- p53调控信号转导子和转录激活子3对肺癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：3
- 2019年
- 目的探讨p53调控信号转导子和转录激活子3(STAT3)对肺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法细胞分组为空白对照组、阴性对照组、p53小干扰RNA(siRNA)组、p53 siRNA+STAT3 siRNA组,采用western blot法检测组织中p53和STAT3蛋白表达水平;采用Transwell法检测转染后体外迁移能力和侵袭能力;采用流式细胞术膜联蛋白Ⅴ/碘化丙啶(AV-PI)双染法检测转染后凋亡情况。结果肺癌组织中p53表达水平明显下调,而STAT3表达阳性率增高,差异均有统计学意义(P <0. 05)。转染p53的siRNA能显著上调肺癌细胞中STAT3的表达水平; p53 siRNA组和p53 siRNA+STAT3 siRNA组A549细胞凋亡率(17. 91%±0. 67%,22. 51%±0. 56%)、细胞的迁移速度[(55. 16±6. 50)μm/h,(63. 30±5. 98)μm/h]、穿膜细胞数(58. 23±7. 12,68. 23±7. 14),与空白对照组和阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论 p53在肺癌中呈现低表达,p53能负向调控STAT3的表达,从而抑制其增殖和凋亡能力。
- 赵振山李海洋赵振兴代岱郝孟辉
- 关键词：肺癌P53细胞生长细胞迁移细胞凋亡
- 肺癌患者放疗前后外周血淋巴细胞亚群变化研究被引量：8
- 2016年
- 目的探讨肺癌患者放化疗前后外周血淋巴细胞亚群的变化.方法应用流式细胞仪对30例健康正常人群(对照组)和68例肺癌患者(肺癌组)放化疗前后的外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞及NK细胞等进行检测,并比较分析健康人群和肺癌患者的变化情况.结果肺癌组放疗前外周血中CD3^+,CD4^+,CD4^+/CD8^+,CD19^+与对照组相比均有所下降,差异均具有统计学意义(P<0.05);CD8^+比例较对照组升高,且差异具有统计学意义(P<0.05);而CD56^+比例较对照组升高,但结果无统计学意义(P>0.05).肺癌患者放化疗后淋巴细胞亚群CD3^+降低,CD56^+有所升高,差异无统计学意义(P>0.05);CD4^+,CD4^+/CD8^+较治疗前降低,CD8^+,CD19^+较治疗前升高,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论肺癌患者在疾病发生、发展过程中存在淋巴细胞免疫异常和免疫功能紊乱的现象,外周血T,B淋巴细胞及NK细胞的检测对判断患者的免疫功能有一定参考作用.
- 李海洋赵振山
- 关键词：肺癌淋巴细胞亚群流式细胞术
- miR-93-5p对非小细胞肺癌A549细胞增殖和迁移的影响被引量：4
- 2019年
- 目的研究miR-93-5p对非小细胞肺癌A549细胞增殖和迁移的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养非小细胞肺癌细胞和正常肺细胞,检测细胞中miR-93-5p、P53表达水平,将A549细胞分为miR-93-5p低表达(miR-93-5p inhibitor)组、阴性对照(NC)组和空白对照(CK)组,转染48 h后,CKK-8法检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞迁移能力,生物信息学预测P53是miR-93-5p的直接靶标,进一步采用双荧光素酶实验进行验证,蛋白免疫印迹(Western Blot)检测miR-93-5p低表达对P53蛋白表达及STAT3信号通路相关蛋白表达的影响。结果与正常肺细胞比较,H1299、HCC827、A549肺癌细胞中miR-93-5p表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05),P53表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);转染miR-93-5p inhibitor后,A549细胞中miR-93-5p、p-STAT3、JAK、STAT3表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),P53相对表达量增加,差异有统计学意义(P<0.05);与CK组、NC组相比,A549细胞的增殖、迁移能力均下降,差异有统计学意义(P<0.05);TargetScan数据库预测显示P53是miR-93-5p的直接靶标,双荧光素酶报告基因试验证实二者存在靶向关系。Western Blot结果显示:过表达P53后,与CK组、NC组相比,A549细胞中P53蛋白相对表达量增加,差异有统计学意义(P<0.05),p-STAT3、JAK、STAT3蛋白表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MiR-93-5p可通过靶向P53调控STAT3信号通路的激活,进而调控肺癌A549细胞的增殖与迁移。
- 赵振兴赵振山李海洋杨永辉郝孟辉代岱
- 关键词：非小细胞肺癌P53细胞增殖细胞迁移
