段德勇
- 作品数：30 被引量：58H指数：4
- 供职机构：湖南农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省大学生研究性学习与创新性实验计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 运用解剖学知识教会学生分析猪发生咳喘的原因
- 2016年
- 为使学生全面了解和认识当前规模养猪场常见咳嗽和喘气问题,本文从猪呼吸系统解剖结构特点、神经调节方式,营养物质和氧气在体内大、小循环流动规律,代谢产物、二氧化碳和毒素集聚于肺等特征出发,教会学生正确分析猪异常呼吸(咳嗽、喘气)与饲料和环境安全之间的关系,提高养殖过程中对环境和饲料安全的重视度,有效降低咳嗽和喘气的发生。
- 段德勇刘自逵曹迎春屠迪刘进辉陈海涛
- 关键词：咳嗽
- 绵羊虱蝇中肠和蛹菌群结构的分析
- 为探明绵羊虱蝇雌、雄成虫中肠及蛹的菌群结构特点,提供防控绵羊虱蝇及其传播疾病的科学依据,本研究在无菌条件下采集雌、雄绵羊虱蝇成虫中肠内容物及蛹内容物,用试剂盒提取细菌总DNA,运用通用引物PCR扩增细菌16SrDNAV3...
- 汪雅琴程天印段德勇
- 关键词：DGGE中肠
- 不同饱血状态微小扇头蜱中肠和唾液菌群结构的分析
- 旨在探明微小牛蜱随吸血时间的延长,中肠和唾液微生物菌群结构的差异,以及优势菌属在中肠和唾液中增殖和迁移的特点。在无菌条件下采集半饱血、饱血微小牛蜱唾液和中肠内容物;提取细菌总DNA,PCR扩增其16SrDNAV3-V4区...
- 段德勇程天印
- 关键词：微小牛蜱唾液中肠菌群结构
- 刻点血蜱成蜱中肠菌群结构的分析
- 2024年
- 旨在探明雌、雄刻点血蜱中肠菌群结构特征及其差异。从新疆沙湾市绵羊体表采集刻点血蜱雌、雄蜱,无菌条件下收集雌、雄蜱中肠内容物,提取各样本细菌总DNA,PCR扩增细菌16S rDNA V3-V4区,运用Illiumina NovaSeq高通量双末端测序,对数据进行拼接和过滤,扩增子序列变异(ASVs)降噪与物种注释后,对比分析雌、雄蜱中肠菌群结构的组成及差异。结果:雌蜱中肠菌群多样性高于雄蜱;在门水平上,变形菌门、厚壁菌门、异常球菌门、拟杆菌门、放线菌门在雌、雄蜱中肠内相对丰度较高,其中变形菌门相对丰度最高,为2个样本的优势菌门,且变形菌门在雄蜱中肠内的含量大于雌蜱;在属水平上,Schlegelella、不动杆菌属、拟杆菌属、乳杆菌属、短波单胞菌属、罗姆布茨菌属等在雌、雄蜱中肠内的相对丰度较高,其中Schlegelella的丰度最高,且在雌蜱(41.7%)中的含量高于雄蜱(0.8%);注释到种水平且2个样本共有的菌种包括:西尔瓦诺斯亚栖热菌、鲍曼不动杆菌、柯克斯氏体共生菌、肠乳杆菌、长双歧杆菌、巴氏杆菌拟杆菌等。本研究表明,刻点血蜱雌、雄蜱中肠菌群结构较为相似,但各细菌在不同分类级别上的相对丰度差异较大,这可能与雌、雄蜱吸血及生理特性不同有关。
- 刘龙江刘潇雨程天印段德勇吴平顺
- 关键词：中肠菌群结构
- 绵羊泰勒虫LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法的建立
- 2025年
