张圆
- 作品数：32 被引量：101H指数：5
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 将新技术进展融入生理学教学探讨被引量：1
- 2012年
- 为了使生理学学科跟上医学教育的发展,必须将各学科新技术进展融入到本科生教学中,注重学生创新意识与创新能力的培养。就流式细胞术、电子显微镜技术和小动物成像技术在生理学方面的新进展、新应用加以介绍,可为教师授课提供参考。
- 张圆殷玥庄然
- 关键词：生理学教学方法流式细胞术电子显微镜
- CD305分子在类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中的表达
- 2012年
- 为研究CD305分子在类风湿关节炎滑膜中的表达,通过免疫组织化学染色方法分别检测CD305分子在类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)、骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)和正常创伤患者滑膜中的分布规律。结果在RA组,CD305分子在所有患者滑膜组织中均有表达。在OA组,CD305分子在部分患者滑膜组织中表达。而在正常患者中,CD305分子在大部分滑膜组织中不表达,仅在部分样本边缘处有少量表达。说明CD305分子在RA患者滑膜组织中表达高于正常创伤患者,且主要在里衬层(lining layer)滑膜成纤维细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)上高表达。
- 吕科张圆庄然闫宏伟丁勇
- 关键词：类风湿关节炎滑膜成纤维细胞
- 四环素调控的小鼠LAIR-1/CD305转基因小鼠的初步建立被引量：1
- 2007年
- 目的建立四环素调控的小鼠LAIR-1/CD305转基因小鼠,为进一步研究mLAIR-1分子的体内功能奠定基础。方法构建pBI-5-mLAIR-1载体,显微注入B6D1F1受精卵,PCR检测新生小鼠基因组DNA中LAIR-1与荧光素酶(Lucifer-ase)基因。将mLAIR-1和荧光素酶双阳性小鼠耳成纤维细胞转染含rtTA的pUHD17.1质粒,用含盐酸强力霉素(Dox)的培养基进行培养,检测细胞裂解液中荧光素酶活性。将荧光素酶表达依赖Dox小鼠与C57BL/6交配,采用PCR对子代鼠进行检测。结果共获得9只首建鼠,其目的基因表达高度依赖Dox,并得到其中5只首建鼠的F1代小鼠。结论获得了四环素调控的小鼠LAIR-1转基因小鼠,可用于该分子体内功能的研究。
- 方亮缪军韩卫宁张圆张瑞中张新海庄然金伯泉
- 关键词：转基因小鼠
- 有氧运动的心血管保护机制及其研究进展被引量：13
- 2014年
- 有氧运动具有明确的心血管保护作用,但其机制尚未完全阐明。新近研究显示,胰岛素抵抗、炎症和线粒体功能障碍在心血管疾病发生发展中起重要作用,而有氧运动可通过多种机制影响和调节这些环节。本文从提高胰岛素敏感性、抗炎和改善线粒体功能三个方面综述有氧运动改善心血管功能、裨益心血管健康的主要机制、存在问题及相关研究进展。
- 侯作旭张圆高峰
- 关键词：有氧运动心血管保护胰岛素抵抗炎症线粒体
- 白细胞相关免疫球蛋白样受体-1在破骨细胞发育中的作用被引量：2
- 2013年
- 目的研究白细胞相关免疫球蛋白样受体-1(LAIR-1)在破骨细胞(OC)发育过程中的表达规律及影响。方法 PCR检测小鼠LAIR-1(mLAIR-1)分子在体外诱导OC生成过程中mRNA水平的变化;重酒石酸盐抗性酸性磷酸酶(TRAP)染色观察OC的数量;Corning Osteo Assay surface检测OC骨吸收陷窝的形成;ELISA检测类风湿性关节炎(RA)患者血清可溶型LAIR-1(sLAIR-1)与疾病的炎症状态和活动度是否相关。结果 PCR结果显示在OC形成过程中,LAIR-1 mRNA显著降低;TRAP染色和骨吸收陷窝实验均显示加入mLAIR-1单克隆抗体后,OC数量明显减少。RA病人类风湿因子高低水平组之间的血清sLAIR-1水平存在显著差异。结论 LAIR-1分子可能参与了OC的发育过程,并且与RA疾病的炎症状态有一定关系。
- 张圆丁勇庄然张春梅金伯泉
- 关键词：破骨细胞LAIR-1发育类风湿性关节炎
- CD305分子在小鼠巨噬细胞的表达被引量：6
- 2009年
- 目的:研究CD305分子在不同小鼠巨噬细胞上的表达规律。方法:对小鼠巨噬细胞系、免疫组织中的巨噬细胞和脂多糖刺激的腹腔巨噬细胞进行免疫荧光染色,流式细胞术分析小鼠CD305在各种巨噬细胞上的表达规律。结果:小鼠CD305高表达于小鼠巨噬细胞系和组织中的巨噬细胞。此外,LPS刺激后6 h内腹腔巨噬细胞上小鼠CD305的表达显著下降,与此同时上清中IL-6的水平显著升高。结论:小鼠CD305分子高表达于小鼠巨噬细胞,LPS刺激后表达明显下降(P<0.05)。
- 张圆丁勇庄然张春梅金伯泉
- 关键词：巨噬细胞
- 流式细胞术鉴定人外周血滤泡辅助性T细胞被引量：5
