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李红俊

作品数：8 被引量：19H指数：2
供职机构：蚌埠医学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 8篇医药卫生

主题

  • 3篇蛋白
  • 3篇荧光
  • 3篇肿瘤
  • 3篇细胞
  • 2篇荧光蛋白
  • 2篇荧光素
  • 2篇荧光素酶
  • 2篇小鼠
  • 2篇裸鼠
  • 2篇免疫
  • 2篇活体
  • 2篇活体成像
  • 2篇成像
  • 1篇单链
  • 1篇单链抗体
  • 1篇胆管
  • 1篇胆管癌
  • 1篇蛋白制备
  • 1篇调节激酶
  • 1篇动物

机构

  • 8篇蚌埠医学院
  • 7篇蚌埠医学院第...

作者

  • 8篇李红俊
  • 5篇李正红
  • 5篇李永海
  • 5篇刘明珠
  • 4篇谈燚
  • 4篇秦中强
  • 2篇杨小淮
  • 1篇刘传苗
  • 1篇陈勇
  • 1篇高琴
  • 1篇张蔚屏
  • 1篇许文青
  • 1篇王娅

传媒

  • 1篇中国免疫学杂...
  • 1篇中华肿瘤杂志
  • 1篇蚌埠医学院学...
  • 1篇临床与实验病...
  • 1篇中华实验外科...
  • 1篇细胞与分子免...
  • 1篇中国实验血液...
  • 1篇南方医科大学...