- 环介导等温扩增技术(LAMP)是一种广泛应用的恒温下快捷检测技术,但其极易发生气溶胶污染导致假阳性结果,将LAMP与簇状规则间隔短回文重复序列(CRISPR)系统结合可以有效避免假阳性结果。为建立针对绵羊泰勒虫18S r RNA基因的LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法,本研究根据绵羊泰勒虫18S rRNA基因设计LAMP的特异性引物,构建靶基因的质粒标准品作为模板,优化反应条件后建立LAMP方法。进一步将LAMP产物加入CRISPR/Cas12a检测体系作为模板,优化CRISPR/Cas12a检测体系,获得最佳反应体系。结果显示,优化后LAMP方法的最佳反应温度为65℃,最佳反应时间30 min,内外引物浓度比≥6:1时最佳,LAMP-CRISPR/Cas12a的最佳反应体系为Cas12a蛋白与CRISPR RNA(crRNA)浓度比为1:2,探针浓度为2.5μmol/L。利用建立的LAMP-CRISPR/Cas12a方法检测绵羊泰勒虫、东方泰勒虫、中华泰勒虫、马泰勒虫、驽巴贝斯虫、绵羊无形体、弓形虫的DNA,结果显示仅绵羊泰勒虫为阳性结果,其他病原均为阴性;将构建的质粒标准品10倍倍比稀释(10^(0)~10^(7)倍)后作为模板,利用该方法检测,结果显示该方法的检测限为4.04拷贝/μL;于同一时间和不同时间利用该方法检测重组质粒标准品pMD19-T-T.ovis(4.04×10^(3)拷贝/μL~4.04×10^(1)拷贝/μL),分析其重复性,结果显示该方法批内变异系数小于5%,批间变异系数小于10%,具有良好的重复性。利用建立的LAMP-CRISPR/Cas12a方法与套式PCR检测临床绵羊血液样品,结果显示二者的阳性符合率达100%(14/14)、阴性符合率96.43%(54/56),总符合率97.14%(68/70)。本实验基于绵羊泰勒虫18S rRNA基因首次建立了特异性、敏感性及重复性均良好的LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法,为绵羊泰勒虫病的监测和防控奠定了技术基础。
- 张盈曹杰周勇志王亚楠张厚双段德勇周金林
- 关键词：环介导等温扩增
- 豪猪血蜱的形态学和分子生物学鉴定被引量：2
- 2022年
- 为豪猪血蜱的鉴定提供准确依据,从湖南省怀化地区猪獾体表采集蜱,运用体视显微镜超景深系统观察其形态学特征;提取蜱体壁总DNA,经PCR扩增测序获得其COX1、ITS2和16S rDNA基因序列,与GenBank数据库中序列比对,并构建系统发育树,进行同源性分析。结果显示,该蜱种雌蜱呈南瓜子形,前窄后宽;假头基为矩形,基突后缘短薄,末端刺宽圆;孔区圆形;须肢圆短,第3节背面有1对刺;盾板两侧缘呈深弧状弯曲,刻点散布均匀;颈沟短而深;缘垛较宽但不明显;无外距,内距粗短呈锥状;生殖孔为圆形,前端与基节Ⅱ中部平行,后端止于基节Ⅲ前缘;气门板呈逗点形;肛门圆形,肛沟位于肛后呈酒杯状。雄蜱除体型较小、体色较浅、盾板覆盖全背、颈沟短而浅、缘垛明显形状狭长、生殖孔与基节Ⅱ平行饱满呈唇形、肛门平行于第1缘垛呈圆形突出状、肛沟呈马蹄状等特征外,其他结构与雌蜱的相似。该蜱种COX1、ITS2和16SrDNA基因序列大小分别为749、1 656和440 bp。经测序比对,该蜱种COX1、16SrDNA基因序列与GenBank中已有豪猪血蜱COX1、16S rDNA基因序列的相似度分别可达99.21%、99.32%以上;该蜱种ITS2基因序列在GenBank中尚未有记录,其仅与长角血蜱ITS2基因序列(KX450306)的相似度较高为91.32%。通过COX1、ITS2和16S rDNA基因系统发育树分析,该蜱种与其他血蜱种聚于同一属分支下。结果表明,从猪獾体表采集的蜱种为豪猪血蜱,结合形态结构及分子标记特征较易鉴定该蜱种。
- 刘雨珂王爱兵刘国华刘磊程天印段德勇
- 关键词：形态学系统发育树
- 波斯锐缘蜱的形态学和分子标记特征被引量：4
- 2019年
