陈秋生
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 供职机构：南昌大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金江西省研究生创新基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- CRISPR-Cas9多靶点载体构建及高效定向编辑水稻苯达松抗性基因CYP81A被引量：4
- 2017年
- 水稻CYP81A6基因(Bel)编码的细胞色素P450单加氧酶对苯达松和磺酰脲类除草剂具有抗性,该基因的隐性纯合突变体(bel)表现为苯达松敏感致死性,可作为植物化学致死标记,在水稻杂交制种中具有重要的应用价值。本研究在CYP81A6基因的首个外显子中设计两个靶位点,构建了含多靶点的CRISPR-Cas9载体,通过根癌农杆菌介导法转化粳稻中花11,获得了56株转基因T0代阳性植株,提取其中9株基因组DNA进行靶位点测序检测,发现基因敲除突变率为77.8%,其中纯合突变率高达71.4%,对纯合突变体水稻喷施苯达松,均表现出对苯达松敏感致死。为应用CRISPR-Cas9技术培育苯达松敏感致死水稻不育系和对其他水稻基因进行编辑提供理论依据。
- 聂旺彭威余雅心张焕陈秋生刘长爱廖鹏飞
- 关键词：苯达松
- 豆科凝集素基因Le4的克隆及其表达产物对蚜虫的抗性被引量：8
- 2016年
- 植物凝集素是含有一个或者多个非催化结构,并能可逆结合特异单糖或寡糖的蛋白,它具有凝集细胞、沉淀多糖和糖蛋白的功能。近年来,植物凝集素因其独特的生理功能,在农作物抗虫工程中获得了广泛的关注。本研究采用RT-PCR的方法,从浙江苞萝黄大豆叶片中成功克隆了一个新的豆科凝集素Le4基因,利用p ET-28a质粒构建了Le4基因的原核表达载体,成功表达了Le4蛋白。通过对诱导温度及异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)终浓度等条件进行优化,利用Western blotting技术,在Le4表达菌株超声破碎后的上清液中检测到了可溶性的Le4蛋白。通过涂抹法将含有可溶性Le4表达蛋白的大肠杆菌菌液涂抹在小麦叶片上,与涂抹空载体菌液相比,小麦叶片麦长管蚜数目减少了约50%。以上结果初步表明来源于大豆的凝集素基因Le4蛋白具有杀虫效应。
- 周英谢红卫刘长爱况琼潘境涛陈秋生徐伟标余潮彭晓珏
- 关键词：植物凝集素原核表达抗虫
- 基于CRISPR/Cas9技术创建OssHSP家族基因突变体
- 2019年
- 分子伴侣是在生物大分子的折叠、组装、转运及降解等过程中起协助作用,但自身并不发生任何变化的一大类广泛存在于生物体内的蛋白质分子。小热激蛋白(small heat shock protein,sHSP)是一类在抵抗逆境胁迫过程中扮演重要角色的蛋白质分子。本研究在OssHSP基因外显子区域设计了带有PAM序列的靶位点,利用PCR扩增获得OssHSP基因sgRNA表达盒,成功构建了CRISPR/Cas9敲除载体;利用根癌农杆菌介导的遗传转化获得2个OssHSP基因(Os01g0136100和Os02g0782500)的T0代CRISPR转基因植株;通过PCR扩增和测序确定突变类型,获得48株不同突变类型的OssHSP1突变单株,6株不同突变类型的OssHSP2突变单株,6株不同突变类型的OssHSP1和OssHSP2双突变单株,为进一步开展OssHSP基因功能的研究提供了材料。
- 陈亚新陈秋生陈洁张月婷杨璐帅艳玲彭晓珏
- 关键词：分子伴侣
