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新型载SDF-1α纳米微泡复合体制备的可行性研究: 目的：制备一种兼具缓释作用和超声显像功能的载SDF-1 α脂质纳米微泡复合体.方法：采用微量滴加-超声均质法制备带正电荷的油包水结构的纳米级的载SDF-1α脂质纳米粒，检测观察载SDF-1α微球的粒径大小、zeta电位、...; 计晓娟曹丽娜朱旭杨海燕何灿粲余更生; 关键词：包封率

载基质细胞衍生因子-1α脂质纳米粒-声诺维复合体的制备及特性研究: 2018年; 目的制备一种兼具缓释作用和示踪功能的载基质细胞衍生因子-1α（SDF-1α）脂质纳米粒（SNP）-声诺维复合体（SNP—Sono Vue），并观察其致骨髓间质干细胞（BMSCs）迁移作用。方法制备SNP，检测其物理特性包括粒径大小、zeta电位、形态结构、包封率。构建SNP—SonoVue，观察SNP及低频超声（LIFU）辐照后的SNP—SonoVue缓释情况以及SNP—SonoVue中SonoVue与SNP的结合情况。分别观察以下6组的致BMSCs迁移作用以评价SNP-SonoVue的生物活性：A组，SDF-1α＋1％血清培养基；B组，SNP—SonoVue＋1％血清培养基；C组，LIFU辐照后SNP—SonoVue＋1％血清培养基；D组，空白脂质纳米粒-声诺维复合体（BNP—SonoVue）＋1％血清培养基；E组，LIFU辐照后BNP—SonoVue＋1％血清培养基；F组，PBS＋1％血清培养基（对照组）。观察SNP～SonoVue的体外显像情况。结果制得的SNP平均粒径（220．4±9．9）nm，粒径的分散指数（PDI）为0．172±0．015，平均电位（35．6±1．7）mV。透射电镜下可见SNP呈均匀分散的球形。药物包封率为96．7％，载药量为481．76ng／mg。流式细胞术分析显示SNP质量（mg）与SonoVue微泡（个）的比例为20：（2．8×10^9）～40：（2．8×10^9）是SNP—SonoVue制备的适宜条件。荧光显微镜显示复合体中的SonoVue微泡外壳有大量的DiI标记的带红色荧光SNP。药物缓释实验中可见SNP及LIFU辐照后SNP—SonoVue7d内的药物释放率分别为（68．61±3．97）0A和（63．21±5．68）％，差异无统计学意义（P〉0．05）。细胞迁移实验证实A、B、C组对BMSCs的迁移作用明显强于对照组（P〈0．（15），但A、B、C三组间的差异均无统计学意义（P〉0．05）。体外显影实验可见SNP—SonoVue复合体有明显增强显影作用。结论成功制备SNP—SonoVue，该复合体具有明显的增强显影作用和致BMSCs迁移作用。; 曹丽娜计晓娟余更生朱旭曹阳杨海燕卢岷何灿粲; 关键词：超声疗法脂质纳米粒基质细胞衍生因子1Α

1种新来源的内皮祖细胞提取分离方法被引量：2: 2019年; 目的探索1种新来源内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的提取分离方法,以增加EPCs细胞数量、提高增殖活性。方法拟从胎鼠肺提取分离培养EPCs,分别从形态学、表面标志物、吞噬功能和体外管腔形成等方面验证所提取细胞为EPCs。同时将其与骨髓中提取的内皮祖细胞的细胞增殖活力进行比较。结果从胎鼠肺提取分离培养的细胞,其形态特征与EPCs一致,细胞表达CD31、CD34、CD133、VEGFR2等EPCs特异标志物,可同时吞噬Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1;体外可形成管腔样结构,功能上符合EPCs的表现。胎鼠肺提取的细胞增殖活力明显高于传统从骨髓提取的EPCs。结论胎鼠肺中可提取出数量和质量较好的EPCs,为进一步实验提供可靠的细胞来源。; 李丽玲计晓娟余更生何灿粲曹丽娜朱旭杨海燕; 关键词：胎肺内皮祖细胞

