张芬
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 中国小麦花叶病毒(CWMV)复制酶基因在病株体内的表达分析被引量：2
- 2017年
- 中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus,CWMV)是引起我国小麦花叶病的重要病原之一,其基因组由2条单链正义RNA片段(RNA1-2)组成。本研究根据发表的基因组序列设计特异性引物,扩增了CWMV复制酶基因的部分片段(nt102~1101),并克隆至原核表达载体pGEX-6P1,然后导入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)pLysS中诱导表达。重组的复制酶蛋白经亲和层析纯化后免疫家兔制备多克隆抗体。Western-blot分析表明该抗体具有高度的特异性,能用于病株体内CWMV复制酶蛋白的检测。检测分析显示在病株体内,CWMV基因组RNA1可直接充当其复制酶基因的mRNA;在感染的细胞中,其复制酶组分主要是RNA1 ORF1编码的蛋白,分子量约153 kDa,且特异性地定位于膜结构上。
- 张芬张芬羊健羊健李静陈剑平
- 关键词：多克隆抗体复制酶
- 一种构建中国小麦花叶病毒侵染性克隆的方法及其应用
- 本发明涉及一种简单快速构建中国小麦花叶病毒全长cDNA侵染性克隆的方法，应用一套病毒基因组特异性引物以纯化的病毒基因组RNA为模板进行一步法RT-PCR扩增，该套引物共有4条，分别为P1F、P1R、P2F、P2R，扩增产...
- 张恒木羊健张芬李静陈剑平
- 文献传递
- 一种简单快速接种中国小麦花叶病毒的方法及其应用
- 本发明涉及一种简单快速接种中国小麦花叶病毒的方法，应用一套4条病毒基因组特异性引物(基因序列如序列表所示)以病毒基因组cDNA为模板进行扩增，扩增产物经纯化后连接至线性化双元载体，将重组的双元载体导入农杆菌并接种植物并用...
- 张恒木羊健张芬李静陈剑平
- 文献传递
