张丽萌 作品数:33 被引量:17 H指数:3 供职机构: 郑州师范学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河南省自然科学基金 国家现代农业产业技术体系建设项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 交通运输工程 更多>>
一种生物实验室用离心装置 本实用新型涉及离心设备领域,尤其涉及一种生物实验室用离心装置,包括机箱、机箱上端开设有上端开口的离心室,机箱内竖向设置有延伸到离心室内的驱动轴,驱动轴上端同轴连接有转动盘,转动盘侧面均匀设置有多个横臂,横臂上端均开设有凹... 宋月 王林青 刘中原 郭晓庆 张丽萌 陈龙欣一种汞(Ⅱ)荧光探针、制备方法及其应用 本发明提供一种汞(Ⅱ)荧光探针、制备方法及其应用,该探针的分子式为:C<Sub>34</Sub>H<Sub>23</Sub>N<Sub>3</Sub>O<Sub>2</Sub>S;该探针对汞(Ⅱ)表现出很强的敏感性,具有... 李林 杨莹莹 张玮 王国霞 王林青 杨玉珍 汪琛颖 张丽萌 贺远 王建勇一种抗艰难梭菌肠毒素A的抗体 本申请属于抗体制备技术领域,具体涉及一种抗艰难梭菌肠毒素A的抗体。该抗体为结合艰难梭菌毒素A的全人源抗体,由人源轻链可变区VL和重链可变区VH构成。基于现有噬菌体抗体库技术的成熟发展,本申请筛选获得了一个对艰难梭菌毒素A... 王林青 宋月 张艺璇 李闰婷 张丽萌 陈龙欣文献传递 绵羊粒细胞集落刺激因子原核表达与提纯及用于颗粒细胞培养的效果 被引量:1 2020年 文中旨在研究粒细胞集落刺激因子(Granule cell stimulating factor,GCSF)对绵羊颗粒细胞体外培养过程中细胞增殖和凋亡的影响,明确GCSF对绵羊颗粒细胞生存的调节作用,为今后该蛋白用于羊繁育方面的研究奠定基础。原核克隆表达纯化羊GCSF蛋白,纯化的蛋白用M-NSF60细胞检测生物学活性,将纯化的GCSF添加到颗粒细胞培养基中作为试验组,以培养基中未添加GCSF的细胞为对照,利用Alarmarblue检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡的变化。结果表明,羊GCSF可以原核表达并纯化,并且具有生物学活性。在24 h和48 h时,在0.06–600 ng/mL的范围内随着加入GCSF的终浓度增加,细胞活力升高。试验组颗粒细胞体外培养24 h后,与阴性对照相比,细胞周期的分布显著改变,S期细胞比例显著减少(P<0.05),G2/M期细胞比例显著增多(P<0.05)。试验组凋亡率和对照组相比,48 h检测时凋亡率显著降低(P<0.05)。综上表明,GCSF在体外培养的绵羊颗粒细胞中,可调控绵羊颗粒细胞周期,促进细胞增殖,抑制细胞凋亡。 李闰婷 李闰婷 陈龙欣 何海迎 张丽萌 杨若晨 王泳 刘月琴 段春辉 刘月琴关键词:粒细胞集落刺激因子 颗粒细胞 细胞活力 细胞周期 猪细小病毒NS1蛋白单链抗体库的构建及筛选 2025年 【目的】筛选特异性抗猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)非结构蛋白NS1的单链抗体(scFv),为后续研究PPV奠定基础。【方法】通过原核表达系统诱导表达并纯化PPV NS1蛋白,利用重组NS1蛋白进行动物免疫,检测血清效价水平后,采集小鼠脾脏提取总RNA并逆转录成cDNA,以其为模板扩增抗体重链可变区(variable domain of heavy chains,VH)和轻链可变区(variable domain of light chains,VL)序列;通过重叠延伸PCR扩增获得scFv基因,将其与酶切的pSEXRTL2噬菌体载体连接并电转化大肠杆菌XLⅠ-Blue感受态细胞,构建鼠源性抗PPV NS1的scFv抗体文库,并测定文库质量及库容量;利用噬菌体展示技术筛选对NS1蛋白具有特异性的scFv,通过ELISA和Western blotting检测抗原与阳性噬菌体克隆的亲和力。【结果】本试验成功表达纯化获得可溶性PPV NS1重组蛋白;构建的鼠源抗NS1 scFv文库的库容量为2.7×10^(7) CFU/mL,文库阳性率为87.5%;通过4轮“吸附-洗脱-富集”噬菌体筛选,最终获得2株与PPV NS1蛋白特异性结合的亲和力较高的scFv。