- 2009年
- 目的:用免疫荧光染色和流式细胞术(FCM)鉴定正常人外周血单个核细胞(PBMC)中滤泡辅助性T(Tfh)细胞,以便对其功能进行进一步研究。方法:密度梯度离心法分离人PBMC,采用不同荧光素标记的抗CXCR5、CD4及CD19抗体进行染色FCM分析,鉴定出表型为CD4+CXCR5+的T细胞亚群。结果:外周血可以检测到CD4+CXCR5+T细胞亚群,占CD4+T淋巴细胞百分比为(11.09±0.38)%,MFI值为25.78±0.72,低于B细胞膜表面CXCR表达水平(MFI值为99.6±8.1)。结论:健康人外周血存在一定比例的Tfh细胞,应用FCM可以成功鉴定Tfh细胞,为进一步研究其功能提供了良好的技术平台。
- 张春梅张赟张圆徐竹蔚杨琨杨安钢庄然金伯泉
- 关键词：流式细胞术TFHCXCR5
- 胰岛素治疗对心肌梗死大鼠胶原重构的影响
- 2012年
- 目的:研究观察胰岛素治疗对心肌梗死大鼠(myocardial infarction,MI)胶原重构的影响。方法:成年雄性SD大鼠34只,随机分为3组,即假手术(Sham)组(n=6)、生理盐水(NS)对照组(n=14)及胰岛素(ISL)治疗组[n=14,缺血20 min后,通过尾静脉以4 ml/(kg.h)的速率输入50 U/L ISL 2 h,并在缺血后1周内,每日皮下注射0.5 U/ml胰岛素1 ml/kg体质量]。分别于术后1周和4周,行心脏超声心动图(UCG)监测左室射血分数(LVEF),用氯胺T法检测心肌组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量,用Western blot检测Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果:术后1周和4周时,对照组的LVEF值较Sham相比明显降低(P<0.01),而ISL治疗组与对照组相比,LVEF显著升高(P<0.05,P<0.01)。与Sham组相比,对照组心肌胶原的含量升高,ISL治疗组可使胶原的含量显著降低(P<0.05)。1周时,对照组的心肌Ⅰ/Ⅲ型胶原的比值增加,经ISL治疗后,Ⅰ/Ⅲ型胶原的比值明显下降(P<0.05);4周时,对照组Ⅰ/Ⅲ型胶原的比值增加,而给予ISL治疗后Ⅰ/Ⅲ型胶原的比值无明显差异。结论:MI后大鼠心肌非梗死区组织出现胶原重构,ISL可影响该过程中心肌Ⅰ/Ⅲ型胶原的比值,从而起到改善心脏功能的作用。
- 田娜付锋耿超群邢文娟张海锋张圆高峰
- 关键词：胰岛素胶原重构心脏功能
- 实验性自身免疫性心肌炎小鼠体内一氧化氮的变化被引量：1
- 2014年
- 目的:研究实验性自身免疫性心肌炎(experimental autoimmune myocarditis,EAM)小鼠体内一氧化氮(nitric oxide,NO)含量的变化。方法:以20只小鼠建立EAM小鼠模型(EAM组),以同数量的小鼠作为对照组。于初次免疫后21 d,观察心脏大体和组织学变化,同时提取心肌蛋白进行western blot检测。分离小鼠脾脏细胞检测巨噬细胞含量变化及细胞内NO含量,并且利用化学试剂盒对小鼠血清和心肌组织中NO含量进行分析。结果:成功建立了EAM小鼠模型。流式细胞术分析显示,EAM组小鼠脾脏中CD11b+F4/80+巨噬细胞的比率显著升高(P<0.05);但NO荧光探针检测显示,单个细胞内NO的含量明显减少(P<0.05)。与对照组相比,EAM组小鼠血清中NO的含量未见明显变化;但心脏中NO的含量显著升高(P<0.05)。Western blot的结果表明,EAM组小鼠心脏中内皮型NOS(e NOS)和诱导型NOS(i NOS)的含量均有所升高(P<0.05)。结论:NO可能是参与自身免疫性心肌炎疾病发生发展过程的一种调控物质。
- 杨敏雷雯毛予丁海峰高峰张圆
- 关键词：实验性自身免疫性心肌炎一氧化氮巨噬细胞心脏小鼠
- 兔抗mLAIR-1胞外区抗体的制备、纯化和鉴定被引量：5
- 2005年
- 目的:表达并纯化小鼠白细胞相关免疫球蛋白样受体-1(mLAIR-1)胞膜外区与人IgGFc段的融合蛋白,制备兔抗mLAIR-1胞膜外区的抗体。方法:构建真核表达载体,表达并纯化mLAIR-1-Fc融合蛋白。以mLAIR-1-Fc融合蛋白免疫家兔,用偶联mLAIR-1-Fc融合蛋白的Sepharose-4B亲和层析柱纯化多克隆抗体。用间接免疫荧光染色和流式细胞术鉴定多克隆抗体的特异性。结果:表达并纯化了mLAIR-1-hIgFc融合蛋白。以其免疫家兔,用亲和层析的方法纯化得到兔抗mLAIR-1胞膜外区的抗体,能与转染细胞和细胞表面天然mLAIR-1分子结合。结论:成功地构建了mLAIR-1胞膜外区基因的真核表达载体,表达并纯化了mLAIR-1-Fc融合蛋白。用偶联mLAIR-1-Fc融合蛋白的Sepharose-4B亲和层析柱纯化的兔抗mLAIR-1胞外区抗体,具有高特异性和高效价,为进一步研究mLAIR-1分子的结构和功能提供了新的手段。
- 张圆庄然金伯泉欧阳为明
- 关键词：抗体纯化
