周巧
- 作品数：7 被引量：32H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 西达本胺联合吗替麦考酚酯抑制继发性急性髓系白血病细胞增殖被引量：2
- 2022年
- 目的探讨西达本胺(chidamide,CDM)和吗替麦考酚酯(mycophenolate mofetil,MMF)联合应用对继发性急性髓系白血病细胞增殖的影响。方法慢性髓系白血病急变期细胞株K562及MDS转白细胞株SKM-1,分别按照不同浓度的CDM单药组(0.25、0.5、1、2、4μmol/L),MMF单药组(0.5、1、2、4、8μmol/L)及联合用药组(CDM∶MMF=1∶2)干预24、48、72 h后,CCK-8实验检测细胞增殖抑制率。基于最佳联合干预浓度干预72 h后,流式细胞学检测细胞周期及凋亡率的变化,并通过网络药理学探讨其作用机制。结果CCK-8结果显示,联合组(1μmol/L CDM+2μmol/L MMF)在K562和SKM-1细胞中的联合指数分别为0.38944和0.63098。与CDM及MMF单药组比较,联合用药能显著提高对K562和SKM-1细胞增殖抑制率(P<0.01),并促进K562细胞凋亡率增高(P<0.05)。相较单药MMF组,联合组显著诱导K562、SKM-1细胞G_(0)/G_(1)期阻滞,但较CDM单药无统计学差异。其后网络药理学构建出66个节点、222条边的药物-疾病靶点PPI网络,并根据拓扑学筛选出CDK1、CDK2、CDK4、CDK6、CDK9、SYK、BTK、KDR、PIK3CB等9个核心靶点,富集分析主要涉及蛋白质磷酸化、细胞增殖、凋亡调控等多种生物进程,及PI3K-AKT、FOXO等信号通路。结论CDM联合MMF可显著抑制继发性急性髓系白血病细胞生长。
- 蔡铎梁思敏周巧王利
- 关键词：西达本胺麦考酚酸
- 川芎嗪对脂多糖诱导肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白1、5表达影响的研究被引量：10
- 2017年
- 目的:初步探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白(aquaporins,AQPs)1、5表达的调节作用。方法:健康雄性SPF级SD大鼠32只随机分为正常对照组(C组)、TMP处理组(T组)、LPS刺激组(L组)、TMP治疗组(LT组),每组8只。L组采用尾静脉注射6 mg/kg LPS,T组给予TMP 100 mg/kg腹腔注射,LT组大鼠注射LPS 1 h后立即给予TMP 100 mg/kg腹腔注射。8 h后麻醉处死大鼠留取肺组织标本。测定肺组织湿/干重比(wet/dry ratio,W/D),苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理形态,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)检测肺组织匀浆AQP1和AQP5的m RNA水平,免疫组化染色、Western blot检测肺组织AQP1、AQP5蛋白表达。结果:肺组织切片HE染色光镜下可见C组、T组肺组织结构完整、清晰;L组肺泡结构紊乱,弥漫性肺泡间隔增厚,肺泡腔内有炎性细胞浸润、出血和水肿,而LT组上述病理表现较L组减轻。L组平均肺组织湿/干重比值(5.577±0.243)明显高于其余3组(P<0.01);与C、T 2组(3.430±0.251、3.251±0.142)相比,LT组湿/干重比值(4.384±0.236)增加,差异存在统计学意义(P<0.01)。q RT-PCR结果显示T组AQP1、AQP5的RNA水平(1.462±0.080、1.267±0.063)高于C组(1.160±0.229、0.940±0.087),同时,L组两者转录水平下调(0.607±0.203、0.139±0.046),而LT组m RNA水平(0.848±0.071、0.314±0.134)高于L组(P<0.05),免疫组化(C组:2.096±0.114、2.285±0.266;T组:3.253±0.149、3.790±0.308;L组:1.133±0.202、1.068±0.221;LT组:1.562±0.085、1.647±0.239)、Western blot结果(C组:1.443±0.103、1.278±0.061;T组:1.667±0.087、1.644±0.102;L组:0.974±0.090、0.529±0.100;LT组:1.179±0.051、0.805±0.082)与q RT-PCR一致(P<0.05)。结论:川芎嗪可有效减轻脂多糖诱导急性呼吸窘迫综合征的肺水肿,起到积极的保护作用,其机制可能与上调AQP1、AQP5的表达有关。
- 陈懿毛蕊肖玲刘畅刘欣田时静王熙宇周巧胡小勇周发春
- 关键词：川芎嗪水通道蛋白
- 维罗非尼联合西达苯胺促进继发性急性髓系白血病细胞衰老被引量：1
- 2023年