- 华蟾素通过miR-106a-5p/STAT3信号通路调控肺癌细胞增殖和凋亡的机制研究被引量：10
- 2019年
- 目的研究华蟾素对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法以0.15μg/ml华蟾素处理肺癌A549细胞,qRT-PCR和Western blot检测miR-106a-5p和STAT3表达量,MTT和流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡。转染miR-106a-5p模拟剂(mimic)和STAT3 siRNA至A549细胞中,检测细胞增殖和凋亡。靶基因预测软件预测miR-106a-5p和STAT3靶向结合位点,双荧光素酶报告基因实验检测二者靶向关系。转染miR-106a-5p抑制剂(inhibitor)和pc DNA-STAT3至A549细胞中,并用0.15μg/ml华蟾素处理,检测细胞增殖和凋亡。结果华蟾素处理的A549细胞中,miR-106a-5p上调表达,STAT3下调表达,细胞增殖抑制率和凋亡率显著升高。过表达miR-106a-5p和抑制STAT3的表达,均可提高A549细胞增殖抑制率和凋亡率。双荧光素酶报告基因实验证实miR-106a-5p和STAT3的靶向结合关系。抑制miR-106a-5p或过表达STAT3,可逆转华蟾素对A549细胞的增殖的抑制和凋亡的促进作用。结论华蟾素可抑制A549细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与调控miR-106a-5p/STAT3信号通路有关,上述结论可为华蟾素治疗肺癌的分子机制提供新依据。
- 赵振兴赵振山李海洋杨永辉郝孟辉代岱
- 关键词：肺癌华蟾素STAT3增殖凋亡
- miR-567和CacyBP对非小细胞肺癌A549细胞影响机制研究
- 2024年
- 目的:探讨miR-567和钙周期素结合蛋白(CacyBP)对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖、侵袭和凋亡的影响机制。方法:选择miR-567、CacyBP高表达的NSCLC系A549作为研究对象,将实验分为4组,空白对照组(NC组),转染pcDNA6.2 miR-567组(si-miR-567组),转染pcDNA6.2 CacyBP siRNA组(si-CacyBP组),转染pcDNA6.2 miR-567+CacyBP siRNA组(si-miR-567+CacyBP组);qRT-PCR检测miR-567、CacyBP mRNA表达;CCK-8、MTT实验检测细胞增殖情况;Transwell实验检验细胞迁移、侵袭能力;流式细胞术检测NSCLC A549细胞凋亡率;Western bolt检测各组细胞凋亡蛋白变化情况。结果:相比于NC组,si-miR-567组、si-miR-567+CacyBP组miR-567表达显著降低;相比于NC组,si-CacyBP组、si-miR-567+CacyBP组CacyBP mRNA表达显著降低;MTT实验结果显示,三组细胞增殖抑制率均显著高于NC组,且si-miR-567+CacyBP组细胞增殖抑制率显著高于si-miR-567组、si-CacyBP组;CCK-8实验结果显示,三组细胞增殖计数均显著低于NC组,且si-miR-567+CacyBP组细胞增殖计数显著低于si-miR-567组、si-CacyBP组;Transwell实验结果显示NC组的细胞迁移、侵袭个数显著高于si-miR-567组、si-CacyBP组、si-miR-567+CacyBP组;且si-miR-567组、si-CacyBP组的细胞迁移、侵袭个数显著高于si-miR-567+CacyBP组;流式细胞术检测A549凋亡结果显示相比于NC组,si-miR-567组、si-CacyBP组、si-miR-567+CacyBP组的A549细胞凋亡率明显升高,且si-miR-567+CacyBP组的A549细胞凋亡率显著高于si-miR-567组、si-CacyBP组。结论:联合干预miR-567、CacyBP能够有效降低NSCLC A549细胞的增殖、迁移、侵袭能力,同时提高细胞的凋亡率。
- 李海洋赵振山李静戎瑶郑爱民郝孟辉田发明
- 关键词：钙周期素结合蛋白非小细胞肺癌细胞增殖分子机制
- 自体心包奇静脉补片肺动脉重建对中心型肺癌患者术后并发症和预后的影响
- 2018年
- 目的探究以自体心包、奇静脉补片行肺动脉重建对于中心型肺癌患者术后并发症和预后的影响。方法回顾性分析2013年1月至2015年1月间于我院行手术治疗的98例肺癌患者的临床资料,根据手术方式分为全肺切除组(47例)和肺动脉重建组(51例),分别行全肺切除术和肺叶切除术+自体心包、奇静脉补片肺动脉重建术,比较两组患者手术前后肺功能情况,包括一秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second,FEV1),用力肺活量(forced vital capacity,FVC),每分钟最大通气量(maximal voluntary ventilation,MVV),肺一氧化碳弥散因子(transfer factor for carbon monoxide of lung,TLCO),手术情况,术后并发症发生率和生存率。结果手术前,两组患者FEV1、FVC、MVV和TLCO无统计学差异(P=0. 947,0. 710,0. 608,0. 