尤清菊
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
- 供职机构：天津医科大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 叶酸对缺氧新生鼠神经干细胞体外增殖的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨叶酸(FA)对缺氧条件下体外新生大鼠神经干细胞(NSCs)增殖的影响。方法:取24h内新生SD大鼠大脑半球,进行NSCs原代培养。分为正常对照组、缺氧模型组、缺氧叶酸添加组、缺氧叶酸缺乏组共4组。培养第3天除正常对照组外其他3组进行缺氧处理,造成缺氧损伤;培养6d后收集细胞,进行MTT法、5-溴脱氧尿苷(BrdU)掺入法和免疫组化双标记法检测叶酸对缺氧NSCs增殖的影响。结果:MTT检测显示,正常对照组细胞OD值较缺氧模型组高,差异有统计学意义(P<0.05);缺氧叶酸添加组OD值明显高于其它缺氧组,差异均有统计学意义(P<0.05);免疫组化双标阳性率比较,缺氧模型组双标阳性率明显下降,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),缺氧叶酸添加组明显高于其它几组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:长时间持续缺氧可造成神经干细胞缺氧损伤;添加叶酸使缺氧神经干细胞增长率增加,提示叶酸能促进体外缺氧新生鼠神经干细胞的增殖。
- 尤清菊张绪梅刘欢杨阳赵琳刘佳杰黄国伟
- 关键词：叶酸神经干细胞缺氧增殖
- 同型半胱氨酸对体外神经干细胞增殖与凋亡的影响及其机制的探讨
- 目的:研究同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对体外胎鼠神经干细胞(neuralstem cells,NSCs)增殖和凋亡作用的影响,探讨其相关机制。
方法:取孕14-16 d胎鼠脑组织,采用机械吹打法...
- 尤清菊
- 关键词：同型半胱氨酸神经干细胞免疫组化法动物模型
- 文献传递
- 叶酸对体外缺氧新生大鼠神经干细胞Hes5基因表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨叶酸对体外缺氧新生大鼠神经干细胞Hes5mRNA、蛋白表达的影响。方法:分离培养24h新生SD大鼠脑神经干细胞;将细胞分为4组:正常对照组、缺氧模型组、缺氧叶酸添加组、缺氧叶酸缺乏组;于增殖第3天将除正常对照组外的其他3组细胞进行缺氧培养,6h后取出,继续培养至第6天收集细胞;用台盼蓝染色计数缺氧损伤后的各组细胞密度;RT-PCR方法检测Hes5mRNA表达;Westernblot方法检测Hes5蛋白表达。结果:缺氧叶酸添加组细胞密度高于其他各组,缺氧叶酸缺乏组最低,差异均有统计学意义(P<0.05);RT-PCR结果显示,缺氧叶酸添加组的Hes5mRNA表达量高于其余3组,缺氧叶酸缺乏组表达最少,各组间差异有统计学意义(P<0.05);Westernblot检测表明,缺氧叶酸添加组Hes5蛋白表达高于其他各组,缺氧叶酸缺乏组Hes5蛋白表达量最低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:体外神经干细胞缺氧损伤造模成功;叶酸对缺氧损伤的神经干细胞增殖有促进作用,可为预防和治疗脑缺血缺氧损伤提供依据。
- 赵琳张绪梅刘欢杨阳尤清菊刘佳杰黄国伟
- 关键词：叶酸缺氧神经干细胞
- 体外缺氧条件下新生鼠神经干细胞pERK1/2表达与叶酸的影响
- 2010年
