刘学文
- 作品数：5 被引量：22H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大动脉转位候选基因DYNC2LI1的发现与功能分析
- 2021年
- 目的通过遗传学分析及功能学实验发现新的大动脉转位候选基因。方法对381例散发大动脉转位患者进行全外显子组测序,利用基因负荷分析筛选候选基因。针对患者中发现的不同突变,进行突变功能分析:构建体外表达质粒,并采用实时荧光定量PCR及Western blot检测mRNA及蛋白质的表达情况。在NIH3T3成纤维细胞中敲低目的基因,并对表达谱进行通路富集分析。结果与人群突变相比,大动脉转位组中DYNC2LI1基因突变负荷显著增加,提示DYNC2LI1基因突变与大动脉转位的发生存在必然联系。相比于野生型质粒,DYNC2LI1基因突变c.A239C,p.D80A的mRNA及蛋白的表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.0001,P<0.01);c.T240A,p.D80E和c.T389C,p.L130R的mRNA的表达量同样明显降低(P<0.001,P<0.05),但蛋白表达没有明显差异(P>0.05)。对DYNC2LI1敲低后的细胞转录组分析发现,伪结构组装相关通路的基因显著上调;而与心脏结构发育及体轴形态等通路相关的基因发生下调。结论与纤毛结构和功能相关的DYNC2LI1基因是大动脉转位的潜在致病基因。
- 崔金慧陈文刘宣雨李文轲韩变梅刘学文逄坤静李守军周洲
- 关键词：先天性心脏病大动脉转位纤毛
- 全外显子组测序在Danon病诊断中的应用:附一家系报告
- 2019年
- 目的利用全外显子组测序技术帮助临床对疑难疾病进行明确诊断.方法1例临床表现为轻微心肌肥厚和骨骼肌病的29岁先证者,肌肉活检提示为多微小轴空病,对其进行全外显子组测序,发现可能的致病基因突变,并在患者及其所有亲属中进行该变异的Sanger测序验证.结果在先证者中发现了位于X染色体上可能致病的杂合性变异基因LAMP2(lysosome-associated membrane protein-2)的变异位点c.974delT(p.Leu325fs),LAMP2编码Ⅱ型溶酶体相关膜蛋白,与X连锁显性遗传的溶酶体病——Danon病相关.与先证者具有类似的超声心电图和肌肉活检结果的弟弟也携带该位点的半合子变异,但包括患者父亲在内的健康亲属中均无此位点.因此,该变异位点在此家系中存在与疾病的共分离.结论对于无法根据临床表现和常规检查结果明确诊断的疑难病例,全外显子组测序可能是更为可行且有效的鉴别诊断方法.
- 殷昆仑马懿张敏李天骄韩变梅刘学文张玉晶王仁平周洲
- 肝素及小肝素分子对培养平滑肌细胞的双重调节作用被引量：3
- 2000年
- 为研究肝素及小肝素分子对培养的平滑肌细胞生长的作用 ,以探讨其是否可以作为一种抗血管平滑肌细胞增殖的药物 ,采用3H -胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法观察肝素及小肝素分子对培养的人主动脉平滑肌细胞合成DNA的影响。肝素及小肝素分子的量以糖醛酸表示 ,以其浓度计算 (18、35和 70mg/L)。结果发现 ,肝素及小肝素分子对生长良好的平滑肌细胞有抑制作用 ,不同浓度肝素的抑制率分别为 6 6 %、6 9%和 6 9% ,而不同浓度小肝素分子抑制率分别为 6 0 %、6 8%和 6 7%。肝素及小肝素分子对生长不良的平滑肌细胞有促增殖作用 ,肝素促增殖率为149%、140 %和 180 % ,小肝素分子为 2 0 7%、2 46 %和 30 9%。结果提示肝素及小肝素分子对培养不同状态的平滑肌细胞有抑制或促进增殖的双重调节作用。
- 丛祥凤刘学文张英珊
- 关键词：肝素小分子平滑肌增殖作用
- 溶血磷脂酸对幼年大鼠心肌细胞收缩和钙瞬变的影响
- 2013年
- 目的我们前期的研究发现LPA受体在幼年大鼠心脏的表达显著高于成年的表达,提示LPA信号在心脏收缩功能尚未成熟时可能具有更为重要的调节作用。本研究通过观察LPA对此未成熟阶段心肌细胞钙瞬变和收缩力的作用,探讨LPA信号对幼年心肌兴奋-收缩耦联的影响。方法 Langendorff装置逆向灌流胶原酶分离获得不同发育阶段大鼠心肌细胞;采用IonOptix细胞收缩和钙离子浓度同步测定系统进行心肌细胞收缩力和钙瞬变的测定;Western blot检测不同发育阶段心肌细胞LPA受体的表达。结果 LPA对出生后14天和21天大鼠心肌细胞的收缩和钙瞬变均没有显著影响,表明LPA信号并不参与出生后14-21天大鼠心肌细胞的兴奋-收缩耦联过程和心肌细胞收缩。在大鼠出生后发育过程中,LPA受体在心肌细胞的表达在出生后14天已显著下调,不同于在整体心脏表达下调的时间点(P21d),这可能是LPA对此发育阶段心肌细胞的收缩和钙瞬变均不产生影响的原因,提示在出生后14天LPA信号对心肌细胞的发育调节功能可能即已减弱或消失。结论 LPA信号对出生后14天及之后心肌收缩和钙瞬变无显著影响,但尚不能排除LPA对出生后更早期的未成熟心肌细胞收缩和兴奋-收缩耦联的作用。
- 王芳韩变梅刘学文蔡琳丛祥凤陈曦
- 关键词：溶血磷脂酸未成熟心肌钙瞬变
- 洛伐他汀经P13K／Akt和ERK1／2信号通路抑制大鼠骨髓间充质干细胞凋亡被引量：19
- 2008年
- 目的体外以缺氧无血清条件模拟心肌梗死后的心脏缺血微环境，研究洛伐他汀能否抑制缺氧无血清引起的骨髓间充质干细胞（MSC）凋亡并探讨其机制。方法以Hoechst 33342染色荧光显微镜观察法及AnnexinV／PI流式细胞术检测洛伐他汀的抗凋亡作用，并进一步采用Western blot方法检测洛伐他汀对线粒体凋亡途径的抑制作用以及对磷脂酰肌醇3激酶（P13K）／丝氨酸苏氨酸激酶（Akt）途径和丝裂原活化的蛋白激酶（MAPK）的激酶（MEK）／细胞内信号调节蛋白激酶（ERK1／2）途径的激活作用。结果0．01～1umol／L浓度范围的洛伐他汀能够有效地抑制缺氧无血清引起的MSC凋亡。洛伐他汀抑制线粒体凋亡途径，洛伐他汀抑制细胞色素C释放，降低天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶．3（caspase-3）活化，从而保护线粒体功能。洛伐他汀的抗凋亡效应以及其抑制细胞色素C释放的作用均可被P13K抑制剂LY294002和MEK抑制剂U0126阻断。洛伐他汀能够激活P13K／Akt和MEK／ERK1／2两条细胞存活信号通路，分别导致Akt和GSK-3B及ERK1／2磷酸化。结论洛伐他汀能够抑制线粒体凋亡途径，并激活P13K／Akt和MEK／ERK1／2细胞存活通路，最终发挥抗缺氧无血清引起的MSC凋亡。该研究为提高移植干细胞的存活率提供了一种可能有效的干预措施。
- 徐瑞霞陈曦胡盛寿陈静海刘学文刘学彬石林惠丛祥凤
- 关键词：骨髓祖代细胞洛伐他汀
