向小聪
- 作品数：9 被引量：6H指数：2
- 供职机构：川北医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省自然科学基金教育部“春晖计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生石油与天然气工程化学工程更多>>
- GDF5过表达与ZIP8基因沉默双重功能慢病毒载体的构建及鉴定
- 2017年
- 目的构建过表达生长分化因子5(GDF5)与基因沉默锌离子转运蛋白(ZIP8)的双重功能慢病毒载体,检测其在诱导多能干细胞中的表达效率并建立稳定细胞系,为骨关节炎的细胞治疗提供种子细胞奠定相关研究基础。方法以人的GDF5cDNA为模板合成GDF5全长序列,设计合成靶向小鼠ZIP8的shRNA序列,依次分别与双酶切的载体pRNAU6.2相连,构建双重功能慢病毒载体。将重组质粒及阴性对照质粒分别与慢病毒包装质粒共转染HEK293T细胞,收集病毒上清后感染iPSCs细胞,实时定量PCR和免疫印迹分别检测GDF5蛋白和ZIP8mRNA的过表达与沉默效果。经G418筛选获得稳定高效表达GDF5与基因沉默ZIP8的诱导多能干细胞(iPSCs)稳定细胞株。结果成功构建了双重功能慢病毒载体pRNAU6.2-CMV-hGDF5-mshZIP8-U6,经感染和G418筛选获得稳定表达高效表达GDF5与基因沉默ZIP8的iPSCs稳定细胞株。结论成功构建的pRNAU6.2-hGDF5-mshZIP8-U6慢病毒载体,可有效上调GDF5与下调ZIP8的蛋白和mRNA的表达,成功建立稳定高效表达GDF5与基因沉默ZIP8的iPSCs细胞株,为骨关节炎的细胞治疗建立可靠的细胞平台。
- 向小聪邓丽冯刚肖东琴刘康陈竹杨飞
- 关键词：骨关节炎慢病毒IPSCS
- 携载GDF-5质粒的壳聚糖-透明质酸-硫酸软骨素微球在骨关节炎基因治疗中的应用
- 目的 骨关节炎是临床上的一种常见病和多发病。本研究尝试利用壳聚糖、透明质酸和硫酸软骨素为载体，制备一种携载GDF-5质粒的纳米微球用于骨关节炎的基因治疗。方法 55℃下按不同比例混合壳聚糖、透明质酸钠、硫酸软骨素和GDF...
- 陈竹邓尚袁德超向小聪刘康冯刚
- 关键词：骨关节炎基因治疗
- BMG／PBST双相组织工程纤维环的体外构建被引量：2
- 2016年
- 目的探讨骨基质明胶（bone matrix gelatin，BMG）／聚对苯二甲酸-共-丁二酸丁二醇酯[poly（butylenesucci—nate-co-terephthalate），PBST]双相组织工程纤维环的构建。方法PBST通过静电纺丝的方式制备成薄膜，检测其吸水率、孔隙率。取兔纤维环细胞进行体外培养，并通过番红“O”、Ⅱ型胶原免疫组化染色进行细胞鉴定；鉴定后的细胞种植到PBST薄膜支架上，通过扫描电镜观察细胞在支架上的生长情况。以BMG作为外纤维环支架，以PBST纺丝作为内纤维环支架，构建新型双相组织工程纤维环支架。将细胞种植到双相支架上，体外培养3、7、21d后，分析双相组织工程纤维环的生物学特性及力学性能。结果PBST纺丝薄膜的孔隙率为61．83％±7．33％，吸水率为297．34％±57．13％。纤维环细胞经番红“O”、Ⅱ型胶原免疫组化染色鉴定呈阳性，表现出纤维环细胞的特征。