孙靖
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划广东省社会发展科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 猪生殖与呼吸综合征病毒宁夏分离株ORF5基因的克隆表达及其表达产物的活性分析被引量：2
- 2009年
- 参考已发表的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因序列,设计合成了1对覆盖完整ORF5基因区段的引物,克隆了PRRSV NX/HY株的ORF5基因(登录号为EU600287),并进行了序列比较。将该基因克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,构建了融合表达质粒pGEX-6P-1-5并转化BL21,对表达蛋白进行Western-blot分析。结果表明,NX/HY分离株ORF5基因与PRRSV JX1、CH-1a株的核苷酸序列同源性分别为99.2%和95.2%,推导的氨基酸序列的同源性分别为98.5%和92.5%;层析扫描分析显示,目的蛋白的含量约占菌体总蛋白的30%,且具有良好的反应原性。GP5蛋白的表达为建立相应的血清学诊断方法奠定了基础。
- 陈妍田宏尹双辉尚佑军孙靖刘湘涛
- 关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白原核表达
- 涉税犯罪成因与对策的法律思考
- 孙靖
- 关键词：涉税犯罪法律
- 口蹄疫病毒非结构蛋白3AB基因的表达及反应原性鉴定
- 2009年
- [目的]研究口蹄疫病毒非结构蛋白3AB基因的表达及反应原性鉴定。[方法]以含有FMDV 3ABC基因的质粒为模板,应用RT-PCR技术扩增口蹄疫病毒非结构蛋白3AB基因并进行序列测定,将3AB基因克隆至表达载体pET-28a(+),选取阳性克隆转化BL21感受态用IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE鉴定与W estern-bolt检测分析。[结果]经SDS-PAGE和W estern-bolt分析表明,在大肠杆菌中成功表达了3AB蛋白,表达的目的蛋白能与FMDV阳性血清发生特异性反应。[结论]该项研究为应用以重组FMDV非结构蛋白为抗原建立感染和免疫动物的鉴别诊断方法提供了依据。
- 孙靖向华靳野蔡建平王贵平尚佑军宣华刘湘涛
- 关键词：FMDV非结构蛋白反应原性
- 口蹄疫病毒基因组结构及功能被引量：3
- 2007年
- 口蹄疫病毒的基因组结构和功能是开展口蹄疫研究工作的基础。口蹄疫病毒的基因组由5’UTR、ORF和3’UTR及Poly(A)组成,全长约8500nt。本篇对基因组结构和功能作详细叙述。
- 孙靖于海峰
- 关键词：口蹄疫病毒基因组
- 诺氟沙星人工抗原的合成被引量：4
- 2007年
- 采用碳二亚胺(EDC)法将诺氟沙星(NFLX)分别与载体蛋白BSA和OVA进行偶联。用于制备免疫抗原NFLX-BSA和包被抗原NFLX-OVA。通过对产物进行紫外扫描和SDS-PAGE,证明半抗原与载体偶联成功。以免疫原NFLX-BSA免疫BALB/C小鼠45 d后,通过间接ELISA方法检测效价达1:32 000。这一结果为进一步制备抗NFLX单克隆抗体提供了良好的免疫原。
- 于海峰谭建华孙靖张森李岩松
- 关键词：诺氟沙星人工抗原碳二亚胺
