陶章生
- 作品数:3 被引量:5H指数:1
- 供职机构:华中农业大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 拟南芥纤维素合酶的抗体制备与检测被引量:1
- 2012年
- 将拟南芥CesA家族基因的高变区克隆到融合表达载体pGEX-4T-3中,构建重组质粒pGEX-AtCe-sAs,在大肠杆菌JM109中经IPTG诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白(GST-AtCESAs)。采用GST亲和层析法纯化GST-AtCESAs并制备了多克隆抗体。Western-blotting检测表明,抗体Anti-CESA4和Anti-CE-SA7存在明显的交叉反应,Anti-CESA1、Anti-CESA3、Anti-CESA6、Anti-CESA2、Anti-CESA5、Anti-CESA8均能在拟南芥原生质膜上检测到特异免疫条带,这为进一步深入研究拟南芥纤维素合成机制提供了有利条件。
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- 关键词:纤维素合酶多克隆抗体拟南芥
- 光暗条件下拟南芥CESA2和CESA5对CESA6功能冗余的研究
- 拟南芥是重要模式植物,已发现10个纤维素合酶基因(AtCesA1~AtCesA10)。AtCESA1、AtCESA3、AtCESA6是初生壁纤维素合酶基因,AtCESA4、AtCESA7、AtCESA8是次生壁纤维素合酶...
- 陶章生
- 关键词:拟南芥抗体制备活性分析
- 文献传递
- 水稻纤维素合酶多克隆抗体的制备和鉴定被引量:4
- 2011年
- 纤维素合酶是参与纤维素-β1,4-葡聚糖链延伸的主要催化亚基,为进一步研究水稻中纤维素合酶的作用机理,采用DNA重组技术,将纤维素合酶基因CesA1、CesA2、CesA3克隆入表达载体pGEX-4T-3,构建重组质粒。在大肠杆菌JM109中,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后在原核细胞中成功表达了3种纤维素合酶的融合蛋白,通过谷胱甘肽巯基转移酶(GST)纯化系统获得融合蛋白,以此作为抗原免疫家兔,制备出效价高、特异性强的多克隆抗体。
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- 关键词:水稻纤维素合酶融合蛋白多克隆抗体