- 人源溶菌酶基因LYC4在毕赤酵母中的重组表达及活性测定
- 人溶菌酶是一类杀菌机制完全不同于抗生素的溶菌蛋白,其抗菌机制是水解肽聚糖中N-乙酰胞壁酸和N-乙酰葡萄糖胺中的p-1,4糖苷键,在渗透压作用下导致细菌细胞壁破裂而发生溶菌作用。本实验室以LYZ基因作为信息探针,克隆了一个...
- 李新新
- 关键词：毕赤酵母
- 文献传递
- 人源溶菌酶基因LYZL4在毕赤酵母中的重组表达及活性测定被引量：9
- 2014年
- LYZL4是本实验室克隆的一种c型人溶菌酶基因,根据毕赤酵母密码子偏爱性对LYZL4基因进行优化设计,优化后的基因克隆至具有乙醇氧化酶启动子(AOX1)的pPIC9K载体中。通过电转化方法整合到甲醇营养型毕赤酵母表达菌株GS115基因组上,再利用不同浓度梯度的G418抗性YPD固体培养基筛选高拷贝转化子,经摇瓶发酵后,其上清液在SDS-PAGE胶上14.4 kDa处出现明显的蛋白条带,该蛋白条带经质谱鉴定证实是人LYZL4蛋白。以人溶菌酶(164 071U/mg)作为标准品,使用艳红微球菌作为底物,通过比色法测定重组LYZL4溶菌酶蛋白的活性,结果显示重组人溶菌酶LYZL4蛋白具有明显的溶菌活性,其酶活力可达38893U/ml。
- 李新新陶建军余龙
- 关键词：毕赤酵母
