刘立丽 作品数:41 被引量:82 H指数:5 供职机构: 浙江理工大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 环境科学与工程 医药卫生 更多>>
一种超临界CO<Sub>2</Sub>萃取黑果枸杞花青素的方法及其应用 本发明提供了一种利用超临界CO<Sub>2</Sub>萃取黑果枸杞花青素的方法,该方法优化了萃取温度、压力、时间及夹带剂,以提高花青素的提取率及纯度。通过高效液相色谱法(HPLC)分析,确认提取物中主要成分为矮牵牛素‑3... 仵培 鲍康德 刘佳佳 张蕾 王霞 丁雨 周志奎 刘立丽 姚礼高家蚕富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白基因BmSPARC的表达及亚细胞定位 被引量:1 2009年 富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)是一种小分子酸性糖蛋白,在有机体内广泛分布,通过与胞外基质蛋白相互作用而表现出多种生物活性。从家蚕蛹cDNA文库中获得SPARC基因(BmSPARC)的cDNA序列,GenBank登录号为FJ602783。利用生物信息学方法对此序列进行分析表明,BmSPARC的cDNA序列全长1 626 bp,含有1个954 bp的开放阅读框(ORF),编码317个氨基酸残基;同源性比较显示该基因编码蛋白的氨基酸序列在无脊椎动物中具有较高的保守性。将BmSPARC片段在大肠杆菌BL21中表达并纯化后,免疫新西兰兔制备多克隆抗体,通过亚细胞定位研究发现该基因表达蛋白主要存在于细胞质中。利用实时荧光定量PCR的方法,对BmSPARC在家蚕不同发育时期、不同组织中的mRNA转录水平进行比较,并采用Western blotting方法对BmSPARC蛋白的表达进行分析,结果表明:BmSPARC在家蚕卵期和5龄幼虫丝腺组织中无表达,而在5龄幼虫、蛹、蛾发育时期及5龄幼虫的头部、脂肪体、中肠、马氏管、卵巢、表皮和气门等7个组织中均有不同程度的表达,其中在蛾期和5龄幼虫卵巢中的表达量较高。研究结果为进一步探讨BmSPARC在家蚕生长发育过程中的生物学功能打下了基础。 朱玉娟 吕正兵 陈琴 聂作明 王丹 陈健 刘立丽 郑青亮 陈剑清 沈红丹 盛清 全滟平 徐杰 张文平 吴祥甫 张耀洲关键词:家蚕 亚细胞定位 实时荧光定量PCR 放射性核素^(95)Zr在土壤中吸附的研究 被引量:6 2002年 应用同位素示踪技术研究了95Zr在小粉土、黄红壤、青紫泥和海泥中的吸附 ,并研究了不同比活度95Zr对土壤吸附比的影响 ,测定了吸附等温线。结果表明 ,95Zr进入淹水土壤后迅速被土壤吸附达到吸附平衡。不同土壤有不同的饱和吸附率 ,海泥 >青紫泥 >小粉土 > 赵希岳 史建君 刘立丽 张永熙 陈传群 王寿祥关键词:放射性核素 ^95ZR 土壤吸附 家蚕脂围蛋白(PLIN)基因的序列分析及表达与亚细胞定位研究 2009年 脂围蛋白(perilipin)与脂肪细胞脂类代谢的调节有关。从家蚕蛹cDNA文库中筛选到一条cDNA开放阅读框(ORF)序列长度为918 bp的基因,预测其编码305个氨基酸残基,蛋白分子质量约32.5 kD。经NCBI比对发现该蛋白具有部分脂围蛋白的保守结构域,因此将该ORF序列命名为BmPLIN基因。将该基因插入到载体pET-28a(+)的多克隆位点,构建重组表达质粒pET-28a(+)-BmPLIN,并转化大肠杆菌中进行原核表达得到带有His标签的融合蛋白,表达的融合蛋白以包涵体形式存在。用纯化后的融合蛋白为抗原免疫大白兔获得多克隆抗体,ELISA间接法测定抗体的效价达到1∶12 800以上。通过荧光定量PCR和Western blotting技术对BmPLIN基因及其编码蛋白在家蚕5龄幼虫各个组织器官中的转录、表达水平进行分析的结果是:BmPLIN基因mRNA在家蚕5龄幼虫各组织器官中的转录水平由高到低依次为生殖腺(卵巢和睾丸)、脂肪体、肠、表皮、头部、马氏管、丝腺、气门,在家蚕5龄幼虫的生殖腺(卵巢和睾丸)中有明显的BmPLIN蛋白特异条带。以家蚕Bm5细胞进行免疫细胞实验的结果显示,BmPLIN蛋白在细胞质和细胞核中均有分布。 姚斐 许红 舒特俊 盛清 吕正兵 陈健 聂作明 王丹 刘立丽 沈红丹 舒建洪 陈剑清 吴祥甫 张耀洲关键词:家蚕 蛋白纯化 亚细胞定位 家蚕孤雌生殖差异脂蛋白30K lipoprotein precursor基因的克隆与生物信息学分析 被引量:5 2008年 应用二维凝胶电泳(2-DE)技术分离家蚕孤雌生殖蚁蚕总蛋白,并和正常蚁蚕总蛋白进行比较,得到46个可能与家蚕孤雌生殖相关的差异蛋白点。