高彩霞
- 作品数：38 被引量：43H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生电气工程更多>>
- 猪I类白细胞抗原单克隆抗体的制备及其在非洲猪瘟病毒感染机制研究中的初步应用
- 2025年
- 猪I类白细胞抗原(SLA I)是机体内至关重要的免疫相关蛋白,是启动特异性细胞毒性T细胞(CTL)免疫应答的核心分子。在机体内,SLA I负责将内源性抗原肽递呈至细胞膜表面,由CD8+T细胞识别,启动机体适应性免疫应答。为了制备SLA I的单克隆抗体(MAb),本研究将SLA I-1*04:01等位基因胞外区序列与麦芽糖结合蛋白(MBP)序列连接,在大肠杆菌原核表达系统中表达,获得可溶性重组蛋白MBP-SLA I。经亲和层析纯化后,采用MBP-SLA I免疫BALB/c小鼠3次,采用ELISA检测小鼠血清抗体水平,对血清抗体效价在1:10 000以上的小鼠进一步冲击免疫后,分离小鼠脾脏B淋巴细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合。采用ELISA方法筛选阳性的杂交瘤细胞进行3次克隆纯化,最终筛选得到稳定分泌SLA I抗体的杂交瘤细胞株MAb-1A11。经ELISA检测纯化后的MAb-1A11效价可达1:3 200,经小鼠MAb抗体亚类鉴定试剂盒鉴定其重链为IgG2b,轻链为κ。采用western blot检测该抗体的特异性,结果显示,MAb-1A11能够识别猪肺泡巨噬细胞(PAM)表达的内源性SLA I,在42 ku处出特异性条带,而对HEK293T细胞中表达的同源物人白细胞抗原无交叉识别作用。利用MAb-1A11为一抗,采用western blot进一步检测非洲猪瘟病毒(ASFV)HLJ/18-6GD株感染的PAM中SLA I的表达水平,结果显示,随着ASFV感染时间的延长,SLA I表达水平出现轻微下降。本研究制备了SLA I的MAb,并初步将其应用于ASFV感染机制的研究中,为深入了解SLA I所受调控的机制提供了可靠工具。
- 王可欣Weldu Tesfagaber王婉尹丽孔惠张振江李芳高彩霞步志高赵东明
- 关键词：单克隆抗体WESTERNBLOT非洲猪瘟病毒
- 加系SPF大白、长白猪SLA-DQB1基因多态性研究
- 目的 探讨加系SPF大白猪和长白猪SLA-DQB1基因的多态性.方法 采集15头SPF大白猪和22头长白猪血液,提取外周血淋巴细胞,提取总RNA,经RT-PCR扩增获得SLA-DQB1基因进行测序,对获得的SLA-DQB...
- 江新杰高彩霞权金强李昌文路小野陈洪岩
- 关键词：SPF大白猪长白猪多态性
- 实验用荣昌猪SLA-1等位基因鉴定及分子遗传特征分析被引量：1
- 2023年
- 旨在明确实验用荣昌猪SLA遗传背景,深入研究SLA-1分子相关的抗原递呈和免疫应答机制,本研究对27头荣昌猪采集抗凝血,分离外周血淋巴细胞,提取总RNA,设计特异性引物对SLA-1基因进行RT-PCR扩增、克隆和测序,对获得序列的分子特征进行分析。结果显示,荣昌猪中共获得11个SLA-1等位基因,其中,9个为新等位基因,全部获得GenBank登录号和ISAG SLA命名委员会官方命名,SLA-1^(*)24:01等位基因在该群体中频率最高。SLA-1基因编码区全长1086 bp,存在127个核苷酸多态位点,非同义单核苷酸多态性位点数高于同义单核苷酸多态性位点数。核苷酸多样度为0.0449,单倍型多样度为1,平均核苷酸差异数为48.782,G+C含量为64.9%。SLA-1基因编码的361个氨基酸中,有75个氨基酸变异位点;第2和第3外显子编码区多态性最高,且第2外显子区域的氨基酸变异程度高于第3外显子区,组成抗原肽结合槽6个口袋的33个关键氨基酸位点中,11个在人与荣昌猪之间高度保守,与β2-微球蛋白结合的19个关键氨基酸位点中,10个保持一致,CD8分子与MHC结合的关键氨基酸位点中,只有225(Thr/Ser)和228(Thr/Met)位点不同。同源性和系统进化树分析表明,SLA-1^(*)10:03和SLA-1^(*)18:03分别与人HLA-A^(*)02:01和HLA-A^(*)11:01等位基因的同源性最高,荣昌猪与亚洲野猪、巴马小型猪和融水小型猪等亚洲猪种具有较近的亲缘关系。本研究成功获得了中国地方猪种荣昌猪SLA-1基因,发现其具有极为丰富的多态性,为揭示荣昌猪的SLA遗传背景和开展异种移植研究奠定了遗传学基础。
- 刘弘毅罗霆宇李昌文于海波路小野陈洪岩夏长友高彩霞
- 关键词：荣昌猪分子特征
- 实验动物鸡抗病育种的遗传质量控制
- 鸡做为实验动物是从1789年Pasteur用鸡做鸡霍乱研究开始。近年来，随着养鸡生产集约化程度的提高，传染性疾病的肆虐严重影响着我国各种鸡品种。疾病从单一病原体发展成复合病原体。一只鸡往往被多种病原感染。疾病的复杂化，隐...