经鉴定后的细胞种植在薄膜支架上培养3、7d后，扫描电镜显示细胞在薄膜支架上黏附并增殖；将纤维环细胞接种到BMG／PBST双相支架上，培养3、7、21d后，HE染色显示细胞随培养时间的增加逐渐渗透到薄膜支架内部；番红“O”、Ⅱ型胶原免疫组化染色呈阳性，表明细胞在支架上分泌出大量糖胺聚糖和Ⅱ型胶原等纤维环细胞特有的细胞外基质。种植细胞后的双相支架体外培养21d后，支架的弹性模量[（17．56±1．47）MPa]明显较无细胞的双相支架的弹性模量[（14．83±1．02）MPa]增加。结论初步构建的BMG／PBST双相组织工程纤维环具有良好的细胞相容性和力学性能，为进一步构建完整组织工程椎间盘奠定了基础。
- 袁德超陈竹向小聪刘康冯刚
- 关键词：明胶
- 毛萼乙素通过Wnt/β-catenin通路抑制结直肠癌细胞增殖的机制探讨被引量：3
- 2022年
- 目的:探讨毛萼乙素(Eriocalyxin B,EriB)通过Wnt/β-catenin通路抑制结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞增殖的机制。方法:CCK-8、软琼脂克隆形成实验检测EriB对结直肠癌细胞增殖活力的影响,流式细胞术检测EriB对结直肠癌细胞周期和凋亡的影响,无血清悬浮培养实验检测EriB对结直肠癌细胞干性的影响,Western blot检测周期、凋亡以及分子机制相关蛋白的表达变化,裸鼠皮下瘤实验体内检测EriB对结肠癌细胞生长增殖的影响,免疫组织化学染色检测小鼠皮下瘤组织Ki67的表达,SynergyFinder用于分析EriB对5-FU抗结直肠癌的协同作用。结果:与对照组相比,EriB处理显著抑制了结直肠癌细胞的存活(P<0.05或P<0.001),抑制干细胞球体数量(P<0.001)。流式细胞术检测结果表明,与对照组相比,EriB处理组S期和G2期细胞百分比增加(P<0.001),细胞凋亡增加(P<0.001)。Western blot结果显示,EriB处理细胞后,干性相关分子CD44、Sox2、Klf4表达下调,细胞周期相关蛋白CyclinA、Cdk2表达下调,凋亡相关蛋白ClPARP、Cl-caspase-3表达上调,Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-catenin、TCF4、CyclinD 1、c-myc表达下调。EriB与5-FU联合应用,经SynergyF inder分析,ZIP synergy得分大于+10,有协同作用。裸鼠异种移植瘤模型结果表明,与对照组相比,EriB处理显著抑制肿瘤生长,并减小裸鼠皮下异种移植瘤的体积(P<0.05)。免疫组织化学分析显示,EriB处理组显著降低了肿瘤组织中Ki67的表达。结论:EriB可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制结直肠癌细胞增殖。
- 李雨奇熊蓉蒋杭遇李林向小聪
- 关键词：结直肠癌WNT/Β-CATENIN通路增殖
- 携载GDF-5质粒的壳聚糖-透明质酸-硫酸软骨素微球在骨关节炎基因治疗中的应用
- 骨关节炎是临床上的一种常见病和多发病.据统计,占世界总人口10-20％的人均受该疾病的困扰.本研究尝试利用壳聚糖、透明质酸和硫酸软骨素为载体,制备一种携载GDF-5质粒的纳米微球用于骨关节炎的基因治疗.
