李华玮
- 作品数：48 被引量：101H指数：5
- 供职机构：河南牧业经济学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 一种黄芪微生态制剂及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种黄芪微生态制剂及其制备方法和应用，属于饲料添加剂和生物发酵中药技术领域。该微生态制剂，主要由黄芪、乳酸菌种子液和固体培养基发酵而成；乳酸菌种子液为屎肠球菌和植物乳杆菌按2～8：8～2的比例混合培养制得；每...
- 乔宏兴边传周王永芬史洪涛赵圣振李华玮姜亚乐张菡
- 文献传递
- 猪圆环病毒Ⅱ型河南地方株ORF3的克隆及原核表达
- 2014年
- 为获得猪圆环病毒Ⅱ型ORF3编码蛋白,研究该蛋白的特性及功能,根据GenBank数据库中PCVⅡ的基因组序列设计引物,利用PCR从病料基因组DNA中扩增PCVⅡ河南地方株ORF3,将其克隆至表达载体pET-32a中进行诱导表达,SDS-PAGE电泳检测重组蛋白表达情况,采用Ni+NTA亲和纯化表达产物,透析复性后免疫日本大白兔制备多抗血清,并采用ELISA和Western blot方法检测多抗血清的效价和特异性。结果显示,PCR扩增获得全长315bp的ORF3,重组质粒经测序和双酶切证实构建正确;SDS-PAGE结果显示,ORF3能够在大肠杆菌中表达,产物的分子量约为30ku,以包涵体形式存在;纯化的重组蛋白具有较好的抗原性,制备的多抗血清抗体效价达1∶12 800以上,抗体特异性高,能与表达的ORF3编码蛋白结合。成功克隆了PCVⅡ河南地方株ORF3并实现原核表达,获得纯化的重组ORF3编码蛋白。
- 郑鸣李华玮边传周王永芬王老七
- 关键词：ORF3原核表达
- 抑制剂CNI-1493在猪繁殖与呼吸综合征中的应用
- 本申请属于动物疾病预控技术领域，具体涉及抑制剂CNI‑1493在猪繁殖与呼吸综合征中应用专利申请事宜。作为eIF5A羟脯氨酸修饰的特异性抑制剂CNI‑1493，将其处理细胞后，用于抑制PRRSV在细胞内的增殖；所述细胞为...
- 李华玮赵绪永郭宏伟井汇源张立恒郑鸣
- 慢病毒载体介导的稳定表达eIF5A细胞系的建立及其对猪繁殖与呼吸综合征病毒增殖的影响被引量：1
- 2023年
- 本研究旨在通过慢病毒载体构建稳定表达真核翻译起始因子5A(eukaryotic translation initiation factor 5A,eIF5A)的MARC-145细胞系并验证该细胞系对PRRSV感染的影响。全基因合成eIF5A序列,双酶切后构建慢病毒表达载体pLV-CMV-MCS-EF1a-Puro。将该载体和慢病毒包装质粒psPAX2与包膜蛋白质粒pMD2.G共转染HEK293T细胞,包装得到能表达eIF5A的慢病毒。将慢病毒转导至MARC-145细胞,经过嘌呤霉素筛选、细胞有限稀释法获得能稳定表达eIF5A的MARC-145细胞系。MTS试验证实构建的细胞系细胞活力无显著变化,病毒TCID50测定、实时荧光定量PCR、蛋白质免疫印迹和间接免疫荧光技术检测eIF5A稳定表达对PRRSV滴度、PRRSV N基因及N蛋白表达的影响,发现MARC-145-eIF5A细胞系能显著促进PRRSV的增殖。本研究成功构建了稳定表达eIF5A的细胞系MARC-145-eIF5A,PRRSV感染试验证实体外稳定表达eIF5A可以促进PRRSV在MARC-145细胞的增殖。
- 李华玮王旭英乔宏兴李新锋姬向波郭科威杨中元
- 关键词：慢病毒载体MARC-145细胞
- 磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂对水疱性口炎病毒体外增殖的影响
- 2025年