对这些差异蛋白点进行胶内酶解后基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOFMS)分析,经数据库搜索鉴定,确定其中一个差异蛋白点为脂蛋白30Klipoprotein precursor(30KLPP)。通过5′-RACE技术克隆到30KLPP脂蛋白的全长cDNA序列。生物信息学分析显示该差异蛋白基因全长917bp。编码261个氨基酸,理论分子质量为30.013kD,等电点为7.193;结构域和三级结构预测显示该蛋白包含1个Lipoprotein_11结构域和12个β-折叠。预测其信号肽概率为1.000,定位在1~20aa区域,即可能存在信号肽。细胞定位预测显示该蛋白可能分泌到胞外(SP值为0.934)。分析结果有助于进一步研究30KLPP脂蛋白结构与功能的关系。 王丹 聂作明 龙晓辉 刘立丽 陈健 吕正兵 陈芳 吴祥甫 张耀洲关键词:家蚕 孤雌生殖 LPP 耐辐射奇球菌生物修复二氯乙烷类化合物初探 由具毒废物排放所引起的环境污染已成为全球关注的热点问题,然而对污染物处理的有效方法不多,因此,研究和发展对废物处理的新方法十分迫切。生态系统污染不是单因子、单项污染物的污染效应,而是—个复杂的、涉及多项因子相互联系的联合... 刘立丽 华跃进 高冠军 盛多红关键词:耐辐射奇球菌 生物修复 卤代烷烃 复合污染 文献传递 ^(95)Zr在鲫鱼体内的分布及在水生生态系统中的消长动态 被引量:5 2003年 采用同位素示踪技术研究了鲫鱼对^(95)Zr的吸收和在其体内的分布动态以及95Zr在水生生态系统中的行为特性,并运用非线性拟合方法建立其数学模型。结果表明:(1)从水体中引入的95Zr由于沉降、土壤吸附、被鱼体摄入和金鱼藻的吸收、吸附作用使水体中的95Zr比活度呈快速下降,其消失动态符合二项指数衰减规律,Cw=43.36e-1.7439t+12.85e-0.1467t。(2)金鱼藻对95Zr有较强的吸收、吸附能力,其比活度变化动态(1~28d)符合单项指数衰减规律,Ch=166.69e-0.0361t,其浓集系数(CF值)随时间而增大,至试验结束时(28d)高达321.12。(3)鲫鱼从水体中摄入和吸收95Zr的主要器官是肠胃道(内脏),与水体直接接触而吸附、吸收的95Zr主要集中在鱼鳃和鱼鳍中,肉、骨和鱼卵中的比活度较低(略高于本底水平),表明通过肠胃道摄入和鳃、鳍等组织吸附、吸收的95Zr不易向肉、骨和鱼卵等内部组织输运,指数回归分析表明鲫鱼(全鱼)中95Zr的变化动态符合二项指数规律,C=12.12(e-0.2045t-e-1.4470t). 刘立丽 史建君关键词:鲫鱼 水生生态系统 新形势下做好高校二级学院办公室主任工作的思考 被引量:5 2016年 高校二级学院办公室作为学校的基层管理机构,发挥着承上启下、协调左右、沟通内外的中枢作用,其工作的优劣直接关乎学院的整体形象和威信。在新形势下,二级学院办公室主任应结合工作实际,准确把握办公室的特点和办公室主任的岗位素质要求,外塑形象,苦练内功,不断增强本领,大胆开拓创新,为二级学院的建设发展做出应有的贡献。 楼玉兰 梁宗锁 张凯 刘立丽 黄梦倩关键词:高校管理 管理研究 响应面法优化产XRN1蛋白发酵培养基 2013年 应用Plackett-Burman(PB)设计法对影响XRN1蛋白表达的发酵培养基组分进行优化,选取的8个相关因子为酵母提取物、硫酸钙、MgSO4.7H2O、甘油、硫酸钾、磷酸、硫酸铵和氢氧化钾。统计分析表明,影响XRN1蛋白表达的关键因子为酵母提取物、硫酸镁和硫酸钾。在进行最陡爬坡试验逼近3个关键因素的最大响应区域的基础上,采用Box-Behnken Design法对发酵培养基组分进行优化,通过响应面法分析最佳条件为酵母提取物0.45%、硫酸镁0.38%和硫酸钾1.4%。在最佳培养条件下,工程菌生物量增加约0.5倍,蛋白表达量提高近40%。 吴迎春 马琴琴 丁先锋 张凯 刘立丽 郭江峰家蚕孤雌生殖差异脂蛋白30K lipoprotein precursor的基因的克隆及其生物信息学分析 应用二维凝胶电泳(2-DE)技术分离孤雌生殖蚁蚕总蛋白,和正常蚁蚕总蛋白进行比较,得到46个可能与孤雌生殖相关的差异蛋白点。对这些差异蛋白点进行胶内酶解后基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOFM... 王丹 聂作明 龙晓辉 刘立丽 陈健 吕正兵 陈芳 吴祥甫 张耀洲关键词:孤雌生殖 差异蛋白 生物信息学分析 文献传递