858),手术后2个月,两组患者上述指标显著低于手术前(P <0. 05),而肺动脉重建组的上述指标显著高于全肺切除组(均为P <0. 001);肺动脉重建组患者的手术时间、术中出血量、术后胸腔引流量、术后下地时间以及住院时间显著低于全肺切除组(P=0. 027或P <0. 001),两组患者术中淋巴结清除数目无统计学差异(P=0. 440);肺动脉重建组术后并发症发生率显著低于全肺切除组(9. 80%vs. 25. 53%,P=0. 040);两组患者的总生存率无统计学差异(HR=0. 522,95%CI[0. 241,1. 130],P=0. 095);肺动脉重建组患者的无进展生存率明显高于全肺切除组(HR=0. 471,95%CI[0. 237,0. 935],P=0. 031)。结论以自体心包、奇静脉补片行肺动脉重建可以显著改善患者肺功能,手术创伤小,术后恢复快,术后并发症少,并能改善预后。
- 赵振山李海洋赵振兴代岱郝孟辉
- 关键词：肺动脉重建预后
- miR-567对非小细胞肺癌细胞恶性生物学行为及吉非替尼耐药的影响被引量：2
- 2023年
- 目的:探究miR-567对非小细胞肺癌(NSCLC)的生物学功能以及吉非替尼耐药性的影响。方法:采用RT-qPCR检测miR-567在人肺上皮细胞系BEAS-2B、NSCLC细胞系(PC9、HCC827、A549、NCI-H1975)以及吉非替尼耐药细胞株PC9/GR中的表达。PC9细胞和PC9/GR细胞分别分为negative control组、miR-567 mimic组、miR-567 inhibitor组和miR-567 mimic+CDK8组,CCK8检测细胞的增殖能力,Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验检测miR-567与CDK8的靶向关系,western blotting检测细胞中CDK8的表达。结果:miR-567在PC9、HCC827、A549、NCI-H1975中的表达显著低于BEAS-2B,miR-567在PC9/GR细胞中的表达显著低于PC9。相比于negative control组,miR-567 mimic组PC9细胞增殖、迁移和侵袭能力均显著减弱(P<0.05)。miR-567 inhibitor组PC9细胞增殖、迁移和侵袭能力均显著增强(P<0.05),miR-567 mimic组PC9/GR细胞增殖率显著低于negative control组(P<0.05)。miR-567 inhibitor组PC9/GR细胞增殖率显著高于negative control组(P<0.05)。双荧光素酶报告实验和western blotting检测结果显示CDK8为miR-567的靶基因。相比于miR-567 mimic组,miR-567 mimic+CDK8组PC9细胞的增殖、迁移以及侵袭能力均显著增强(P<0.05),miR-567 mimic+CDK8组PC9/GR细胞增殖率显著升高(P<0.01)。结论:miR-567可通过靶向调控CDK8而抑制NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭能力以及吉非替尼耐药。
- 李静李海洋赵振山
- 关键词：非小细胞肺癌耐药
- 支气管隆凸血管成形术对中心型非小细胞肺癌的治疗效果分析
- 目的:针对支气管、隆凸以及血管成形术对中心型非小细胞肺癌的治疗效果进行研究分析.
方法:选取2006年1月-2010年6月本院收治的236例中心型非小细胞肺癌患者,根据其手术方式的不同将所有患者分为三组,分别为...
- 赵振山李海洋赵振兴郭岩代岱郝孟辉
- 关键词：中心型非小细胞肺癌肺癌根治术支气管成形术
- 文献传递
- miR-567通过调控CDK8在NSCLC增殖、迁移和细胞周期中的作用及其临床相关性研究被引量：1
- 2024年
- 目的探讨微小RNA(miR)-567通过调控周期蛋白依赖性激酶8(CDK8)在非小细胞肺癌(NSCLC)增殖、迁移和细胞周期中的作用及其临床相关性研究。方法收集40例NSCLC患者的肿瘤组织和临近癌旁组织,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-567和CDK8的表达。将miR-NC mimic、miR-567 mimic、oe-NC和oe-CDK8转染至A549和H1975细胞中,使用qRT-PCR检测miR-567和CDK8的表达,CCK-8法检测细胞增殖水平,Transwell法检测细胞迁移水平,流式细胞术检测细胞周期变化。通过荧光素酶报告基因实验检测miR-567与CDK8的靶向性。结果在NSCLC患者的肿瘤组织中,miR-567表达降低,而CDK8表达升高,二者呈负相关(P<0.05)。在A549和H1975细胞中,miR-567 mimic组相较于miR-NC mimic组,miR-567表达升高,CDK8表达降低,细胞增殖和迁移水平降低,细胞G1期比例升高,S期比例降低;miR-567 mimic组在正常型CDK8中,荧光强度低于miR-NC mimic组;miR-567 mimic+oe-CDK8组相较于miR-567 mimic+oe-NC组,CDK8表达升高,细胞增殖和迁移水平升高,细胞G1期比例降低,S期比例升高。结论miR-567通过靶向抑制CDK8表达,控制肿瘤细胞在S期阻滞,从而抑制NSCLC的增殖和迁移能力。
- 李海洋赵振山李静戎瑶郑爱民郝孟辉田发明
- 关键词：细胞周期
