刘海亮
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
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- 天山茶藨对脂肪间充质干细胞成脂成骨分化的影响
- 2024年
- 目的探究天山茶藨(Ribes meyeri)对脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)成脂成骨分化的影响。方法对p9和p17代次的ADSCs进行成脂成骨的定向分化,通过β-半乳糖苷酶染色、荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)测定细胞中P16 INK4a、P53基因表达来检测细胞衰老情况;采用CCK-8法检测天山茶藨对ADSCs的细胞毒性,并利用细胞内活性氧类(reactive oxygen species,ROS)试剂盒检测天山茶藨对细胞内ROS含量的影响;将天山茶藨处理的衰老细胞进行成脂定向分化,年轻细胞进行成骨定向分化,并检测细胞中成脂标志基因LPL、PPARγ和成骨标志基因OCN、RUNX2、ALP的基因表达量;利用未分化、成脂成骨分化和天山茶藨处理的成脂成骨分化细胞构建加权基因共表达网络图谱(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA);对天山茶藨处理的衰老细胞成脂分化和年轻细胞成骨分化中差异表达基因进行KEGG富集。结果p17代次较之p9代次ADSCs细胞衰老程度加重,且衰老的ADSCs更易向成脂细胞分化,年轻的ADSCs则更易向成骨细胞分化;0.1 pg/μL天山茶藨促进ADSCs的细胞增殖,1 ng/mL和100 pg/mL天山茶藨降低ADSCs中ROS水平;天山茶藨抑制衰老ADSCs的成脂分化,促进年轻ADSCs的成骨分化;衰老和年轻ADSCs具有不同的基因表达模式,天山茶藨在成脂分化过程中改变衰老ADSCs的表达模式;天山茶藨对ADSCs成脂成骨分化的影响与TGF-β、精氨酸生物合成信号通路相关。结论天山茶藨促进年轻ADSCs的成骨分化,抑制衰老ADSCs的成脂细胞。
- 刘青苏婷婷高家明刘海亮
- 关键词：脂肪间充质干细胞
- 间充质干细胞深低温保藏技术体系的建立与初步分析
- 2021年
- 采用不同的冻存剂冻存脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSC),冻存复苏后检测细胞活性、细胞周期、成骨分化变化和基因表达谱变化,明确冻存剂的冻存效果。本实验采用三种冻存剂,六组实验;1号,5%DMSO+10%FBS;2号,5%DMSO;3号,5%Trehalose+10%FBS;4号,5%Trehalose;5号,5%L-carnitine+10%FBS;6号,5%L-carnitine;分别冻存ADSC,复苏后通过CCK-8,检测细胞活性;流式细胞仪检测细胞周期,以及成骨诱导分化,并对5%DMSO+10%FBS为冻存剂,冻存前后进行基因表达谱分析。细胞活性检测分析。1号与2号相比,冻存效果差异显著,3号与5号相比,冻存效果相似,总体来看,1号,2号冻存效果要比3号,5号要好。2号不如1号冻存剂效果好。使用4号和6号冻存剂,细胞冻存后基本不能存活。并且使用5%DMSO+10%FBS为冻存剂,分别对冻存前和冻存后的ADSC进行了表达谱分析,结果表明,在冻存过程中,DMSO的存在会对细胞的表达谱会产生一定的影响。
- 朱志浩高家明沈君颜祝建波刘海亮
- 关键词：脂肪间充质干细胞冻存活性检测诱导分化
- 医学遗传学实验室课全英文教学的探索和实践被引量：1
- 2016年
- 21世纪,信息技术高速发展,人类在政治、经济、文化和科技等领域的交流日益频繁。目前,同济大学医学院已经吸引了来自世界各地的学生。同济大学医学院极为重视留学生的全英文教学工作,在各类文化课和实验课上都大力推广全英文教学。医学遗传学教研组在吸取国内外同行教学经验的基础上,对留学生的医学遗传学实验课进行了大胆的尝试和探索。通过教材编纂、教学方法、重视文化差异和激发兴趣等各方面的努力,在留学生的医学遗传学实验课教学工作中取得了令人满意的结果,并积累和总结了诸多有益的经验和教训。
- 祝献民王娟韩丽云刘海亮彭鲁英陈建军
- 关键词：医学遗传学实验课全英文教学留学生教学方法
- 人不同组织间充质干细胞免疫调控能力的比较被引量：9
- 2017年
- 目的比较人5种不同组织来源间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)免疫调控能力的差异。方法炎症因子干扰素γ(interferon gamma,IFNγ)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNFα)可诱导MSCs高表达吲哚胺-2,3-双加氧酶(indole-amine-2,3-dioxygenase,IDO)和趋化因子,从而抑制抗CD3/CD28抗体激活的T细胞增殖。通过RT-PCR及Western印迹法检测抑制T细胞增殖相关基因表达。使用Cell Tracer Violet的染料对T细胞进行标记,检测其增殖能力变化。同时,使用Ed U染色检测MSCs细胞增殖。过程炎症因子刺激后的MSCs与PBMC进行共培养,检测PBMC的增殖情况,同时检测MSCs相关基因表达及其增殖情况。结果炎症因子刺激的MSCs对抗CD3/28抗体激活的单个核细胞增殖有明显抑制作用,不同组织来源MSCs对单个核细胞增殖的抑制作用无明显区别。结论与骨髓来源MSCs相比,其他组织来源MSCs对单个核细胞免疫调节作用无明显区别。
- 刘贤俊刘海亮刘海亮张春雪孙毅
- 关键词：免疫调控间充质干细胞单个核细胞趋化因子
- 生长分化因子-11活性域对老年小鼠认知水平的影响被引量：2
- 2021年
- 目的探索生长分化因子-11(growth differentiation factor-11,GDF11)活性结构域是否具有延缓衰老,提高老年小鼠认知水平的能力。方法通过质粒转染过表达GDF11的不同结构域;使用转录组测序和加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)寻找GDF11活性结构域的调控功能,以及各结构域之间的调控差异;使用流式细胞术检测细胞周期;通过尾静脉高压注射质粒的方法在老年小鼠体内过表达GDF11不同结构域;使用莫里斯水迷宫实验(Morris water maze,MWM)测试过表达GDF11不同结构域后老年小鼠的认知水平。结果WGCNA分析结果显示,GDF11-C端成熟结构域和GDF11-N端结构域共表达模式相似,都激活了氧化磷酸化和细胞周期信号通路。细胞周期实验结果显示,GDF11-C端活性结构域可以减少细胞周期中G_(1)期细胞的比例(P<0.05),增加S期细胞比例。MWM结果显示,GDF11-C端活性域组老年小鼠第1次到达平台的时间显著短于其他组(P<0.05)。结论GDF11活性域可以通过细胞周期和氧化磷酸化信号通路促进细胞的增殖,同时提高老年小鼠的空间记忆和学习能力。
- 黄策王祎龙刘海亮
- 关键词：转录组学衰老