- 背景:课题组前期实验已经证实,神经干细胞在正常培养条件下,叶酸可通过丝裂原活化蛋白激酶通路激活ERK1/2的磷酸化,进而促进神经干细胞的增殖。目的:探讨叶酸在体外缺氧条件下对神经干细胞外信号调节蛋白激酶pERK1/2表达的影响。方法:采用无血清培养法体外分离培养新生鼠神经干细胞,以1×108L-1接种于培养瓶,设立4组,除正常对照组外,缺氧模型组、叶酸缺乏组、叶酸添加组细胞均于第3天放入自制缺氧装置,37℃恒温箱中缺氧培养6h,4组的叶酸含量分别为4mg/L,4mg/L,0.65mg/L,8mg/L。收集增殖6d的细胞,锥虫蓝计数细胞密度,RT-PCR法检测pERK1/2 mRNA的表达,Westernblot法检测pERK1/2蛋白的表达。结果与结论:与正常对照组比较,缺氧模型组神经干细胞增殖能力、pERK1/2 mRNA及蛋白的表达均明显降低。与缺氧模型组比较,叶酸添加组能促进缺氧条件下神经干细胞增殖以及pERK1/2 mRNA、蛋白的表达,而叶酸缺乏组则抑制缺氧条件下神经干细胞的增殖以及pERK1/2 mRNA、蛋白的表达,各组间比较差异有显著性意义(P<0.001)。证实添加叶酸后可激活ERK1/2磷酸化,进而促进缺氧条件下神经干细胞的增殖。
- 杨阳黄国伟张绪梅赵琳尤清菊刘佳杰
- 关键词：缺氧培养神经干细胞
- 叶酸对体外缺氧神经干细胞保护作用的研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究叶酸(folate,Fol)对体外培养缺氧神经干细胞(neural stem cell,NSCs)增殖、凋亡和抗氧化能力的影响。方法采用无血清体外细胞培养方法,培养新生大鼠NSCs。将其分为4组,即正常对照(normal control,NC)、缺氧模型(hypoxia,Hyp)、缺氧叶酸缺乏(Hpy+Fol-D)和缺氧叶酸添加(Hpy+Fol)组。除NC组以外,其余三组放入缺氧环境中6h,造成缺氧损伤。采用MTT法检测缺氧后细胞增殖能力的变化;收集增殖6d的细胞,测定缺氧后NSCs超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的活性;采用Western blot方法检测caspase-3的活性表达水平。结果与NC组比较,缺氧干预后NSCs增殖明显下降,SOD和GSH-PX活性降低,caspase-3的活性表达增加;Hpy组细胞增殖能力、SOD和GSH-PX活性均显著高于Hpy+Fol-D组,低于Hpy+Fol组(P<0.05),caspase-3的活性表达显著高于Hpy+Fol组,低于Hpy+Fol-D组(P<0.05)。结论缺氧可造成NSCs损伤,叶酸缺乏能使缺氧后NSCs的损伤加重,补充叶酸能促进缺氧后NSCs增殖,提高其抗氧化能力,抑制NSCs凋亡,对体外大鼠NSCs的缺氧损伤恢复有促进作用。
- 刘佳杰刘欢张绪梅杨阳尤清菊黄国伟
- 关键词：叶酸神经干细胞缺氧增殖凋亡
- 叶酸对缺氧大鼠神经干细胞Notch信号通路相关基因mRNA表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的研究叶酸对缺氧大鼠神经干细胞(NSCs)增殖及Notch信号通路相关基因mRNA表达的影响。方法无血清培养基原代培养新生大鼠NSCs,细胞分为对照组(Control),缺氧组(Hypoxia),叶酸组(Folate)和叶酸缺乏组(Folate-D)。除Control组外,其余3组缺氧6h。增殖第7日收集细胞,MTT法检测细胞活力,实时荧光定量PCR检测Notch1、Hes1/5、Mash1和Ngn1/2基因mRNA表达。结果 Folate组细胞活力高于Hypoxia组,Folate-D组细胞活力低于其他3组(P<0.05);Folate组Notch1、Hes1/5mRNA表达高于Hypoxia组,Folate-D组该3个基因mRNA表达低于其他3组(P<0.05);Folate组Ngn1/2mRNA表达低于Hypoxia组(P<0.05);Mash1mRNA表达在各组间差别无统计学意义(P>0.05)。结论叶酸能促进缺氧损伤NSCs增殖,上调Notch信号通路中Notch1和Hes1/5基因表达。
- 刘欢黄国伟赵琳尤清菊
- 关键词：神经干细胞叶酸缺氧NOTCH信号通路