- 高彩霞韩凌霞
- 关键词：实验动物抗病育种
- 文献传递
- 畜禽疫病防控用SPF猪的开发被引量：5
- 2018年
- 本文就SPF猪在畜禽疫病防控研究中的重要性和国内外研究现状进行了阐述,分析了目前存在的问题,介绍了培育标准化SPF猪种群常用的方法,并探讨了SPF猪的应用前景,旨在为畜禽疫病防控研究用实验动物的开发提供一定的理论指导。
- 高彩霞辛畅陈洪岩
- 关键词：SPF猪
- SLA-1不同等位基因与病毒CTLs表位特异性结合的研究
- 高彩霞姜骞刘家森郭东春刘大飞刘春国李志杰仇铮田进曲连东
- 实验用SPF大白猪和长白猪SLAⅡ类基因多态性研究被引量：3
- 2017年
- 目的研究实验用SPF大白猪和长白猪SLA II类基因的多态性。方法分别采集15头SPF大白猪和22头长白猪抗凝血,分离外周血淋巴细胞,提取总RNA,反转录后RT-PCR扩增DQB1、DRB1和DQA基因并进行测序,分析获得的SLA II类等位基因序列多态性。结果 3个基因共获得25个等位基因,包括8个DQB1,10个DRB1和7个DQA,全部获得ISAG SLA命名委员会的官方命名,其中3个等位基因首次提交完整序列,命名为DQB1*02:12(KU754590)、DQB1*02:03(KU754591)和DRB1*06:07(KU754601),3个DQA等位基因为新发现等位基因。SPF大白猪和长白猪DQB1等位基因与外源性抗原结合的15个氨基酸中,共有5个氨基酸具有高度保守性;DRB1等位基因的16个外源性抗原识别位点中,仅1个位点高度保守;DQA等位基因19个抗原结合位点中,有11个高度保守。SLA II类基因氨基酸序列分子进化树表明,3个基因分别聚为两大类,与国外Yucatan小型猪具有较近的亲缘关系,而与其他猪种未表现明显遗传距离相隔。结论成功鉴定了大白猪和长白猪的25个SLA II类等位基因,发现其具有较为丰富的多态性,所获得SLA II类等位基因在其他品种猪也广泛分布,具有多样性,这一研究结果对大白猪和长白猪发展为经典实验动物模型具有重要作用。
- 江新杰权金强李昌文路小野陈洪岩杨春文高彩霞
- 关键词：SLA
- 不同MD免疫抗性鸡羽髓中疫苗毒与超强毒的复制动力学及相关性研究被引量：3
- 2011年
- 为研究具有不同抗性的马立克氏病(MD)疫苗免疫鸡羽髓后,疫苗毒和超强毒(vvMDV)的复制动力学及两种病毒载量的相关性,本实验对经火鸡疱疹病毒(HVT)FC126疫苗株免疫1周后(1wpv),攻击vvMDV Md5株G3系和G7系鸡羽髓中的HVT和vvMDV载量进行定量检测及相关性分析。结果显示,G3系和G7系鸡群羽髓中的vvMDV载量始终高于疫苗毒。其中,G3系鸡群在免疫和攻毒后的相同时间内,疫苗毒与vvMDV载量的消长规律基本一致,均在感染后第4周(4wpi)出现峰值,6wpi降至最低水平,两种病毒载量多表现为正相关,6wpv～8wpv为持续显著正相关;G7系的两种病毒的复制动力学存在差异:vvMDV载量从攻毒后第6周呈增长趋势,而疫苗毒在4wpv出现峰值后迅速下降,两种病毒载量多表现为负相关。本研究表明,免疫遗传基因在对病毒的抵抗中起主要作用,为MDV的感染机制和疫苗免疫机理的研究提供实验依据。
- 蔡文博牛成明高彩霞李行司昌德张伟韩凌霞
- 关键词：HVT
- 中国MHC-B单倍型纯合鸡群的建立
- 引言鸡主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)包含B和Rfp-Y两个基因座,B基因主要包括BF (ClassI)、BL (ClassⅡ)和BG (ClassⅣ)基因...
- 高彩霞李行武永淑杨柳张伟于海波韩建林韩凌霞
- 关键词：单倍型
- 文献传递
- 实验用巴马小型猪SLA-DRB1基因克隆及分子特征分析
- 目的：为了研究实验用巴马小型猪SLA-DRB1基因的分子特征,为实验用巴马小型猪SLA单倍型猪群的建立奠定基础.
方法：采集20头(7♂,13♀)小型猪的抗凝血,分离外周血淋巴细胞,提取RNA,RT-PCR扩增...
- 高彩霞姜骞刘家森郭东春韩凌霞曲连东
- 关键词：实验动物巴马小型猪分子特征
- 文献传递
