谢荣辉 作品数:38 被引量:75 H指数:5 供职机构: 浙江省动物疫病预防控制中心 更多>> 发文基金: 浙江省公益性技术应用研究计划项目 浙江省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
屠宰场消毒效果评价方法探索 被引量:4 2023年 液体消毒剂消毒效果的生物学检测及评价通常需加入已知量的生物指示剂如细菌、真菌和病毒抗原等,并通过测定消毒剂在使用浓度下作用一定时间后的杀灭率来判定其消毒效果。这种方法须在严格的实验室环境控制条件下进行才能获得较理想的结果。而在屠宰场这种开放的环境下,对其进行现场消毒效果测定和评价方法尚未见报导。本文试图通过对屠宰场日常消毒工作中,对特定位点消毒前与消毒后细菌总数的测定,直观分析其消毒效果,在屠宰场消毒效果评价方法学上是一次新的尝试。 倪柏锋 虞一聪 谢荣辉 王雅婷 赵灵燕 徐辉关键词:病毒抗原 日常消毒 杀灭率 生物指示剂 屠宰场 猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒双重荧光定量PCR方法的建立和应用 被引量:5 2023年 根据猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒保守基因序列设计引物和探针,通过优化反应体系,建立了猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒双重荧光定量PCR检测方法,评估了该方法的特异性、敏感性及重复性。结果显示,该方法能特异性扩增猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒核酸,与猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、日本脑炎病毒、猪圆环病毒1型、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪博卡病毒无交叉反应。猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒的最低检测限均为10 copies/μL;批内和批间重复性试验的变异系数均小于3%。用建立的双重荧光定量PCR方法对87份猪组织样品进行检测,结果显示,猪伪狂犬病病毒和猪圆环病毒3型的阳性率分别为17.24%和24.14%。上述结果表明,本研究建立的双重荧光定量PCR方法具有特异、敏感、稳定和快速的优点,可用于猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒鉴别诊断和流行病学调查。 赵灵燕 张璐 安慧婷 王雅婷 黄靖 张红丽 董建斐 刘霞 孙仁杰 徐辉 谢荣辉关键词:猪伪狂犬病病毒 猪圆环病毒2,3,4型三重荧光定量PCR检测方法的建立和应用 被引量:6 2022年 为建立同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、3型(PCV3)和4型(PCV4)的方法,根据GenBank中的PCV2、PCV3和PCV4基因保守序列设计引物和探针,通过反应体系优化后,建立同时检测PCV2、PCV3和PCV4的三重荧光定量PCR方法,并对其特异性、敏感性、稳定性、与普通PCR方法的一致性进行评价。结果显示,建立的方法可特异性检测PCV2、PCV3和PCV4,与猪细小病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒1型、猪伪狂犬病病毒、口蹄疫病毒、猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒无交叉反应产生。批间与批内重复性试验变异系数系数均小于3%。对83份猪组织样品进行检测,其中PCV2、PCV3和PCV4阳性率分别为68.67%,28.92%,20.48%。结果表明建立的三重荧光定量PCR方法具有敏感度高、特异性强和稳定性好的优点,可用于PCV2,PCV3,PCV4型的流行病学调查和鉴别诊断。 谢荣辉 王雅婷 安慧婷 黄靖 张红丽 刘霞 冯肖肖 陈伟良 董建斐 张璐 徐辉 赵灵燕关键词:猪圆环病毒2型 非洲猪瘟病毒基因Ⅰ型和Ⅱ型PCR-RFLP鉴别方法的建立 2025年 本研究旨在建立一种非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)基因Ⅰ型和Ⅱ型的PCR-RFLP鉴别方法。通过对ASFV基因Ⅰ型与基因Ⅱ型基因组序列的比对分析,针对B385R基因和B125R基因保守区设计1对特异性PCR-RFLP引物,与其他临床上常见的9种猪病病毒均无交叉反应。通过该引物扩增获得覆盖B646L基因全长的DNA片段作为检测靶标,结合BmgBⅠ酶切进行RFLP图谱分析,即可实现对B646L基因全序列的快速检测,有效区分ASFV基因Ⅰ型和Ⅱ型,最低检测DNA质量浓度可达到5 pg·mL^(-1)。模拟临床样本的研究结果表明,本方法还能够有效应对实际检测中基因Ⅰ型和Ⅱ型的混合感染。综上,本方法操作简便、准确性高、特异性强、灵敏度高、成本较低,具有良好的应用前景,为基层兽医技术人员开展非洲猪瘟疫情的监测和流行病学研究提供了一种新方法。 