赵奇
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：东华大学更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学经济管理更多>>
- 人源基质金属蛋白酶-1的原核表达、纯化及活性鉴定
- 2025年
- 目的设计并建立人源基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)可溶性表达的原核表达及纯化系统,并基于此纯化系统筛选重要MMP-1酶活相关位点。方法基于pET28原核表达系统,通过在MMP-1两端添加HIS有效提高MMP-1溶解度;表达的MMP-1野生型经镍离子柱亲和层析、凝胶过滤层析进行纯化,同时,通过点突变获得MMP-1活性区相关位点突变体;将MMP-1野生型和突变型经胶原酶潜酶活化剂(collagenase latent enzyme acti-vator,APMA)激活,采用荧光法进行鉴定。结果纯化的MMP-1野生型最终浓度为O.6 mg/mL,纯度达96%;经APMA激活后,野生型及突变型能够与荧光底物Mca-KPLGL-Dpa-AR-NH2发生特异性切割反应,当MMP-1第165位丙氨酸发生突变后,该蛋白酶对其荧光底物的特异性切割反应显著减弱。结论成功构建了MMP-1原核表达及纯化系统,基于此系统筛选,发现A165氨基酸残基突变后MMP-1活性几乎丧失,证明此位点参与MMP-1对其荧光底物水解,是MMP-1酶学活性的重要位点。本研究为后续MMP-1抑制剂的筛选提供了更加快捷方便的方法,从而进一步推动了MMP-1靶向药物的肿瘤治疗方案。
- 缪洪升张永红赵奇张云龙陆昌瑞陈婷
- 关键词：原核表达凝胶过滤层析点突变
- 基质金属蛋白酶在癌症中的作用被引量：2
- 2024年
- 癌症也称恶性肿瘤,源于细胞的异常增殖,具有侵袭与转移的特点,对人类的生命安全造成了严重威胁。对肿瘤的早期切除和术后化疗与放疗等手段尽管有一定治疗效果,但同时存在一定毒性和不良反应。因此,探索新的肿瘤治疗方案尤为迫切。本文综述了基质金属蛋白酶家族在癌症中的作用,及其作为抗肿瘤药物靶点的广阔应用前景。研究表明,基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)家族在各种肿瘤微环境中表达量升高,且因其对细胞外基质的切割作用,成为促进肿瘤细胞的侵袭和转移的重要因素。目前,MMPs已成为抗肿瘤药物的热门靶点和肿瘤的生物标志物之一,具有广泛的研究价值。
- 张永红赵奇陆昌瑞陈婷
- 关键词：癌症基质金属蛋白酶家族抗肿瘤药物抑制剂
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- 赵奇
- 关键词：大学生商业计划书
- 文献传递
