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可溶性E2蛋白作为抗原的检测猪瘟病毒血清抗体间接ELISA方法的建立被引量：10: 2009年; 以可溶性重组E2蛋白作为抗原,建立了猪瘟病毒(CSFV)血清抗体间接ELISA诊断方法(rE2-ELISA)。将猪瘟疫苗毒株E2基因主要抗原区(A-D)基因克隆到表达载体pGEX-6p-1上,转化E.coli,降低诱导温度至20℃,获得48 000大小E2融合蛋白,部分目的蛋白以可溶性形式表达。Western blotting试验证实,E2融合蛋白可以和CSFV阳性血清发生特异性结合。亲和层析纯化后的E2融合蛋白作为抗原,建立了检测CSFV血清抗体的间接rE2-ELISA方法。该方法的特异性试验结果表明,与PRRSV、PCV2、PPV和PRV阳性血清之间不存在交叉反应;用rE2-ELISA和国外同类试剂盒(CSF-Ab-Kit)检测142份田间血清样品,2种试剂盒的阳性检测率分别为83.81%和88.73%。因此,rE2-ELISA猪瘟抗体检测试剂盒具有良好的敏感性和特异性,适合应用在大规模的CSFV血清抗体的检测工作中。; 尹双辉尚佑军刘艳红蔺芳才学鹏刘湘涛; 关键词：猪瘟病毒可溶性表达抗体检测

Development of Multi-PCR for Differentiation of Vaccine Strain and Field Isolate of Porcine Pseudorabies Virus被引量：2: 2009年; Three pairs of primer were designed for amplification of porcine pseudorabies virus （PRV） gB, gE, and TK gene by multiplex PCR （multi-PCR） in order to differentiate vaccine strains from field isolates. Three specific bands were obtained respectively at the expected size, 427 bp （gB gene）, 298 bp （gEgene）, and 208 bp （TKgene）, Then four different gene-deleted vaccines of PRV were detected by multi-PCR. One ex- pected specific band was observed in one of samples, while two bands in the others. As shown by the detection results, the multi-PCR has high sensitivity and specificity and should be applied in pathogen diagnosis and epidemiological investigation in the future.; 蔺芳尹双辉尚佑军刘艳红刘湘涛

紫花苜蓿/禾本科牧草间作提高其生产潜力和营养品质机理及家畜对其利用效果研究: 间作种植因具有高效可持续利用农业资源、保证农业生态系统的生产力和稳定性的特点，在农业生产中已被广泛关注。而豆/禾牧草间作在具备上述优点的同时，还有利于间作牧草收获同步实现养分均衡的豆、禾牧草混合青贮（裹包青贮、窖贮）。为...; 蔺芳; 关键词：紫花苜蓿禾本科牧草间作模式营养品质; 文献传递

一种用于检测猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒及其混合感染的试剂盒和方法: 一种用于检测猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒及其混合感染的试剂盒和使用所述试剂盒的检测方法，所述试剂盒包括10×PCR buffer、dNTP、DMSO、Taq酶、阳性对照试样以及选自SEQID NO：1至SEQ...; 刘湘涛尹双辉蔺芳尚佑军; 文献传递

高致病性猪蓝耳病病毒GS/LZh/07株的分离、鉴定及其非结构蛋白Nsp2基因特性分析被引量：21: 2009年; 将高致病性猪蓝耳病疑似病料接种Marc145细胞,发现该病料可使Marc145细胞产生CPE,应用猪蓝耳病病原检测试剂盒从细胞培养物中检测到PRRSV,命名为Gs/Lzh/07株。同时应用RT-PCR方法扩增该分离毒株的非结构蛋白Nsp2基因,并进行了序列测定,发现所扩增到的Nsp2基因有90个核苷酸的缺失。序列比对结果表明:该分离病毒Nsp2基因与经典毒株PRRSV-ch-1a核苷酸同源性为83.0%,氨基酸同源性为72.7%;与高致病性变异毒株NX和SD核苷酸同源性为95.5%,氨基酸同源性为90.9%,可见该毒来源于2006-2007年流行毒株,说明高致病性猪蓝耳病变异病毒已经在甘肃省存在。该毒株的成功分离为高致病性猪蓝耳病流行病学调查分析提供数据,也为预防控制该病积累了资料。Nsp2的特性分析为揭示高致病性猪蓝耳病PRRSV在甘肃省的流行特点提供参考。; 吴锦艳田宏尚佑军刘湘涛郑海学靳野尹双辉满自萍赵娜蔡承茹蔺芳谢庆阁; 关键词：高致病性猪蓝耳病病毒 NSP2 特性分析

多重PCR检测猪伪狂犬、细小病毒和猪圆环病毒2型方法的建立和应用: 1．以猪伪狂犬病毒（PRV）的基因组序列作为参考，设计了应用在同一个PCR反应体系的3对特异性扩增引物，建立了鉴别诊断PRV疫苗株和流行毒株的多重PCR方法（Multiplex PCR，Multi-PCR）。在相同的PC...; 蔺芳; 关键词：猪伪狂犬病毒猪圆环病毒2型猪细小病毒; 文献传递

猪圆环病毒2型和猪生殖与呼吸综合征病毒混合感染的检测被引量：3: 2009年; 对采自甘肃省天水市某猪场的24份病猪组织器官样品(肺、脾、肾和淋巴结)进行了病毒分离,同时设计特异性引物,建立了分别检测猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的PCR和RT-PCR方法,应用ELISA方法检测了血清中PCV-2及PRRSV抗体,以调查该猪场PCV-2和PRRSV混合感染的情况。结果显示,有14份样品均扩增出了PCV-2和PRRSV的目的基因片段,且PCV-2及PRRSV抗体均呈阳性。证实,该猪场出现了PCV-2和PRRSV的混合感染,阳性率为58.33%。; 蔡承如尚佑军蔺芳田宏尹双辉吴锦艳杨顺利刘湘涛; 关键词：猪圆环病毒2型猪生殖与呼吸综合征病毒

多重PCR方法快速鉴别猪伪狂犬疫苗毒和野毒被引量：23: 2009年; 根据Genbank中PRV的gB、gE、TK基因序列设计并合成引物,对样品中PRVDNA进行多重PCR扩增及反应条件优化,得到与设计相符合的3条特异性条带,分别为427 bp(gB)、298 bp(gE)和208 bp(TK)。用这3对引物对四种伪狂犬疫苗样品DNA进行多次多重PCR扩增,其中1种疫苗得到与设计相符的1条特异性条带,其余为2条。该结果表明,此检测方法敏感度较高,适用于科学研究、临床诊断以及流行病学调查,对根除伪狂犬病具有重要意义。; 蔺芳尹双辉尚佑军刘艳红刘湘涛胡永浩; 关键词：伪狂犬病病毒多重PCR

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蔺芳