梁胜华
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
- 供职机构：复旦大学更多>>
- 相关领域：化学工程生物学更多>>
- 一种生产5’－呈味核苷酸的方法
- 本发明属于生化工程技术领域，具体涉及一种以DNA重组技术构建基因工程菌，对该基因工程菌进行突变筛选，并利用高活性基因工程菌生产5’－核苷酸的方法。包括如下步骤：1.利用重组DNA技术，构建酸性磷酸酶表达载体，并转化大肠杆...
- 梁胜华
- 文献传递
- 基因工程菌酶法合成抗癌新药6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷被引量：3
- 2007年
- 6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷(MePdR)是一种新型抗癌药物,它作为药物前体应用于PNP自杀基因治疗系统可以选择性杀伤肿瘤细胞。本实验构建了一个高效表达大肠杆菌来源的嘌呤核苷磷酸化酶重组质粒,并利用基因工程菌以15mmol/L 6-甲基嘌呤和60mmol/L 2′-脱氧尿苷为底物合成6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷,在40mmol/L pH7.0的磷酸缓冲液中,2%菌体在55℃反应2h,转化率可达83.78%。用硅胶制备薄层提纯得到白色针状晶体,收率为76.4%。HPLC测定该产物纯度99.3%,核磁共振鉴定该产物为MePdR。
- 高彤李文舟梁胜华李晓晖任大明霍旭辉刘万峰乔宾福
- 关键词：嘌呤核苷磷酸化酶工程菌酶法合成
- 用基因工程菌合成6－甲基嘌呤－2′－脱氧核苷的方法
- 本发明属于生物制药技术领域，具体涉及一种以DNA重组技术构建基因工程菌，并利用该基因工程菌合成6－甲基嘌呤－2′－脱氧核苷(6－Methylpurine－2′－Deoxyriboside，MePdR)的方法。包括如下步骤...
- 梁胜华
- 文献传递
- 嘌呤核苷磷酸化酶温敏型表达载体的构建、表达及应用于腺苷转化的研究
- 2007年
- 通过双酶切方法将重组质粒上大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)基因克隆到pBV220表达载体上,构建了温敏型PNPase的表达载体pBV 220-PNP,转化大肠杆菌DH5α并使之表达.SDS-PAGE电泳结果显示出明显的特异表达条带,其分子量约为26 kDa.在此基础上研究了不同诱导条件对蛋白表达量的影响.分别以肌苷和尿苷为核糖供体研究重组菌转化腺苷的条件,发现肌苷最适合作为核糖供体,在30 mmol.L-1pH 7.5的Na2HPO4-KH2PO4缓冲液中,以30 mmol.L-1肌苷和10 mmol.L-1腺嘌呤作底物,加入0.5%基因工程湿菌体60℃反应3 h,腺苷的转化率为85.57%.
- 李晓晖徐珠洁梁胜华蒋欣茵任大明
- 关键词：大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶PBV220肌苷腺苷
- 一种生产5’－呈味核苷酸的方法
- 本发明属于生化工程技术领域，具体涉及一种以DNA重组技术构建基因工程菌，对该基因工程菌进行突变筛选，并利用高活性基因工程菌生产5’-核苷酸的方法。包括如下步骤：1.利用重组DNA技术，构建酸性磷酸酶表达载体，并转化大肠杆...
- 梁胜华李文周任大明
- 文献传递
- 用基因工程菌合成6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷的方法
- 本发明本发明属于生物制药技术领域，具体涉及一种以DNA重组技术构建基因工程菌，并利用该基因工程菌合成6-甲基嘌呤-2′-脱氧核苷(6-Methylpurine-2′-Deoxyriboside，MePdR)的方法。包括如...
- 梁胜华李文周高彤李晓晖任大明
- 文献传递