【结论】本研究通过原核表达纯化重组蛋白NS1,成功构建鼠源抗PPV NS1蛋白的scFv噬菌体文库,利用噬菌体展示技术筛选获得了可与NS1重组蛋白特异性结合的scFv。试验结果为进一步研发抗PPV药物及诊断试剂提供依据。 张丽萌 李闰婷 李闰婷 聂晓宁 孔莉 单靖微 许盈盈 王林青 王林青关键词:NS1蛋白 噬菌体文库 一种抗小鼠RCN3蛋白单克隆ScFv抗体及其淘选方法 本发明属于生物技术领域,涉及一种抗体及抗体的开发和生产,具体涉及一种抗小鼠RCN3蛋白单克隆ScFv抗体噬菌体文库及其淘选方法。所述单克隆ScFv抗体的碱基序列如SEQ ID NO:10所示,所述碱基序列对应的氨基酸序列... 马润林 姜远达 李闰婷 陈龙欣 张丽萌 兰燕虎 李永超文献传递 进行抗体表达和组装的重组系统及应用 本发明属于分子生物学和蛋白质技术领域,具体涉及抗体表达和组装的重组系统及应用,公开一种表达抗体重链和轻链的真核表达载体,其目的是提供一种重组真核表达载体及其构建方法,便于表达各类抗体。本发明还公开了pRTL1‑HC和pR... 李闰婷 张丽萌 陈龙欣 张捷 王峰 马润林文献传递 一种抗蝗虫微孢子虫AlocSWP2孢壁蛋白ScFv单克隆抗体及其淘选方法 本发明属于生物技术领域,涉及一种抗体及抗体药物的开发和生产,具体涉及一种抗蝗虫微孢子虫<I>Aloc</I>SWP2孢壁蛋白ScFv单克隆抗体及其淘选方法。所述ScFv单克隆抗体由轻链可变区V<Sub>L</Sub>和重... 陈龙欣 李闰婷 马润林 张丽萌 张龙 兰燕虎文献传递 西洋参中8个bHLH类转录因子的克隆及表达分析 被引量:5 2022年 从西洋参cDNA中克隆得到8个bHLH类转录因子,研究了这8个bHLH类转录因子响应茉莉酸甲酯信号的表达情况。该研究以培养3周的西洋参幼苗为材料,克隆得到了8个bHLH类转录因子。采用高效液相色谱和分光光度法测定了MeJA处理不同时间西洋参不定根中人参皂苷Rg、Re、Rb和总皂苷的含量。利用实时荧光定量PCR检测MeJA处理后8个转录因子的基因表达量。结果表明从西洋参cDNA中克隆得到的8条bHLH类转录因子序列(Pq-bHLH21~Pq-bHLH28)核酸序列长度为762~2 013 bp。8个转录因子的氨基酸序列一致性为24.90%,每个氨基酸序列都显示出了基本的bHLH保守结构域特征,属于bHLH超基因家族成员。Pq-bHLH22和Pq-bHLH24~Pq-bHLH27共5条氨基酸序列中含有bHLH-MYC N结构域,属于bHLH基因家族中的MYC类转录因子。MeJA处理48 h内,8个转录因子都存在应答响应。在MeJA处理72 h时,Pq-bHLH24的基因表达量达到了处理组最高的106.53倍。在相关性分析方面,Pq-bHLH25、Pq-bHLH27、Pq-bHLH28表现出较强的协同趋势,Pq-bHLH21可能参与调控人参皂苷Rb生物合成途径,而3个转录因子Pq-bHLH22、Pq-bHLH25、Pq-bHLH28与人参皂苷Re生物合成途径呈显著正相关。上述工作为进一步研究bHLH类转录因子对于人参皂苷生物合成调控的功能验证奠定基础。 陈景鲜 卢超 郑钧屏 杨玉珍 张丽萌 张丽萌 田云芳关键词:西洋参 BHLH 转录因子 人参皂苷 绵羊FHL2蛋白原核表达、蛋白纯化及多克隆抗体的制备 被引量:3 2021年 通过表达和纯化重组的绵羊FHL2抗原蛋白和制备其多克隆抗体,用于研究该蛋白的生物学功能及绵羊繁殖调控的作用机制。研究采用PCR技术扩增绵羊FHL2蛋白的编码序列,利用限制性内切酶双酶切后插入pET28a-sumo中,加入0.5 M IPTG诱导蛋白表达,利用Ni-NTA纯化获得48 ku的重组FHL2蛋白。以重组FHL2蛋白为抗原,混合佐剂皮下注射免疫BALB/c小鼠,获得抗FHL2的多克隆抗体,间接ELISA检测结果显示抗体效价达到16400。通过转染pEGFP-C1-FHL2质粒至HEK 293F细胞,提取细胞总蛋白,利用制备的抗FHL2多克隆抗体检测蛋白的结合力,具有良好的免疫原性,为研究FHL2蛋白的生物学功能及繁殖调控机制提供良好的基础材料。 聂晓宁 李闰婷 陈龙欣 李玉华 聂文营 张丽萌 王林青关键词:绵羊 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体