孙仁杰 徐慧玲 孙思琪 柴娟 虞一聪 谢荣辉 李肖梁 赵灵燕 张传亮关键词:非洲猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征疫苗研究进展 2025年 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是一种严重危害养猪业的传染病。该病的病原体为猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV),主要感染猪肺泡巨噬细胞并破坏免疫系统。由于缺乏针对PRRSV的特定抗病毒药物,疫苗接种在该病的防控中至关重要。目前,PRRS疫苗种类繁多,包括减毒活疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗和载体疫苗等,但只有减毒活疫苗和灭活疫苗被广泛应用于PRRS的防控。活疫苗提供了较好的保护效果,但交叉保护能力较弱,且存在安全隐患。灭活疫苗虽然安全性较高,但免疫效力相对较差。本文对减毒活疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗、载体疫苗、DNA疫苗、mRNA疫苗和病毒样颗粒疫苗等PRRS疫苗的优缺点及适用性进行了全面综述,旨在为下一代PRRS疫苗的研发提供理论依据。 黄晓兵 刘爱军 谢荣辉 张传亮关键词:猪繁殖与呼吸综合征 PRRSV 疫苗 基于液相芯片技术的7种猪繁殖障碍疾病相关病毒检测用引物探针、试剂盒及其应用 本发明提供了基于液相芯片技术的7种猪繁殖障碍疾病相关病毒检测用引物探针组、试剂盒及其应用,属于病毒检测技术领域。本发明提供的引物探针组,包括猪瘟病毒检测引物探针、美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒检测引物探针、猪圆环病毒2型检... 谢荣辉 赵灵燕 徐辉 王雅婷 黄靖 孙冰冰 张红丽 董建斐 刘霞 冯肖肖 张璐 安慧婷 薛银 柴娟 虞一聪文献传递 运猪车辆消毒效果的检测分析 2022年 随机抽取浙江省2家洗消中心,每家洗消中心随机抽检5辆运猪车辆,每个车辆采集检测车轮、挡泥板、车厢内壁、车厢外壁、驾驶室等7个部位,车辆表面消毒前后,用拭子样本测定其细菌总数,测算细菌杀灭率和消毒有效率。结果表明:洗消中心A消毒有效率为23.08%,洗消中心B消毒有效率为65.38%。 章杭建 倪柏锋 虞一聪 谢荣辉 赵灵燕 徐辉关键词:车辆 消毒 猪圆环病毒3型与宿主相互作用机制研究进展 被引量:2 2023年 猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3,PCV3)从2015年发现至今已在全世界多个国家和地区的养猪业被检出,是重要的新发猪病病原体。目前有关PCV3致病机制的研究有限,大部分集中于PCV3的流行病学调查、基因组演化分析和检测方法建立。猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)与宿主之间关系紧密且复杂,二者的相互作用决定宿主细胞的命运和病毒的传播与存活。部分学者通过瞬转表达系统、临床分离和反向遗传学技术从病毒组分或全病毒水平对PCV3与宿主相互作用展开研究。本文系统阐述宿主细胞对PCV3感染的应答机制、PCV3-宿主蛋白的相互作用,以及PCV3生命周期的研究结果,将有助于进一步了解PCV3及其致病机制。 孙仁杰 单颖 单颖 王雅婷 谢荣辉 谢荣辉 张传亮 赵灵燕 李肖梁一种动物疫病监测数字化系统 本发明请求保护一种动物疫病监测数字化系统,其包括有依次连接的任务模块、样品采集模块、样品检测模块、结果上报模块和数据应用模块;任务模块用于建立疫病监测任务;样品采集模块通过样品标记将样品和疫病监测任务建立联系;样品检测模... 赵灵燕 黄晓兵 刘爱军 谢荣辉 张红丽 陈凯 柴娟 冯肖肖 孙仁杰 张传亮 樊莉 姚红红 杨聪霞浙江省猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的遗传变异分析 被引量:5 2019年 为了解2014-2016年浙江地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)ORF 5基因变异情况,试验通过RT-PCR方法对从浙江省各地区采集的PRRSV阳性病料进行ORF 5基因扩增,应用DNAStar和Mega 5.1软件对所测序列进行同源性和遗传变异分析。结果显示,54株2014-2016年浙江分离株ORF5序列之间核苷酸和氨基酸序列同源性分别为83.1%~100%和80.6%~100%,与经典株VR2332核苷酸和氨基酸序列同源性分别为83.8%~90.4%和81.6%~90.0%,与高致病PRRSV毒株JXA1核苷酸和氨基酸序列同源性分别为83.5%~99.5%和83.1%~99.0%。系统进化分析表明,54个毒株均为美洲型毒株,属于Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ3个不同的基因亚型,其中基因亚型Ⅲ和Ⅳ毒株是浙江省近年来新出现的毒株。氨基酸序列分析结果显示,54个毒株在GP5蛋白的信号肽区域、非中和抗体表位的氨基酸序列变异较大,而在中和表位氨基酸序列变异较小。本研究结果表明,浙江地区PRRSV流行出现了新形势,多种基因亚型共同存在,其中以基因亚型Ⅰ毒株为主。 王雅婷 柴娟 张红丽 刘霞 虞一聪 倪柏锋 赵灵燕 徐辉 谢荣辉关键词:ORF