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一株牛皮肤成纤维细胞BEF及其应用: 本发明属于细胞生物学与生物技术领域，具体涉及一株牛皮肤成纤维细胞BEF及其应用。本发明提供的牛皮肤成纤维细胞BEF用于结节性皮肤病病毒的分离、培养，具有病毒传代稳定、病毒滴度高，而且可以防止因使用原代细胞而使所分离的病毒...; 贾怀杰景志忠邓瑞雪王晓霞郑海学郭建宏刘学荣付宝权刘湘涛罗建勋潘玉平胡小慧郭爱民娄忠子蒙泽菁邵文华陈国华房永祥何小兵安芳兰武发菊谭金龙董文教

口蹄疫病毒P12A基因在BHK-21细胞中的表达及其产物的免疫原性研究: 本研究通过分子生物学技术对口蹄疫基因工程亚单位疫苗的研制新途径进行了研究,取得了以下研究成果:1.构建了pBABE-P12AEGFP载体。以牛源A型FMDV XJ99流行株P12X阳性克隆质粒和PEGFP-N1阳性克隆质...; 安芳兰; 关键词：绿色荧光蛋白基因逆转录病毒载体 BHK细胞; 文献传递

A型口蹄疫病毒P1基因与GFP基因的重组逆转录病毒载体构建: 根据逆转录病毒表达载体pBABA-puro的特点及多克隆酶切位点要求设计引物，以A型FMDV XJ-99的Pl2X基因和GFP基因的阳性克隆质粒为模板，用PCR方法扩增各基因片段。酶切后分步定向亚克隆至逆转录病毒表达载体...; 刘艳红安芳兰刘俊林李炯刘相涛尚佑军; 关键词：口蹄疫病毒衣壳蛋白基因; 文献传递

逆转录病毒载体介导的口蹄疫病毒衣壳前体基因和绿色荧光蛋白基因在BHK-21细胞中的表达被引量：11: 2009年; 为建立逆转录病毒载体介导的口蹄疫病毒衣壳前体蛋白哺乳动物细胞表达体系,将口蹄疫病毒(FMDV)衣壳前体基因(P1)和绿色荧光蛋白基因(EGFP)依次插入逆转录病毒载体pBABEpuro构建重组逆转录病毒载体pBABEpuro-P1-2A-EGFP。将重组逆转录病毒载体和pVSV-G质粒载体共转染GP2-293包装细胞,用产生的重组逆转录病毒感染幼仓鼠肾细胞(BHK-21)。荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,用嘌呤霉素筛选抗性细胞,间接免疫荧光方法检测细胞中FMDV衣壳前体蛋白的表达。结果表明,重组逆转录病毒载体pBABEpuro-P1-2A-EGFP构建正确,绿色荧光蛋白和FMDV衣壳前体蛋白在细胞中能稳定表达。FMDV衣壳前体蛋白基因细胞表达体系的成功建立为进一步开展口蹄疫亚单位疫苗的研制奠定了基础。; 李炯刘艳红安芳兰刘俊林刘湘涛尚佑军殷宏; 关键词：逆转录病毒载体口蹄疫病毒绿色荧光蛋白基因 BHK-21细胞

一种用于猪牛口蹄疫疫苗的双相纳米乳佐剂及其制备方法和用途: 本发明公开了一种用于猪牛口蹄疫疫苗的双相纳米乳佐剂及其制备方法和用途。本发明的双相纳米乳佐剂由表面活性剂、助表面活性剂以及油相组成，其中，所述的表面活性剂选自Tween80、油酸聚氧乙烯酯、聚氧乙烯双油酸酯、Span80...; 殷宏刘学荣陈苗苗安芳兰武发菊董文教张荣武永淑

口蹄疫灭活疫苗大规模生产关键技术与配套装备研发及产业化应用: 殷宏刘学荣安芳兰顾警钟隋涌张云德郑海学杨进才武发菊董文教张春祥万玉林张军丁小龙刘强; 1.项目所属科学技术领域生物制药工程、畜牧业健康养殖和重大动物疫病防控领域。 2.主要科技内容及其它中国实施制造强国战略第一个十年的行动纲领《中国制造2025》，明确提出通过“三步走”实现制造强国的战略目标。中国已成为全...; 关键词：; 关键词：口蹄疫灭活疫苗生产工艺动物疫病

共表达口蹄疫病毒衣壳前体蛋白P1-2A基因和蛋白酶3C基因牛肾细胞株的筛选及稳定性被引量：5: 2008年; 【目的】筛选稳定表达口蹄疫病毒衣壳蛋白的牛肾细胞(Madin-Darby bovine kidney,MDBK)株。【方法】采用聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法从重组质粒pMD-P1-2A和pMD-3C中分别扩增口蹄疫病毒衣壳前体蛋白P1-2A基因和蛋白酶3C基因,将两基因依次插入逆转录病毒载体pBABE-puro。重组逆转录病毒载体pBABE-puro/P1-2A-3C和pVSV-G质粒载体用脂质体介导共转染GP2-293包装细胞。产生的重组逆转录病毒感染MDBK细胞后使用嘌呤霉素筛选抗性细胞。利用克隆环套取法得到单克隆细胞。经间接免疫荧光和酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测MDBK细胞中衣壳蛋白的表达,并在电镜下观察口蹄疫病毒空衣壳。【结果】成功筛选到稳定表达口蹄疫病毒衣壳蛋白的MDBK细胞株,衣壳前体蛋白P1-2A在蛋白酶3C裂解作用下正确组装成空衣壳。【结论】该研究为口蹄疫亚单位疫苗的研制提供了实验材料。; 李炯刘艳红刘湘涛尚佑军刘俊林安芳兰殷宏; 关键词：逆转录病毒载体口蹄疫病毒衣壳蛋白

一种A型口蹄疫亚单位疫苗的制备方法: 本发明涉及一种制备用于预防因A型口蹄疫病毒引起的动物疾病的亚单位疫苗，以及这种方法制备的疫苗。本发明疫苗的制备方法是：设计引物与模板并用聚合酶链式反应分别制备出口蹄疫病毒的P12X基因和3C基因，再将所得到的P12X基因...; 刘艳红刘湘涛刘俊林李炯安芳兰田宏尚佑军; 文献传递

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安芳兰