白晓
- 作品数:6 被引量:9H指数:2
- 供职机构:中国医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 核仁磷酸蛋白基因NPM1敲除人宫颈癌细胞株的构建及功能被引量:2
- 2019年
- 目的通过CRISPR/Cas9系统定向敲除人类宫颈癌细胞(HELA)的核仁磷酸蛋白1基因(nucleophosmin1,NPM1),探讨敲除对HELA细胞生物学行为的影响。方法利用http://crispr.mit.edusgRNA在线设计工具设计sgRNA,通过T7E1系统筛选合适的sgRNA,将设计好的质粒通过转染的方式转入HELA细胞株,通过博来霉素(zeocin)抗生素进行筛选,通过Westernblot,PCR,基因测序等手段确认敲除细胞系的建立,通过免疫荧光的方式观察敲除细胞株。结果T7E1酶切PCR退火产物之后琼脂糖凝胶结果表明,CRISPR/Cas9系统对HELA细胞基因组进行了切割,并在同源重组时发生了碱基错配;Westernblot结果说明基因敲除后NPM1蛋白表达消失;基因测序的结果表明敲除细胞系建立的成功;免疫荧光的结果表明该细胞系出现异常核仁现象。结论NPM1敲除后细胞核仁异常,可能影响细胞正常生命进程。
- 王昊然白晓闫丽任燕红孙威商维昊
- 关键词:基因敲除细胞增殖
- 凋亡、自噬与程序性细胞坏死的信号关联网络被引量:4
- 2017年
- 凋亡与程序性坏死是细胞程序性死亡的两种方式。研究表明这两种死亡方式之间可以互相抑制,而且程序性坏死可以在凋亡被抑制时作为一种备用死亡途径发挥作用。自噬是一种细胞自我保护的手段,又可以参与凋亡与坏死的进程,发挥促生存与促死亡的作用。本文介绍了一些对细胞凋亡、自噬与程序性坏死的分子机制的研究,并对它们之间的联系做出阐述。
- 白晓万多宋晓宇
- 关键词:性细胞自噬细胞程序性死亡模型鼠抑制细胞
- 应用CRISPR/Cas9技术构建内源表达双标签NPM1融合蛋白的细胞系
- 2023年
- 目的 旨在创建一个内源表达NPM-Stag-Flag融合蛋白的细胞模型,为精确分离和鉴定未知NPM1互作蛋白奠定基础。方法 结合CRISPR/Cas9基因编辑技术并利用同源重组机制在内源NPM1基因位点敲入编码Stag-Flag的序列,通过药物筛选分离和鉴定单克隆细胞。结果 成功建立了两种纯合型敲入Stag-Flag的人T淋巴瘤JurkatE6-1细胞系。在C-端插入Stag-Flag标签的NPM1表达效率明显优于N-端插入型。利用双标签的两步亲和纯化法可有效富集到NPM1蛋白复合物。结论 内源表达NPM1-Stag-Flag的JurkatE6-1细胞系是今后寻找未知NPM1互作分子和开展功能研究的有力工具。
- 任燕红闫丽白晓李俊颖丘丽华张雪孙威商维昊
- 关键词:NPM1
- 核磷蛋白NPM1在维系HJURP-CENP-A复合物稳定性中的作用
- 研究背景:核仁磷酸蛋白1(Nucleophosmin,NPM1)是多功能的细胞核仁蛋白。该蛋白主要位于核仁,并可以在核仁-核质-细胞质间快速穿梭,协助核内外物质转运。早期研究表明NPM1可以通过其核酸结合能力与核酸酶活性...
- 白晓
- 关键词:NPM1核仁蛋白基因组稳定性
- 葡萄籽原花青素对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用被引量:3
- 2016年
- 目的研究究葡萄籽原花青素对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法建立C57BL/6小鼠肝脏缺血再灌注模型。腹腔注射原花青素,给药量为每天20 mg/kg,注射3周。检测肝脏氧化应激水平以及炎性细胞因子释放水平。结果原花青素可降低缺血再灌注导致的谷丙转氨酶及谷草转氨酶活性升高,减少肿瘤坏死因子α与白介素的释放,并提高组织的总抗氧化能力,降低丙二醛水平,从而改善缺血再灌注损伤状况。结论原花青素可以减少肝脏缺血再灌注的损害,可以作为一种预处理药物应用于临床。
- 白晓罗莹董想冯艳玲张文宇万多宋晓宇
- 关键词:葡萄籽原花青素预处理肝脏缺血再灌注
- 天然免疫蛋白SAMHD1的生物学功能
- 2016年
- SAMHD1蛋白,作为宿主限制性天然免疫分子,广泛存在于真核生物和原核生物中并且高度同源。SAMHD1通过水解细胞内的脱氧核苷三磷酸(dN TPs),抑制病毒感染、复制、包装、传播等过程,在防止自身免疫反应和抗人类免疫缺陷病毒(HIV-1)感染中均发挥重要作用。近来发现SAMHD1参与调节肺癌细胞的增殖和生存,维持核苷酸池的平衡,以保证基因组稳定。SAMHD1突变是引起AGS综合征等疾病发生的关键因素,因此,对SAMHD1结构、生物学功能和调控机制等研究将有助于探索新的疾病诊疗方法。
- 罗莹白晓董想冯艳玲张文宇宋晓宇曹流
- 关键词:原核生物免疫蛋白肺癌细胞自身免疫反应结构域抗病毒活性