年份

  • 3篇2019
  • 2篇2018
  • 3篇2017
共 8 条 记 录，以下是 1-8
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排序方式：
水流动力学注射方法建立肝内胆管癌动物模型被引量：2
2017年
目的 建立一种小鼠肝内胆管癌动物模型。方法 采用水流动力学注射方法将表达Notch1基因胞内区活性形式pT3-EF1a-Notch1分子的胞内结构域（NICD1）转座子和表达myr-蛋白激酶B（Akt）基因转座子质粒溶液通过小鼠尾静脉注射至肝脏。注射生理盐水作为对照。注射4周后处死，病理学检查肿瘤发生情况，免疫组织化学、免疫荧光检测细胞角蛋白19（CK19）及标签蛋白流感病毒血凝素蛋白表面抗原决定簇衍生的蛋白标签序列（HA）标记的Akt表达。结果 实验组小鼠均形成肿瘤，成癌率为100%（14/14）；病理学检测为胆管细胞性肝癌，免疫组织化学检测CK19，14例中有9例强阳性表达（64.3%），证实瘤细胞是胆管细胞性肝癌。同样，在瘤细胞中检测到HA强阳性表达率为42.9%（6/14）；免疫荧光双标记CK19和HA升高。 结论 水流动力学注射方法成功构建肝内胆管癌小鼠模型且诱癌时间短，方法简单，重复性好。
朱方全秦中强李红俊陈勇李永海谈燚
关键词：肝内胆管癌转座子
内吗啡肽-1后处理的心肌保护作用及其对Erk1/2信号通路的影响被引量：10
2017年
目的探讨在大鼠心肌缺血再灌注过程中,内吗啡肽-1后处理的心肌保护作用对细胞外信号调节激酶1/2(Erk1/2)信号转导通路的影响。方法构建在体大鼠心肌缺血再灌注模型,分假手术组、缺血再灌注组、内吗啡肽-1后处理组(EM50组)、PD98059后处理组(PD组)、内吗啡肽-1+PD98059后处理组(EM50+PD组)。实时记录各组大鼠血流动力学指标,采集复灌结束后大鼠血清,检测超氧化物歧化酶、丙二醛、白介素-6、肿瘤坏死因子-α乳酸脱氢酶、肌酸激酶、心肌肌钙蛋白等心肌酶学及生化指标,大鼠心肌组织HE病理染色,TTC双染色法测定心肌梗死面积,Western-blot检测各组心肌组织中P-Erk1/2及凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3的变化。结果与假手术组比较,缺血再灌注组心率和血压降低(P<0.05);与缺血再灌注组比较,EM50组心率和血压有所增高(P<0.05),血浆中乳酸脱氢酶、肌酸激酶、心肌肌钙蛋白、丙二醛、白介素-6、肿瘤坏死因子-α活性或含量下降;超氧化物歧化酶活性增加(P<0.05);心肌梗死面积减少(P<0.05);P-Erk1/2表达增加(P<0.05);Cleaved Caspase-3表达降低(P<0.05)。与EM50组比较,EM50+PD组心率和血压降低(P<0.05),血浆中乳酸脱氢酶、肌酸激酶、心肌肌钙蛋白、丙二醛、白介素-6、肿瘤坏死因子-α活性或含量增加,超氧化物歧化酶活性降低(P<0.05);心肌梗死面积增加(P<0.05);P-Erk1/2表达降低(P<0.05);Cleaved Caspase-3表达增加。结论内吗啡肽-1后处理可能通过改善心功能、抑制炎症反应、抑制氧化应激发挥保护作用;内吗啡肽-1改善大鼠心肌缺血再灌注损伤的过程中,存在Erk1/2信号通路的激活。
王娅刘明珠李红俊张蔚屏高琴李正红
关键词：细胞外信号调节激酶1/2心肌缺血后处理心肌保护内吗啡肽
快速大容量尾静脉注射法建立肝细胞癌小鼠模型
2018年
目的:通过快速大容量尾静脉注射法建立肝细胞癌小鼠模型。方法:采用快速大容量尾静脉注射法,将插入NRAS基因的NRASV12转座子质粒、表达myr-Akt基因转座子质粒以及转座酶SB100的混合盐溶液通过小鼠尾静脉大容量(2 m L)、短时间(7 s)进行注射,作为观察组;同时设置对照组,同样方法注射等量0. 9%氯化钠注射液。注射3～4周后,处死观察组及对照组小鼠,通过病理学检查小鼠成瘤情况。结果:观察组小鼠成瘤率100%(24/24),经病理学检测为肝细胞癌;对照组小鼠无成瘤。结论:快速大容量尾静脉注射方法构建肝细胞癌小鼠模型方法简单,诱癌时间短,成功率高,重复性好。
秦中强周万飞李红俊刘明珠谈燚
关键词：肝细胞癌小鼠模型
双荧光标记的肺癌皮下移植裸鼠模型的建立被引量：2
2019年
目的 建立荧光素酶(Luc)和近红外荧光蛋白(iRFP)双标记的肺癌皮下移植裸鼠模型.方法 采用Gateway法构建表达Luc和iRFP的慢病毒载体,经酶切测序验证后,制备慢病毒,感染肺癌A549细胞.嘌呤霉素筛选阳性A549细胞(即mA549细胞)并进行扩增,荧光显微镜下观察Luc和iRFP的表达,免疫荧光检测细胞表面c-Met蛋白的表达.将A549和mA549细胞分别接种至裸鼠皮下,每组6只,采用活体成像技术观察瘤体生长和荧光表达情况,HE染色和免疫组化染色评估成瘤状况.结果 成功构建了稳定表达Luc和iRFP的mA549细胞系.荧光显微镜下观察到mA549细胞中iRFP与Luc成功表达.免疫荧光检测显示,A549细胞和mA549细胞均可表达c-Met蛋白.mA549细胞接种裸鼠后,模型生长周期适中,成瘤率为100%;mA549细胞移植瘤的生长趋势与A549细胞移植瘤无明显差异(P>0.05).HE染色显示,mA549与A549细胞移植瘤的细胞形态和组织结构相同.免疫组化染色显示,A549和mA549细胞移植瘤均表达c-Met蛋白.结论 成功构建了稳定的、可实时监测的iRFP-Luc-A549肺癌细胞裸鼠模型.