- 陈竹邓尚袁德超向小聪刘康冯刚
- 关键词：骨关节炎基因治疗透明质酸硫酸软骨素
- 完整组织工程椎间盘的构建及其生物学性能的初步探索
- (引言)对于晚期的椎间盘退行性变，无论是细胞移植治疗还是基因治疗都存在一定的局限性。在此阶段，具有生物学功能的完整组织工程椎间盘为从根本上解决该问题提供了新的希望。
- 陈竹袁德超向小聪刘康冯刚
- 中青年体检人群瘦型代谢相关脂肪性肝病及其危险因素分析
- 2025年
- 目的探究中青年体检人群瘦型代谢相关脂肪性肝病(metabolic associated fatty liver disease,MAFLD)及其危险因素。方法选取2022年1月至2023年12月南充市中心医院健康管理中心的中青年体检者16173例,收集其临床资料,探究中青年体检人群瘦型MAFLD及其危险因素。结果瘦型MAFLD患者均为男性,年龄45~59岁占比较大,体质量指数(body mass index,BMI)为20~<23 kg/m 2占比较大。两组年龄、性别、BMI、血压、空腹血糖、血脂、血尿酸差异均有统计学意义(P<0.05)。瘦型MAFLD组糖代谢异常检出率为12.5%,高于瘦型非MAFLD组(P<0.001);脂代谢异常检出率为62.8%,高甘油三酯血症为33.7%,低高密度脂蛋白血症为17.6%,混合型高脂血症为18.4%,均高于瘦型非MAFLD组(P<0.001);高胆固醇血症为7.4%,低于瘦型非MAFLD组(P<0.001);尿酸代谢异常检出率为26.9%,高于瘦型非MAFLD组(P<0.001)。多因素logistic回归分析结果提示,性别、年龄、BMI、高血压病、糖代谢异常、甘油三酯、混合型高脂血症、高密度脂蛋白胆固醇、高尿酸血症为瘦型MAFLD的独立危险因素。结论加强对体检人群的早期健康宣教,针对MAFLD的危险因素采取措施,以降低MAFLD的发病率。
- 童明霞陈柯向小聪周丽峰
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病
- Tetrachyrin在治疗食管癌药物研制中的应用
- 本发明公开了Tetrachyrin在治疗食管癌药物研制中的应用；通过本发明的研究发现Tetrachyrin对人食管癌细胞系TE‑1、KYSE‑150、Eca109、KYSE‑410的抗肿瘤作用；Tetrachyrin通过...
- 张云香于春雷向小聪罗丽君陈建华曹丽华练茂苇范荣珍
- 毛萼乙素通过Wnt/β-catenin通路抑制结肠癌细胞上皮间质转化被引量：1
- 2022年
- 目的 研究毛萼乙素对结肠癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响及机制。方法 以结肠癌细胞HT29、HCT116为研究对象。采用划痕愈合实验和Transwell实验检测毛萼乙素对2种细胞迁移和侵袭能力的影响;采用Western blot法检测毛萼乙素(1.0μmol/L)、毛萼乙素+Wnt/β-联蛋白(β-catenin)信号通路激动剂Licl(1.0μmol/L毛萼乙素+10 mmol/L Licl)或毛萼乙素+Wnt/β-catenin信号通路抑制剂XAV939(1.0μmol/L毛萼乙素+10μmol/L XAV939)对2种细胞的EMT相关蛋白[E-钙黏蛋白(Ecadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、锌指转录抑制因子Snail]和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白[β-catenin、原癌基因蛋白质cmyc、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、T细胞因子4(TCF4)]表达的影响。结果 毛萼乙素可显著抑制2种细胞的侵袭和迁移(P<0.01),并显著降低2种细胞中N-cadherin、Snail、β-catenin、c-myc、cyclin D1、TCF4表达水平,显著升高E-cadherin表达水平(P<0.05或P<0.01)。毛萼乙素与Licl联用后,2种细胞中β-catenin、c-myc、cyclin D1、TCF4及N-cadherin表达水平被逆转(P<0.05或P<0.01);与XAV939联用后,2种细胞中β-catenin、N-cadherin的表达进一步下调(P<0.05或P<0.01),E-cadherin的表达进一步上调(P<0.01),且细胞迁移率也显著降低(P<0.01)。结论 毛萼乙素可通过抑制Wnt/β-catenin通路激活抑制结肠癌细胞上皮间质转化。
- 匡微郑银彬李雨奇田平平苏强向小聪
- 关键词：结肠癌WNT/Β-CATENIN通路上皮间质转化
