王湘
- 作品数:4 被引量:1H指数:1
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- 发文基金:国家自然科学基金长沙市科技计划项目湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 规模猪场保育猪副猪嗜血杆菌感染的诊断与分析
- 2013年
- 从湖南耒阳某发病猪场采集到6头小猪进行细菌的分离,染色镜检后得到一株革兰氏阴性杆菌。使用细菌的通用对细菌进行PCR扩增后送测序得到一段序列。将该段序列经过Blast分析发现此次分离的菌株为副猪嗜血杆菌,为了进一步确认该菌株的血清型,使用Lasergene分析软件绘制和分析遗传进化树。结果表明,该菌株与GenBank中登录的部分副猪嗜血杆菌血清型的16SrRNA同源性为96.3%~99.0%,与GenBank登录号为AB078974以及AB078974的两株血清5型的菌株构成一个分支,同源性高达99.0%。
- 王湘李润成
- 关键词:副猪嗜血杆菌药敏试验
- 副猪嗜血杆菌外膜蛋白PlpD基因的原核表达及免疫保护性分析
- 2015年
- 为研究副猪嗜血杆菌PlpD基因的免疫保护性,根据Gen Bank上已公布的PlpD基因序列设计该基因的特异性引物,以本实验室保存的副猪嗜血杆菌5型菌株为模板,PCR扩增目的片段,构建重组质粒p ET28-PlpD,并将其转至表达菌BL21(DE3)中进行诱导表达。SDS-PAGE电泳检测显示,在温度为16℃时使用终浓度为1 mmol/L IPTG诱导12 h,目的蛋白可溶性表达量最高,Western blot结果表明该目的蛋白具有较好的反应原性。将获得的融合蛋白PlpD进行纯化后制备成亚单位疫苗,经腹腔注射免疫小鼠,3免后用高于副猪嗜血杆菌的致死剂量1.5×109CFU进行攻毒,结果显示PlpD基因对小鼠具有一定的免疫保护性。
- 刘秋菊王湘李芸芳黎满香
- 关键词:副猪嗜血杆菌免疫保护
- 副猪嗜血杆菌Omp2等外膜蛋白的免疫原性分析
- 副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的感染在全球范围内广泛存在。一般情况下2周龄到4月龄的猪最易受副猪嗜血杆菌影响,主要病理变化包括多浆膜炎、关节炎、脑膜炎、不伴随多浆膜炎的急性肺炎以及急性败...
- 王湘
- 关键词:副猪嗜血杆菌克隆表达免疫原性
- 文献传递
- 病料中猪圆环病毒(PCV)的分型检测及PCV2型不同毒株的培养被引量:1
- 2013年
- 对湖南各地区送检猪病料进行了猪圆环病毒(PCV)的PCR检测,并对PCV阳性病料的DNA进行了猪圆环病毒1(PCV1)与PCV2的PCR分型检测。结果表明:送检的192份样品中,有117份为PCV阳性;117份PCV阳性样品全部含有PCV2的DNA,其中2份既有PCV2也有PCV1的DNA;对病料中的PCV2进行克隆,获得的序列均为PCV2–1基因组,对其中2株毒株的序列进行感染性克隆病毒的构建,拯救的病毒命名为PCV2(2–1)和PCV2(4–1);对PCV2(2–1)和PCV2(4–1)进行培养,结果 2株病毒均可以在换液维持的细胞中有效的复制。
- 罗维赵墩王湘吴海超蒋大良余兴龙
- 关键词:感染性克隆毒株