- 为了精准鉴定波斯锐缘蜱,从新疆、甘肃、河北等地采集寄生蜱,借助体视显微镜超景深系统对其形态学特征进行观察;经PCR扩增、测序获得其16S rDNA和cox1基因序列,结合GenBank数据库中参考序列,比对分析同源性并构建系统进化树。结果显示,波斯锐缘蜱幼蜱形态与其他发育阶段差异较大,其体型较小,背、腹表面光滑,无盘窝,生殖孔未形成,足3对。若蜱除生殖孔不显著外,其他形态结构均与成蜱相似。雌、雄成蜱形态学差异主要为:雌蜱生殖孔呈横裂形,雄蜱生殖孔呈半圆形。同时,在16S rDNA和cox1基因序列的邻位相接系统进化树中,波斯锐缘蜱分布于两大进化枝之一的软蜱科,同种聚类良好。结果提示:波斯锐缘蜱具有显著、易辨识、易鉴定的形态学和分子标记特征。
- 段德勇刘国华程天印
- 关键词：形态学分子标记
- 不同饱血状态微小牛蜱中肠和唾液菌群结构的分析被引量：3
- 2017年
- 旨在探明微小牛蜱随吸血时间的延长,中肠和唾液微生物菌群结构的差异,以及优势菌属在中肠和唾液中增殖和迁移的特点。在无菌条件下采集半饱血、饱血微小牛蜱唾液和中肠内容物;提取细菌总DNA,PCR扩增其16SrDNA V3-V4区,Illumina MiSeq双端测序;对序列进行拼接和过滤、OTUs聚类、物种注释及多样性分析。结果显示,共得到134 317条序列,聚类后获得1 304个OTUs,半饱血雌成蜱唾液(SP)、饱血雌成蜱唾液(SF)、半饱血雌成蜱中肠内容物(MP)、饱血雌成蜱中肠内容物(MF)分别获得336、332、269、289个OTUs,其中152个OTUs为4个样本共有;4个样品在门水平上,以变形菌门和厚壁菌门为优势菌门,变形菌门在中肠中的含量大于唾液,而厚壁菌门反之;在属水平上,4个样本以柯克斯体属、不动杆菌属、甲基杆菌属、短波单胞菌属、立克次体属、埃希菌属为优势菌属,其中柯克斯体属、不动杆菌属在4个样本中含量均较大,柯克斯体属在半饱血状态下,含量高于饱血状态;不动杆菌属在唾液中的含量高于中肠。结果表明,微小牛蜱中肠和唾液中有复杂的微生物菌群结构;细菌在不同组织中的分布不同,其含量随吸血时间的延长而发生变化。
- 段德勇程天印
- 关键词：微小牛蜱唾液中肠菌群结构
- 牦牛窦房结和窦房结动脉的形态学观察
- 本实验通过组织学、免疫组织化学及透射电镜技术对不同年龄牦牛窦房结进行观察研究。并采用组织学、ABS铸型及血管造影技术对窦房结动脉进行研究。结果表明,牦牛窦房结位于前腔静脉壁与右心房交界,即界沟中部心外膜下,着色比普通心肌...
- 段德勇崔燕
- 关键词：牦牛窦房结窦房结动脉形态学
- 文献传递
- 绵羊无浆体LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法的建立被引量：1
- 2025年
- 绵羊无浆体(Anaplasma ovis)是一种蜱传、寄生于红细胞内的细菌病原体,引起绵羊、山羊和野生反刍动物等发病,对我国养羊业发展造成严重危害。尽管已有多种绵羊无浆体诊断方法报道,但仍然缺少简易快捷、应用于现场的检测技术。本研究旨在建立一种针对绵羊无浆体msp4基因的LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法。该检测方法是在恒定温度下进行的,不需要特殊设备仪器,能够产生荧光呈现可视化的结果。通过优化LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法的体系以确定各成分最佳浓度比。该检测方法能够检测到绵羊无浆体msp4基因最低质粒DNA拷贝数为3.90 copies/μL,具有较高的敏感性。检测其他无浆体和其他常见羊病原体时呈阴性,表明特异性良好。对临床样本的应用检测,与常规PCR检测结果符合率为100%。结果表明,建立的LAMP-CRISPR/Cas12a体系适用于绵羊无浆体的检测,具有快捷方便的现场诊断和在资源匮乏的情况下应用的优势。
- 郭心龙周勇志曹杰王亚楠张厚双段德勇周金林
- 关键词：LAMPCRISPR