- 目的探索维罗非尼(vemurafenib,VEM)联合西达苯胺(chidamide,CDM)方案对继发性急性髓系白血病(secondary acute myeloid leukemia,sAML)细胞衰老的影响。方法以sAML细胞系为研究对象(n=3),实验分为对照组、VEM单药组、CDM单药组、VEM+CDM组。CCK-8实验检测sAML细胞增殖抑制率;免疫荧光技术检测sAML细胞衰老发生;流式细胞术检测sAML细胞周期分布及凋亡发生;Swiss Target Predict、TargetNe、SEA及PharmMapper等4个网络药理学数据库预测VEM联合CDM的可能靶点和信号通路;RT-qPCR实验分析及验证VEM联合CDM的可能机制。结果VEM以时间剂量依赖性抑制sAML细胞增殖,VEM的半数抑制浓度(IC_(50))在SKM-1和MOLM-13细胞中分别为(24.15±1.18)μmol/L(P<0.0001)和(11.30±0.38)μmol/L(P<0.0001),VEM(SKM-1:1/3 IC_(50)-VEM,MOLM-13:1/2 IC_(50)-VEM)联合CDM协同抑制sAML细胞增殖(P<0.01);VEM联合CDM促进sAML细胞衰老相关标志物TRF2和Lamin B1表达;VEM联合CDM可使sAML细胞周期停滞于G_0/G_1期(P<0.05),并促进sAML细胞凋亡发生(P<0.05)。同时,网络药理学及RT-qPCR实验分析并验证VEM协同CDM通过抑制PI3K-AKT及MAPK信号通路促进sAML肿瘤细胞衰老发生(P<0.05)。结论VEM联合CDM通过下调PI3K-AKT及MAPK信号通路促进sAML细胞衰老发生、抑制sAML细胞增殖及促进sAML细胞凋亡,提示VEM联合CDM方案可能是sAML患者新的治疗方案。
- 周巧梁思敏蔡铎向文琼王利
- 关键词：细胞衰老
- 乌司他丁下调LPS诱导的小鼠巨噬细胞MiR-21表达及初步机制研究被引量：2
- 2017年
- 目的:观察在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠巨噬细胞株RAW264.7产生炎症反应中微小RNA-21(Micro RNA-21,mi R-21)的表达情况,以及乌司他丁(Ulinastatin,UTI)在炎症反应中对mi R-21的干预作用。方法:设置正常组、模型组(LPS 500 ng/m L剌激组)、实验组(LPS 500 ng/m L+UTI 1 000 U/m L组)和阴性实验对照组(UTI 1 000 U/m L),观察RAW264.7细胞生长状态;四甲基偶氮唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测不同浓度UTI对RAW264.7细胞活性的影响;用不同浓度UTI预处理2 h后,LPS刺激小鼠RAW264.7细胞诱导炎症模型,RT-PCR检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)m RNA、白介素-6(interleukin-6,IL-6)m RNA、mi R-21的表达。结果:(1)UTI对RAW264.7细胞的毒性作用:UTI浓度小于1 000 U/m L时对RAW264.7细胞无毒性作用,比较差异无统计学意义(P=0.117)。(2)与正常组相比,在不同浓度(100,250,500 ng/m L)LPS刺激RAW264.7细胞后,TNF-αm RNA及IL-6 m RNA的分泌(1.311±0.037,1.549±0.039,1.667±0.059;1.167±0.019,1.518±0.058,1.740±0.071)与基础分泌量(1.000±0.000)相比明显升高(P=0.000),且mi R-21表达(1.082±0.114,1.671±0.087,2.789±0.107)明显升高,并随LPS浓度升高而增加(P=0.000);(3)不同浓度UTI(10,100,1 000 U/m L)能有效降低TNF-αm RNA及IL-6 m RNA(1.000±0.000,1.998±0.212,1.421±0.100,1.122±0.154,0.991±0.139;1.000±0.000,1.880±0.045,1.179±0.108,1.053±0.070,0.960±0.088)的表达,并降低mi R-21(1.000±0.000,2.789±0.107,2.675±0.135,2.258±0.170,1.369±0.279)的表达,差异有统计学意义(P1=0.000,P2=0.000,P3=0.000)。结论:LPS刺激小鼠RAW264.7细胞可促进mi R-21表达升高,其表达水平在一定程度上反映了细胞炎症反应状态;UTI可通过下调mi R-21抑制相关信号通路从而在免疫炎症反应中发挥保护作用。
- 肖玲马渝周巧周发春
- 关键词：微小RNA-21乌司他丁炎性反应
- SPARC过表达通过调控CPBP/MLKL增强SKM-1细胞对Ara-C的敏感性
- 2022年
