内部的末端环区miRNA结构。
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- RNA干扰的研究进展
- RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)启动的序列特异的转录后基因沉默现象,广泛存在于真菌、植物和动物中。它是细胞内由双链RNA诱导降...
- 赵碧文明
- 关键词:RNAISIRNA基因沉默
- 文献传递
- 鸭源PKC基因荧光定量PCR检测方法的建立被引量:3
- 2016年
- 为建立基于鸭源宿主细胞的蛋白激酶PKC基因的实时荧光定量PCR检测方法。根据GenBank数据库的PKC基因设计、合成特异性引物,通过PCR技术扩增目的基因片段,构建重组质粒GV pXT19-TPKC,并以其为阳性标准品建立荧光定量PCR检测方法和标准曲线,进行重复性、特异性和敏感性验证。结果显示,荧光定量PCR标准曲线为y=-3.334 0x+44.199,相关系数为0.995 4,扩增效率为99.19%;熔解曲线仅出现单特异峰,未检测到H5亚型/H7亚型/H9亚型禽流感病毒疫苗毒株、新城疫病毒和鸭肝炎病毒等参考毒株的核酸样本的荧光信号。说明,建立的荧光定量PCR方法具有良好的稳定性、特异性和灵敏性。
- 罗乐赵碧郑敏吴良涛文明
- 关键词:实时荧光PCR蛋白激酶CSYBR