吴少敏
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：华南理工大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 人表皮细胞生长因子在大肠杆菌中的高效表达及功能鉴定
- 人表皮细胞生长因子(Human Epidermal Growth Factor,hEGF)是人体内的一种活性物质。hEGF不仅能刺激细胞增殖、分化和迁移,在伤口愈合、器官发生和细胞信号传导中也扮演着极其重要的角色,因此目...
- 吴少敏
- 关键词：分子伴侣SUMO内含肽HEGF
- 文献传递
- 一种促进人表皮细胞生长因子在大肠杆菌高效功能性表达的方法
- 本发明公开一种促进人表皮细胞生长因子在大肠杆菌高效功能性表达的方法。该方法是通过构建表达载体pET21a‑hEGF‑Mxe‑SUMO，实现了不带任何外源氨基酸的hEGF蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效可溶表达。本...
- 王菊芳马毅李杉吴少敏余结莹
- 一种促进人表皮细胞生长因子在大肠杆菌高效功能性表达的方法
- 本发明公开一种促进人表皮细胞生长因子在大肠杆菌高效功能性表达的方法。该方法是通过构建表达载体pET21a‑hEGF‑Mxe‑SUMO，实现了不带任何外源氨基酸的hEGF蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效可溶表达。本...
- 王菊芳马毅李杉吴少敏余结莹
- 文献传递
- 重组类人Ⅰ型胶原蛋白肽在大肠杆菌中的表达纯化及功能鉴定被引量：6
- 2016年
- 本研究构建了编码重组类人Ⅰ型胶原蛋白肽基因的原核表达载体pET28a-rhCⅠ,并将其转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行诱导表达。采用PCR的方法扩增重组类人Ⅰ型胶原蛋白肽的cDNA序列,并将其克隆到原核表达载体pET28a上;重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行IPTG诱导表达,并优化表达条件。利用SDS-PAGE和WesternBlot检测表达产物。大量表达重组蛋白,采用镍亲和层析进行纯化,并对纯化后的蛋白进行体外抗氧化研究以及促细胞增殖分析。结果表明,通过大肠杆菌Rosetta(DE3)诱导表达获得了分子量约为40ku的重组蛋白,与预期相符。经镍亲和层析获得纯度较高的蛋白,通过DPPH实验证明其有一定的抗氧化活性;而且MTT实验证实该蛋白可以促进小鼠成纤维细胞3T3细胞的增殖,为其在食品、化妆品和医疗行业的应用提供一定的理论依据。
- 杨晶余洁莹王蒙吴少敏马毅王菊芳
- 关键词：胶原蛋白抗氧化细胞增殖
- cA-GFP融合蛋白在大肠杆菌中的高效功能性表达
- 2015年
- 为了实现乳酸乳球菌锚定蛋白cA在大肠杆菌中可溶表达以及直观检测其生物学活性,以乳酸乳球菌MG1363为模板,扩增N-乙酰葡萄糖胺糖苷酶AcmA基因,将其C末端序列与GFP基因融合,连接至大肠杆菌表达载体pET28a,构建重组质粒pET28a-cA-GFP,转化至大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),通过低温诱导表达重组蛋白cA-GFP。工程菌超声破碎后的上清液与经热酸处理的乳酸乳球菌常温孵育,经SDS-PAGE和荧光显微镜检测。结果表明,工程菌可以表达分子量约53ku的目的融合蛋白质,与预期大小相符。cA-GFP通过锚定蛋白cA的引导回向锚定,成功将GFP展示在乳酸乳球菌表面,目的蛋白cA-GFP在乳酸乳球菌表面展示量为121mg/g干重菌体。GFP锚定至乳酸乳球菌后于4℃保存,连续6d测定其荧光强度,荧光强度仍可达82.2%,证明其稳定性较好。成功获得了具有生物学功能的cA-GFP可溶性蛋白,为进一步展示功能性外源蛋白奠定了坚实的基础。
- 苏艳芳杨晶王蒙吴少敏马毅李杉王菊芳
- 关键词：乳酸乳球菌绿色荧光蛋白