骨髓间充质干细胞移植对低龄扩张型心肌病模型鼠心功能及心室肌钠通道的影响被引量：1: 2016年; 目的观察阿霉素诱导的低龄扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)模型鼠心功能和心室肌细胞钠通道的情况,以及骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)移植后低龄DCM鼠心功能和钠通道的改变,探讨BMMSCs移植后钠通道对心功能改善的作用。方法 75只14 d龄的雌性SD鼠分为5组:正常组、正常+BMMSCs移植组(正常鼠左室前壁注射BMMSCs)、DCM组、DCM+PBS移植组(DCM鼠左室前壁注射PBS)、DCM+BMMSCs移植组(DCM鼠左室前壁注射BMMSCs),以腹腔注射阿霉素来诱导低龄DCM模型鼠;移植后4周以荧光显微镜观察心肌组织冰冻切片评价BMMSCs植入情况,通过超声心动图和全细胞膜片钳技术对各组大鼠心功能和钠通道功能的变化情况进行检测。结果荧光干细胞示踪检查显示植入的BMMSCs在注射点附近呈团分布或沿进针路径分布,生长良好;超声心动图检查显示DCM组心功能较正常组及正常+BMMSCs移植组降低(P<0.05),DCM+BMMSCs移植组心功能较DCM组及DCM+PBS移植组提高(P<0.05),DCM+BMMSCs移植组移植4周后心功能较移植前提高(P<0.05);膜片钳检查显示DCM组钠电流(sodium channel current,I_(Na))的电流密度峰值较正常组及正常+BMMSCs移植组降低,电流-电压(Ⅰ-Ⅴ)曲线上移,激活减慢,激活曲线右移,失活加快,失活曲线左移,差异具有统计学意义(P<0.05);而DCM+BMMSCs移植组的I_(Na)电流密度峰值较DCM组及DCM+PBS移植组提高,Ⅰ-Ⅴ曲线下移,激活加快,激活曲线左移,失活减慢,失活曲线右移,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 BMMSCs移植能改善低龄DCM鼠的心功能,其机制可能与BMMSCs移植后钠通道功能增强有关。; 刘奇峰计晓娟余更生陈恒胜白永虹曹丽娜; 关键词：扩张型心肌病干细胞移植钠通道

低龄扩张型心肌病鼠心室肌细胞钠电流变化的初步研究: 2016年; 目的:探究阿霉素诱导的低龄鼠扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)模型中心室肌细胞钠电流(sodium current,I_(Na))的变化。方法:将40只健康的两周龄SD大鼠随机平均分为DCM组(n=20)和对照组(n=20)。DCM组予腹腔注射阿霉素1 mg/kg每周2次,连续6周,诱导建立DCM模型,对照组给予等量生理盐水腹腔注射,以酶解法分离得到单个心室肌细胞,通过全细胞膜片钳技术记录I_(Na)、电流-电压(I-V)曲线和钠通道激活、失活和复活的变化情况。结果:与对照组比较,DCM组I_(Na)呈电压依赖性减小,I-V曲线上移,I_(Na)电流密度明显下降[(47.370±4.118)p A/p F vs.(64.310±3.278)pA/pF,P=0.003];钠通道激活过程减慢,稳态激活曲线右移,半数稳态激活电压明显升高[(-48.441±0.966)m V vs.(-55.132±0.945)m V,P=0.000];失活过程加快,稳态失活曲线左移,半数稳态失活电压降低[(-98.490±1.152)m V vs.(-90.700±1.983)m V,P=0.003];稳态复活曲线与对照组相比无统计学差异(P=0.617)。结论:阿霉素诱导的低龄DCM模型鼠心室肌细胞I_(Na)电流密度显著减少,钠通道激活过程减慢,失活过程加快,降低了I_(Na),DCM中传导阻滞的发生可能与此有关。; 刘奇峰陈恒胜余更生计小娟白永虹曹丽娜; 关键词：钠通道扩张型心肌病膜片钳

过表达趋化因子受体4的内皮祖细胞影响血管平滑肌细胞迁移、增殖被引量：4: 2017年; 目的研究过表达趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)的内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)迁移、增殖的影响。方法分离培养并鉴定大鼠骨髓来源EPCs。CXCR4的重组腺病毒感染EPCs后,流式细胞术、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测细胞膜CXCR4受体及mRNA表达,CCK-8法、Transwell法分别检测EPCs增殖活性、迁移能力。建立过表达CXCR4的EPCs与VSMCs非接触共培养模型,Transwell法、CCK-8法检测EPCs对VSMCs的迁移、细胞存活的影响。结果 CXCR4重组腺病毒感染EPCs 48 h后,EPCs细胞膜CXCR4受体和mRNA表达明显增高(P<0.01),过表达CXCR4对EPCs增殖活性无明显影响,但可增强EPCs定向迁移能力(P<0.01)。共培养模型中,SDF-1α诱导下,CXCR4组VSMCs迁移、细胞存活率明显降低(P<0.05),无SDF-1α诱导下空白对照组、GFP组及CXCR4组VSMCs的迁移、细胞存活率整体高于SDF-1α诱导下各组(P<0.05)。结论过表达CXCR4可增强EPCs的迁移能力,在SDF-1/CXCR4调控轴中加强EPCs对VSMCs迁移和增殖的抑制作用,可用于防治血管再狭窄的细胞治疗。; 何灿粲计晓娟余更生毕杨朱旭杨海燕曹丽娜; 关键词：趋化因子受体4 内皮祖细胞血管平滑肌细胞

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曹丽娜

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