- 目的:探讨SPARC基因过表达对AML-MDS细胞株SKM-1阿糖胞苷(Ara-C)化疗敏感性的影响及调控机制。方法:该实验分为正常SKM-1细胞(对照)、空载(LV-NC)、SPARC过表达(LV-SPARC)、SKM-1细胞+30 ng/ml Ara-C(30ng/ml Ara-C)、LV-NC+30 ng/ml Ara-C和LV-SPARC+30 ng/ml Ara-C共6组。采用CCK-8法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡,RT-qPCR检测各组细胞SPARC、CPBP和MLKL的mRNA表达水平,Western blot检测相关蛋白表达水平。结果:SPARC过表达和Ara-C共处理后,细胞活性明显降低,细胞凋亡率明显增高,BCL-2蛋白表达水平显著降低,Bax蛋白表达水平显著增高(P<0.05)。与对照组相比,LV-SPARC+30 ng/ml Ara-C组的细胞周期明显阻滞于S期,CDK2表达水平显著降低,p27^(KIP1)表达水平明显增高(P<0.05)。与LV-SPARC组和30 ng/ml Ara-C组相比,LV-SPARC+30 ng/ml Ara-C组的CPBP和MLKL(p-MLKL)的m RNA和蛋白表达水平明显增高(P<0.05)。SPARC过表达和Ara-C共处理后,p-AKT蛋白表达水平降低,p53蛋白表达水平增高(P<0.05)。结论:SPARC过表达增强了SKM-1细胞对Ara-C的敏感性,促进了细胞周期阻滞和细胞凋亡能力,其机制可能与调控CPBP/MLKL途径相关。
- 梁思敏周晓佳蔡铎周巧王利
- 关键词：阿糖胞苷敏感性
- 微RNAs调控p38MAPK信号通路与疾病关系的研究进展被引量：7
- 2018年
- 微RNAs(miRNAs)是一类由内源基因编码长度为21~25个核苷酸的非编码单链RNA分子,通过转录后水平降解或抑制靶基因的表达从而参与组织细胞的多种病理生理过程。近几年,越来越多的研究发现miRNAs在许多疾病中表达异常,参与疾病的发生、发展过程。p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)是信号转导过程中主要的信号分子,通过调控细胞内外免疫炎性反应参与疾病的发生、发展过程。目前,研究发现miRNAs通过转录后负性调节靶基因的表达,继而调控p38MAPK信号通路参与形成疾病病理机制。本文就疾病中miRNAs调控p38MAPK信号通路的研究进展作一综述。
- 周巧马渝
- 关键词：微RNASP38MAPK信号通路肿瘤糖尿病肾病动脉粥样硬化炎症性疾病
- 脓毒症患者血清miRNA-21和PCT动态表达及其临床意义被引量：11
- 2018年
- 目的:观察血清miRNA-21和炎症因子PCT在脓毒症病程中的动态表达,并探讨与脓毒症病情以及预后的关系。方法:收集脓毒症患者58例、健康对照24例,其中一般脓毒症32例,脓毒性休克26例,按28 d病死率分为生存组48例和死亡组10例。检测研究对象在入组第1、3、5天血清miRNA-21表达量以及炎症因子PCT水平,并记录患者的临床信息。结果:(1)与健康对照组比较,脓毒症患者入组第1天血清miRNA-21表达量明显升高(Z=-7.061,P=0.000),做ROC曲线分析得出血清miRNA-21诊断脓毒症的曲线下面积为0.997(95%CI=0.991~1.000,P=0.000),且以miRNA-21≥0.875为截断点,其诊断脓毒症的特异度和灵敏度分别为91.7%、100%。(2)在脓毒症5 d病程中,不同时间点的miRNA-21表达差异具有统计学意义(F=67.778,P=0.000),且不同时间点两两比较均有统计学差异(P=0.000,P=0.000,P=0.000),入组第1天血清miRNA-21表达量(1.974±0.886)ng/μL高于第3天miRNA-21表达量(1.015±0.709)ng/μL,第3天血清miRNA-21表达量高于第5天miR NA-21表达量(0.531±0.312)ng/μL。(3)在脓毒症5 d病程中,不同时间点的PCT表达差异具有统计学意义(F=34.304,P=0.000),且不同时间点两两比较均有统计学差异(P=0.000,P=0.000,P=0.000),入组第1天PCT表达量(14.164±13.939)μg/L高于第3天PCT表达量(4.224±4.039)μg/L,第3天PCT表达量高于第5天PCT表达量(1.614±3.438)μg/L。(4)脓毒性休克组入组第1天,血清miRNA-21表达量、PCT水平及APACHEⅡ评分均高于一般脓毒症组(Z=-6.510,P=0.000;Z=-4.457,P=0.000;Z=-6.517,P=0.000),且miRNA-21表达量与APACHEⅡ评分成正相关(r=0.993,P=0.000)。(5)血清miRNA-21在死亡组中高表达,且在各个观测时间点两组表达量均具有统计学差异(Z=-2.823,P=0.005;Z=-3.664,P=0.000;Z=-4.942,P=0.000)。结论:血清miRNA-21在脓毒症中表达明显升高,可能为脓毒症潜在的早期诊断标记物。血清miRNA-21在脓毒症病程中的动态表达可能与机体炎症反应紧密相关,
- 周巧马渝肖玲周发春
- 关键词：脓毒症PCT炎症反应