樊红莲刘明珠闵静婷李红俊杨小淮李永海李正红
关键词：肺肿瘤荧光素酶活体成像
建立稳定高效表达绿色荧光蛋白和小鼠白血病抑制因子的STO细胞系被引量：1
2019年
目的:建立表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)和小鼠白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的细胞系,并尝试使用其作为饲养层培养小鼠胚胎干细胞(ESC)。方法:构建含有GFP、mLIF和嘌呤霉素抗性基因的慢病毒粒子,并感染STO小鼠成纤维细胞系,筛选得到稳定表达GFP和mLIF基因的细胞系(STO-GFP-mLIF);通过Western blot和ELISA方法检测STO-GFP-mLIF细胞中LIF基因的表达水平;经不同浓度(5,10,15,20μg/ml)丝裂霉素C处理不同时间(1.5,2.5,3,3.5 h)制备饲养层,并观察细胞在饲养层上增殖情况。将小鼠胚胎干细胞在丝裂霉素C处理过的STO-GFP-mLIF上培养,观察细胞集落生长情况。结果:STO-GFP-mLIF细胞中LIF蛋白表达水平上调(P <0.01);丝裂霉素C抑制STO-GFP-mLIF细胞增殖的最佳浓度及作用时间为10μg/ml与3 h,且小鼠胚胎干细胞可在该饲养层上发育成典型的"鸟巢"状干细胞集落。结论:成功获得了稳定表达绿色荧光蛋白和小鼠LIF基因,同时可维持小鼠胚胎干细胞未分化状态的STO-GFP-mLIF细胞系。
刘传苗李红俊杨天华杨小淮李正红李永海
关键词：白血病抑制因子绿色荧光蛋白小鼠ES细胞
整合PD-L1单链抗体的融合蛋白制备及其抗肿瘤活性的验证被引量：1
2019年
目的:利用酵母表面递呈技术,分泌表达抗PD-L1单链抗体(sc Fv),纯化后得到能特异性结合PD-L1抗原的小分子抗体片段(sc Fv)。根据单链抗体基因序列,合成sc Fv抗体基因序列。选用sc Fv-mFc融合蛋白的方式,并采用p Fuse真核表达载体来表达此sc Fv-mFc融合蛋白,研究其对肺腺癌细胞(A549)的亲和力和体内外抑制作用。方法:采用基因工程的方法构建重组质粒p Fuse-scFv,通过真核转染至293F(人胚肾细胞),使用无血清Pro 293a-CDM培养72 h,收集培养液中分泌的融合蛋白,运用免疫组化检测sc Fv-mFc融合蛋白与肿瘤细胞的结合;流式细胞术分析融合蛋白和肿瘤细胞的亲和力; ADCC(抗体介导的细胞毒实验)测定融合蛋白对肿瘤细胞体外杀伤作用;利用接种肺腺癌细胞的荷瘤小鼠对融合蛋白的体内抗肿瘤效应进行研究。结果:通过重组质粒转染至293F细胞的方法,sc Fv-mFc融合蛋白被分泌到无血清的培养液中;免疫组化和流式结果显示,融合蛋白与表面高表达PD-L1蛋白的肿瘤细胞有较强的结合能力; ADCC实验结果示融合蛋白在体外对肿瘤细胞的杀伤作用;荷瘤小鼠实验结果示融合蛋白对肿瘤的生长起到抑制作用,在5 mg/kg的药物剂量下,荷瘤小鼠瘤体体积平均增长率从14. 90%降低至3. 72%,两独立样本t检验P<0. 05,差异具有统计学意义。结论:成功制备了含单链抗体的融合蛋白,其对A549细胞具有良好的结合能力,在体内外均对肿瘤细胞的增殖产生抑制作用,为研制靶向抗肿瘤药物提供实验室基础依据。
谈燚秦中强周万飞李红俊刘明珠许文青李正红李永海
关键词：重组质粒PD-L1单链抗体融合蛋白免疫抑制
近红外荧光蛋白和荧光素酶双标记肝细胞癌移植裸鼠模型的建立被引量：1
2017年
目的建立一种基因稳定表达,可实时监测肿瘤生长的肝癌移植瘤裸鼠模型。方法构建带有荧光素酶(Luc)和近红外荧光蛋白(iRFP)和嘌呤霉素抗性基因的慢病毒,并感染HepG2肝癌细胞系,筛选得到稳定表达Luc和iRFP基因的细胞系;将细胞接种到裸鼠皮下,建立肝癌HepG2细胞移植瘤模型。利用小鼠活体成像系统检测肿瘤的生长情况,并通过HE染色及免疫组织化学染色评估肿瘤组织病理特征及成瘤能力。结果成功构建稳定表达iRFP和Luc的HepG2肝癌细胞系并建立移植瘤动物模型;模型生长周期适中,成瘤率较高;HE染色及免疫组织化学染色表现出典型的肿瘤组织病理特征。结论成功建立了稳定、可实时监测的HepG2-iRFP-Luc肝癌细胞裸鼠模型。
李红俊杨天华黄艳平刘明珠秦中强储菲李正红李永海
关键词：荧光活体成像
胰腺实性假乳头状肿瘤3例并文献复习被引量：2
2018年
目的探讨胰腺实性假乳头状肿瘤(solid pseudopapillary tumor of the pancreas,SPTP)复发和转移病例的临床病理特征、诊断、鉴别诊断、治疗及预后。方法采用HE染色和免疫组化EnV ision法分析3例SPTP的病理学及免疫表型特征,并复习相关文献。结果镜下可见肿瘤细胞围绕小血管形成特征性的假乳头状结构,可见少量出血及坏死、黏液样变性及胆固醇沉积等现象;细胞分化较好,异型性不明显,未查见细胞核分裂象。免疫表型:β-catenin、vimentin、CK、CK8、PR、CD56等均呈阳性,Syn、CEA、CgA等呈弱阳性;ER呈阴性,Ki-67增殖指数<5%。结论 SPTP是胰腺外分泌肿瘤的特殊类型,临床较少见,恶性程度低,预后良好,诊断主要依赖其组织病理学特征及免疫表型。
秦中强慈红非周万飞李红俊谈燚
关键词：胰腺肿瘤病理学免疫组织化学
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