张帆
- 作品数：7 被引量：8H指数：2
- 供职机构：福建中医药大学更多>>
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- 改良组织块培养法提取原代大鼠脑微血管内皮细胞及鉴定被引量：1
- 2025年
- 目的探究脑微血管组织块培养法提取原代大鼠脑微血管内皮细胞并对其进行鉴定。方法取4周龄SD大鼠脑皮层,经过筛网、预消化、微血管组织块固化处理后,置于CO_(2)培养箱中进行原代培养。通过细胞形态学观察、第Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色法鉴定所培养的目的细胞。结果体外培养48 h后短梭形细胞从脑微血管段周围爬出;72 h后岛屿状的细胞团簇形成;96 h后团簇融合,细胞呈典型的单层铺路石样镶嵌式排列生长。第Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色法检测显示,细胞胞质呈棕红色,表达为阳性,细胞核被苏木精衬染成蓝黑色。结论脑微血管组织块培养法能够成功提取原代大鼠脑微血管内皮细胞。
- 张帆李柏霖池茗刘海琴唐元瑜
- 关键词：微血管内皮细胞
- “心开窍于耳”探析被引量：3
- 2016年
- 目的:对"心开窍于耳"理论进行探讨。方法:通过探究古今文献资料,从心与耳窍的生理、病理联系以及临床应用进行分析、总结。结果:"心开窍于耳"的理论是切合临床实际的,具有很重要的临床意义。结论:发掘古籍中那些容易被我们忽视的理论并对其进行临床验证,有利于更好地指导临床实践,拓宽临床思路。
- 张帆
- 关键词：学术探讨
- 大鼠主动脉血管内皮细胞组织块天花板培养法提取及鉴定
- 2025年
- 目的运用组织块天花板培养法体外分离大鼠主动脉血管内皮细胞(aortic vascular endothelial cells,AECs),为进一步开展高血压动脉粥样硬化、肺动脉高压等血管性疾病研究提供重要的工具细胞。方法取60 g SD大鼠1只,无菌分离出胸、腹主动脉,剔除血管外筋膜、脂肪组织后,将内膜外翻,予0.1%Ⅱ型胶原酶预消化15 min后,将其剪碎成米粒状大小,采用“组织块天花板法”进行原代培养。通过细胞形态学观察、免疫细胞化学染色法检测第Ⅷ因子相关抗原及血管形成实验鉴定所培养的目的细胞。结果培养2 d后,少量短梭形细胞从血管组织块边缘爬出;4 d后“岛屿状”的细胞集落形成;6~8 d后集落融合成片,呈典型的单层、“鹅卵石样”、镶嵌式排列;第Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色显示胞质淡染成棕红色,阳性细胞率达99%以上;血管形成实验为阳性。结论“组织块天花板培养法”能够简单、高效地提取原代大鼠AECs。
- 张帆李柏霖池茗刘海琴唐元瑜
- 兔脊髓微血管内皮细胞的体外培养及鉴定
- 2025年
- 目的:建立一种高效的兔原代脊髓微血管内皮细胞(spinal cord microvascular endothelial cells,SCMECs)的体外分离培养方法。方法:选取2周龄日本大耳白兔15只,雌雄不限。在无菌条件下剪开背部皮肤肌肉层,充分暴露脊柱,沿其纵轴方向剪开椎管,获得脊髓组织。剪碎脊髓,用牛血清白蛋白密度梯度离心去髓鞘杂质、筛网过滤获得脊髓微血管段。采用酶促消化法,予0.1%Ⅱ型胶原酶消化微血管段20min后,将其接种于培养皿中,并置于CO_(2)培养箱内静止培养72h。上述操作每次取5只,重复3次,以第3次培养的目的细胞为观察、鉴定对象。通过倒置相差显微镜观察目的细胞生长情况及其形态特征、免疫细胞化学染色法检测细胞第Ⅷ因子相关抗原表达情况,鉴定所培养的目的细胞。结果:接种后的脊髓微血管段镜下呈短棍样或分支状;微血管段培养24h后有短梭形细胞从其周围迁移爬出,呈“出芽式”生长;48h后“岛屿状”的细胞集落形成,增殖迅速;72h后细胞铺满皿底,呈典型的单层、“铺路石样”、镶嵌式排列生长。免疫细胞化学染色显示,99%以上的细胞胞质呈现棕红色,Ⅷ因子相关抗原表达为阳性,苏木素衬染胞核显示为蓝色。结论:酶促消化法可以成功分离培养出活性好、纯度高的日本大耳白兔脊髓微血管内皮细胞。
- 李柏霖池茗张帆唐元瑜
- 关键词：免疫细胞化学染色法日本大耳白兔
- “土藏取决于胆”与“温胆汤”解析被引量：4
- 2017年
- 目的:纠正后世对"凡十一脏取决于胆"的错误认识,并探究"凡土藏取决于胆"理论与"温胆汤"立方本义之间的关系。方法:通过对古今文献的研究,重新认识"凡土藏取决于胆"的真正含义,并从此含义中再次认识"温胆汤"的方义。结果:"凡十一脏取决于胆"当为"凡土藏取决于胆",此理论和"温胆汤"的立方都是以"藏象"思维为基础的。结论:"凡土藏取决于胆"与"温胆汤"之间存在着重要的理法关系。
- 张帆
- 关键词：温胆汤
- 温胆汤加减治疗围绝经期综合征理论研究与临床疗效观察
- 本研究从理论和临床两个方面，通过中医经典思维来研究围绝经期综合征的病因与病机，探讨温胆汤的立方本义及应用温胆汤治疗围绝经期综合征的理论基础，并通过临床研究以观察应用温胆加减治疗围绝经期综合征的临床效果。 第一部分:理论...
- 张帆
- 关键词：围绝经期综合征温胆汤临床疗效
- 文献传递
- 原代家兔脑微血管内皮细胞的体外提取、培养及鉴定
- 2025年
- 目的:建立一种简单高效的原代家兔脑微血管内皮细胞(BMECs)体外提取、培养及鉴定方法。方法:将3周龄家兔脑皮质经剪碎、过筛及Ⅱ型胶原酶消化后获得纯净的脑微血管段并对其进行培养。结果:培养的目的细胞呈典型的“鹅卵石样”排列生长;免疫细胞化学染色法检测血管性血友病性因子(vWF),细胞质呈现为棕红色,表达为阳性。结论:物理过筛法结合化学酶消化法可简单高效地培养出活性强、纯度高的原代家兔BMECs。
- 李柏霖池茗张帆唐元瑜
- 关键词：脑微血管内皮细胞原代培养兔瘟家兔