- 研究磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂(PI3K-IN-1)在PK-15细胞模型上对水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)体外增殖的影响,揭示PI3K-IN-1在体外细胞中对VSV的抗病毒作用,为寻求和开发防控VSV感染的药物奠定基础。采用CCK-8法检测PI3K-IN-1在细胞水平上的安全使用浓度;采用流式细胞术检测PI3K-IN-1对细胞周期中各时期占比和凋亡率的影响;利用流式细胞术和荧光显微镜分析PI3K-IN-1处理PK-15细胞感染VSV后病毒增殖的差异;利用RT-qPCR分析VSV N基因的mRNA表达量;利用免疫印迹技术分析VSV-GFP中GFP蛋白的表达量;利用病毒滴度测定试验检测PI3K-IN-1对VSV子代病毒滴度的影响;利用共聚焦显微镜分析PI3K-IN-1对VSV-GFP中GFP蛋白荧光强度的抑制作用。结果表明,0~10μmol/L PI3K-IN-1对PK-15细胞活力、细胞周期中各时期占比和细胞凋亡率无影响,但随着PI3K-IN-1浓度的增加,VSV-GFP中GFP蛋白的表达量降低,当PI3K-IN-1的浓度为10μmol/L时,对VSV增殖的抑制效果最好;PI3K-IN-1处理组VSV N基因mRNA相对表达量显著或极显著低于DMSO(CK)组且呈时间依赖趋势;VSV-GFP感染12 h和24 h时,PI3K-IN-1处理组与CK相比,GFP阳性荧光细胞比例极显著降低;PI3K-IN-1处理组子代病毒滴度与CK相比在感染12、24 h时显著降低,在感染36 h时极显著降低。综上,PI3K-IN-1可有效抑制VSV在PK-15细胞中的增殖,为研究和开发抗VSV药物提供了新的策略与方法。
- 王梦迪樊文杰张震赵瑞红李华玮刘昆郑鸣王亚锴
- 关键词：水疱性口炎病毒抗病毒体外增殖
- DHPS抑制剂GC7在猪繁殖与呼吸综合征中的应用
- 本申请属于动物疫病防控技术领域，具体涉及一种DHPS抑制剂GC7在猪繁殖与呼吸综合征PRRS中的应用专利申请事宜。GC7作为eIF5A羟脯氨酸修饰的特异性抑制剂，用于抑制PRRSV在真核生物细胞内的增殖。所述真核生物细胞...
- 李华玮杨树宇王梦迪井汇源杜娟侯文静李京
- 抑制剂Ciclopirox在猪繁殖与呼吸综合征中的应用
- 本发明提供一种抑制剂Ciclopirox在猪繁殖与呼吸综合征中的应用，使用eIF5A羟脯氨酸修饰特异性抑制剂Ciclopirox处理细胞后，可以抑制PRRSV的增殖。以PAMs、CRL‑2843‑CD163细胞和MARC...
- 李华玮董青杜娟 井汇源马辉 赵孟孟 王旭英
- 酿酒酵母菌株的筛选与发酵特性分析被引量：23
- 2018年
- 对河南本地苹果园土壤、果实及表皮中的酿酒酵母菌株进行分离、筛选、鉴定,并进行酒精、柠檬酸、葡萄糖和SO_2的耐受性测定,最后对发酵条件进行优化,以期选育出适合果酒发酵的优良酿酒酵母菌株。结果表明,共分离得到36株酿酒酵母,对其进一步进行发酵试验获得发酵性能较优的8株酿酒酵母,对这8株酿酒酵母进行耐受性试验发现,菌株Y-2和F-3在400 g/L葡萄糖下能够快速启动发酵,同时能够耐受酒精体积分数16%、柠檬酸质量浓度20 g/L和SO_2质量浓度200 mg/L。对Y-2、F-3菌株进行理化指标和感官评定,确定其最优发酵条件为:葡萄糖质量浓度200 g/L、温度25℃、pH值4.0。菌株Y-2和F-3酿造的苹果酒具有清新的果香味和浓郁的酒味,酒精度适中,口感清爽,这2株酵母发酵性能优良可以作为酿造果酒的开发菌株。
- 张莉张兰张玉许亚杰李华玮
- 关键词：酿酒酵母耐受性发酵特性
- 转基因技术发展现状及其对社会发展的影响被引量：3
- 2014年
- 转基因技术是起始于20世纪70年代的高新技术,是按照科研或生产需要在分子水平上用人工方法提取或合成不同生物的遗传物质（DNA片段）,用酶学的方法将不同来源的DNA在体外切割、连接、组成一个杂合DNA分子的技术。或者在体外将目的基因插入病毒、质粒或其他载体分子中,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这些基因的寄主内,生产出符合人类需要的产品或创造出生物的新性状。
- 李华玮郑鸣
- 关键词：转基因动物基因插入基因表达谱转基因小鼠转基因玉米
- 鸭肝炎病毒河南株的免疫保护试验研究
- 2014年
- 为探讨河南省部分地区鸭肝炎病免疫失败的原因,对分离到的鸭肝炎野毒株(LY株)在雏鸭、鸭胚及鸡胚上进行免疫保护试验、交叉中和试验。结果表明DH-Ⅰ型血清对该LY株的免疫保护指数较低,明显低于LY株血清的保护指数,表明该疫区部分鸭肝炎野毒株的抗原性已发生改变;交叉中和试验对该结果进行了进一步的验证;另采用LY株和DHV-I病毒疫苗联合制备鸭肝炎高免蛋黄抗体用于临床免疫防治可使临床保护率达到90%以上。
- 陶海静李华玮
- 关键词：鸭肝炎免疫保护试验免疫保护率
