徐欣欣
- 作品数：36 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划山西省留学人员科技活动项目择优资助项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 一种适用于毕赤酵母的4-异丙基苯甲酸诱导表达系统及诱导表达方法
- 本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及一种适用于毕赤酵母的4‑异丙基苯甲酸诱导表达系统及诱导表达方法。本发明选用强组成型启动子P<Sub>GCW14</Sub>，并筛选了含有操纵基因CuO且具有启动活性的启动子P<Sub>...
- 刘波张伟徐欣欣张宇宏
- 新型GH45家族纤维素酶的智能挖掘及其在里氏木霉中的高效表达
- 2025年
- 利用生物信息学方法和蛋白性质预测模型挖掘新型GH45家族纤维素酶,实现其在里氏木霉中的高效表达,以期为畜牧饲料加工提供新的酶源。通过Preoptem蛋白模型预测工具结合公共数据库Uniparc,筛选得到Thielaviopsis punctulate来源的GH45家族纤维素酶TpCel45A。将其编码基因进行合成后构建表达载体,通过原生质体转化里氏木霉菌株,表达纯化获得重组TpCel45A蛋白并进行酶学性质测定。结果显示,重组TpCel45A的最适温度为55℃,最适pH为5.5,并展现出良好的热稳定性,80℃处理15 min后仍保持84%以上的酶活。重组TpCel45A具有宽泛的pH稳定性,在pH 4.0~9.0范围内处理1 h后剩余酶活力达52%以上。动力学参数测定显示,TpCel45A的Km为8.04 mg·mL^(-1),Vmax为19.04 mg·mL^(-1)·min^(-1)。kcat为377.1 s^(-1),催化效率kcat/Km值为46.9。TpCel45A的挖掘、鉴定及异源表达为纤维素酶的工业应用提供了新的酶源。此外,TpCel45A优异的热稳定性和pH稳定性使其在高温制粒工艺和不同pH条件下具有良好的应用潜力,尤其在饲料加工和生物质转化利用等领域具有重要的应用价值。
- 王瑾白静赵晶田健张伟王苑杨浩萌石美杉张贝贝徐欣欣黄火清
- 关键词：纤维素酶里氏木霉
- 耐热中性纤维素酶Cel6C及其编码基因和应用
- 本发明公开了耐热中性纤维素酶Cel6C及其编码基因和应用。本发明从特异腐质霉中分离得到耐热中性纤维素酶编码基因，其核苷酸序列为SEQ ID No.3所示，所编码的氨基酸序列为SEQ ID No.4所示；本发明进一步提供了...
- 张伟徐欣欣李金阳刘波张宇宏
- 文献传递
- 聚半乳糖醛酸酶优化基因及其表达载体和应用
- 本发明公开了聚半乳糖醛酸酶优化基因及其表达载体和应用。本发明首先在不改变聚半乳糖醛酸酶氨基酸序列的前提下，综合考虑密码子偏好性，GC含量的变化，密码子适应指数(CAI)，不稳定序列的删除，mRNA二级结构等因素，对聚半乳...
- 张宇宏王姣姣张伟刘波徐欣欣
- 文献传递
- 提高α-葡聚糖磷酸化酶的高温催化活性的方法及突变体TpαGPM1、基因和应用
- 本发明涉及生物技术领域，具体涉及提高α‑葡聚糖磷酸化酶的高温催化活性的方法及突变体<base:Italic>Tp</base:Italic>αGPM1、基因和应用。所述α‑葡聚糖磷酸化酶突变体<base:Italic>T...
- 张伟涂涛徐欣欣沈怡雯罗会颖刘波姚斌
- 来源于贝莱斯芽孢杆菌质粒的复制元件及其应用
- 本发明公开了来源于贝莱斯芽孢杆菌质粒的复制元件及其应用。本发明首先提供了从贝莱斯菌株内生性质粒中分离鉴定质粒的复制元件，其核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示。本发明进一步将从贝莱斯菌株内生性质粒中分离鉴定质粒的复制元...
