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谢鹏
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1
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供职机构:
川北医学院
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
王文强
川北医学院
黄超群
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川北医学院
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作者
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黄超群
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王文强
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谢鹏
传媒
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国际呼吸杂志
年份
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2015
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荧光实时定量PCR检测STAT6圈套寡核苷酸对支气管哮喘小鼠脾淋巴细胞转录IL-4mRNA的影响
2015年
目的研究STAT6圈套寡核苷酸(ODN)对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠脾淋巴细胞转录IL-4mRNA的影响作用。方法实验细胞分组:空白组(A组)、哮喘OVA组(B组)、治疗哮喘OVA组(C组)、干扰哮喘OVA组(D组)、脂质体哮喘OVA组(E组)。设计并人工合成STAT6圈套ODN及无序ODN,全硫代修饰的ODN。用OVA和氢氧化铝复制哮喘模型,用淋巴细胞分离液分离小鼠脾淋巴细胞,体外培养后,导入由阳离子脂质体2000转染剂携带的圈套ODN进入淋巴细胞培养,抽提RNA进行反转录,建立实时荧光聚合酶链反应(PCR)反应条件,通过比较ct进行基因表达的相对定量分析。观察圈套ODN的转染对脾淋巴细胞转录IL-4mRNA的影响。结果A、B、C、D、E组的IL-4mRNA分别表达为:0.02545±0.00433,0.06742±0.00128,0.03151±0.00530,0.06504±0.00775,0.05952±0.00561。A组和C组低于B组、D组和E组,其差异有统计学意义(t=6.204,P〈0.01),C组和A组间差异无统计学意义(t=1.310,P〉0.05),B组和D组、E组之间的差异无统计学意义(P〉0.05)。结论熔解曲线分析结果证明了PCR反应的特异性,应用SYBRGreenI实时荧光PCR可以特异、准确地分析STAT6圈套0DN能下调STAT6活性,降低转录IL-4mRNA的表达。
谢鹏
熊瑛
赵学飞
刘春风
王文强
黄超群
关键词:
实时定量荧光PCR
信号转导和转录激活因子
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