- 刘波卢志军张伟徐欣欣张宇宏田辉
- 文献传递
- α-葡聚糖磷酸化酶5CC5单位点突变体E535V及其制备方法和应用
- 本发明公开了α‑葡聚糖磷酸化酶5CC5单位点突变体E535V及其制备方法和应用。本发明针对纤维素制淀粉的关键酶元件存在催化效率低、稳定性和适配性差、异源表达难等问题，通过宏基因组和公共数据库的大数据分析及生物信息学方法，...
- 徐欣欣张伟田健李彦君姚斌罗会颖刘波张宇宏
- 一株特异腐质霉纤维素酶高产突变株的鉴定分析被引量：1
- 2019年
- 高温真菌特异腐质霉(Humicola insolens)具有强大的纤维素酶分泌和纤维素降解能力,因此在生物质能源、饲料和纺织工业等领域中具有良好的应用前景。在特异腐质霉T-DNA随机插入突变体库中筛选得到一株纤维素酶高产菌株T53。在纤维素诱导培养条件下,突变株T53发酵上清中的滤纸酶活力、内切β-1,4葡聚糖酶活力、纤维二糖水解酶活力、β-葡萄糖苷酶活力以及木聚糖酶活力较野生型菌株分别提高了40%、60%、90%、10%、60%。蛋白电泳结果显示,T53菌株的胞外总蛋白特别是纤维素酶与半纤维素酶的分泌量较野生型菌株有显著提高。TAIL-PCR克隆鉴定了T53菌株中的T-DNA插入位点侧翼序列,结果表明T-DNA插入位点位于一个可能的C2H2型锌指蛋白类转录因子编码基因的上游启动子区域。这为揭示突变株T53中纤维素酶的高产分子机制奠定了重要基础,有助于理解特异腐质霉中纤维素酶的表达调控机制,为特异腐质霉纤维素酶高产工程菌的构建奠定了理论和技术基础。
- 陈媛李金阳张宇宏刘波张志伟徐欣欣张伟
- 关键词：特异腐质霉纤维素酶锌指蛋白
- 热稳定6-磷酸-β-葡萄糖苷酶TteBglB异源表达、分离纯化及酶学性质分析被引量：3
- 2014年
- 6-磷酸-β-葡萄糖苷酶（EC 3.2.1.86）催化6-磷酸-葡萄糖苷类化合物（如6-磷酸-纤维二糖、6-磷酸-纤维素寡糖）产生6-磷酸-葡萄糖而使纤维素完全分解,在微生物碳源利用过程中起重要作用。腾冲嗜热厌氧杆菌是一株嗜热厌氧微生物,提供了丰富的热稳定性蛋白基因资源。从该菌株中克隆编码6-磷酸-β-葡萄糖苷酶的基因Ttebgl B,并在E.coli BL21（DE3）进行了异源表达。结果表明,TteBglB催化反应的最适p H为6.0、最适温度为70℃,在pH 4-10或70℃时有着良好的稳定性;同时证实,TteBglB属于糖基水解酶家族1（GH1）成员,可不依赖Mn^2＋、Ni^2＋、Co^2＋或Fe^2＋等二价金属离子而发挥催化作用。以pNPβG6P为底物时,催化反应的Km为0.054 mmol/L,Kcat为81.47/min,Vmax为0.003992 mmol/min,酶比活为18.093 U/mg。
- 刘晴张宇微张宇宏徐欣欣张伟刘波顾青
- 关键词：糖苷水解酶
- 根瘤农杆菌介导的特异腐质霉的遗传转化方法及其表达载体
- 本发明公开了根瘤农杆菌介导的特异腐质霉遗传转化方法及其表达载体，属于特异腐质霉的遗传转化领域。本发明特异腐质霉遗传转化方法，包括：(1)构建目的基因的表达质粒；(2)将表达质粒转化根瘤农杆菌感受态细胞，得到转入目的质粒的...
- 徐欣欣张伟刘波张宇宏李金阳
- 文献传递
