韩坤
- 作品数：13 被引量：49H指数：5
- 供职机构：宁夏回族自治区疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 宁夏部分地区家蝇对5种卫生杀虫剂的抗药性调查被引量：7
- 2017年
- 目的了解宁夏回族自治区(宁夏)银川、固原、吴忠和石嘴山市家蝇对5种卫生杀虫剂的抗药性状况。方法2015-2016年在银川市兴庆区、固原市原州区、吴忠市利通区和石嘴山市大武口区的农贸市场、牲畜养殖场和垃圾场等地采集家蝇测定抗性。采用微量点滴法测定家蝇对杀虫剂的半数致死浓度(LD50)。结果银川、固原、吴忠和石嘴山市的家蝇对5种卫生杀虫剂均产生了不同程度的抗药性,4个市对高效氯氰菊酯、溴氰菊酯、残杀威、DDT、毒死蜱5种杀虫剂的平均LD50值分别为0.133 3、0.067 8、2.071 6、3.810 4和0.152 6μg/只,与文献报道的敏感品系试虫比较,其抗性倍数分别为26.66、135.60、48.74、381.04和5.09倍,DDT最高,毒死蜱最低。结论亟需采取有效延缓家蝇抗药性的对策应用于灭蝇工作中。
- 韩坤张术斌杨聪郑艳娟吴建华翟晓明黑进银贺光忠
- 关键词：家蝇点滴法杀虫剂抗药性
- 对氯间二甲苯酚消毒液杀灭微生物效果的试验观察
- 目的：了解一种含对氯间二甲苯酚的家用消毒液的杀菌效果.方法：应用悬液定量杀灭微生物试验法对其杀菌效果进行观察.结果：当消毒液原液作1∶300稀释时,对大肠杆菌作用10min、金黄色葡萄球菌作用5min的平均杀灭对数值均≥...
- 曾家慧韩坤付大仁关光玉
- 关键词：微生物杀菌活性稳定性分析
- 文献传递
- 应用PCR技术检测中华按蚊蚊胃血血源
- 【目的】应用PCR技术检测甘肃地区中华按蚊Anopheles sinensis蚊胃血来源,研究其吸血习性。【方法】根据中华按蚊可能吸血对象(人、牛、猪、羊、鼠、鸡)的线粒体DNA细胞色素b序列的差异,设计种特异引物,建立...
- 朱长强韩坤艾乐乐墙世贵韩招久姜志宽谭伟龙
- 关键词：中华按蚊PCR
- 文献传递
- 2023年宁夏回族自治区6种蚊媒病毒调查
- 2025年
- 为了调查宁夏地区蚊虫携带主要蚊媒病毒的种类及其流行情况,本研究于2023年在宁夏采集蚊虫样本,采用实时荧光定量逆转录PCR(Reverse transcription-quantitative real-time PCR,RT-qPCR)筛查6种蚊媒病毒核酸,包括塔希纳病毒(Tahyna virus,TAHV)、乙脑病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)、辛德毕斯病毒(Sindbis virus,SINV)、西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)、库蚊黄病毒(Culex flavivirus,CxFV)和盖塔病毒(Getah virus,GETV)。对阳性样本进行病毒基因扩增、序列测定及系统进化分析。结果共采集5540只蚊虫标本,包含伊蚊、按蚊和库蚊,其中伊蚊数量最多为3350只(60.47%)。按采集时间、地点和蚊种共分装为185批标本。RT-qPCR检测结果显示,1批蚊虫JEV阳性,1批蚊虫TAHV阳性,55批蚊虫CxFv阳性。经Sanger测序获得1株TAHV的S、M和L段基因序列,长度分别为767 nt、3836 nt、6814 nt。1株JEV全基因组序列,长度为10967 nt。36株CxFv E基因序列,长度约为1450 nt。同源性及系统发育分析结果显示,新测序的TAHV S、M、L段基因序列分别与内蒙古分离株HQ541823.1、盘锦分离株OP727995.1和捷克斯洛伐克分离株KF361881.1亲缘关系最近,核苷酸(氨基酸)相似性分别为99.29%(100%)、94.76%(98.47%)、95.22%(99.25%);新测序的JEV全基因组序列与2020年四川毒株JEV-SC-2020-1亲缘关系较近,核苷酸(氨基酸)相似性为99.83%(99.97%),同属于GIb型;2批CxFv(NX23176、NX23182)属于GIB型,34批CxFv属于GIA型。本研究于2023年在宁夏采集的蚊虫中检测到3种蚊媒病毒,并首次在宁夏获得1株TAHV S、M、L段完整编码区基因组序列,为当地蚊媒病毒监测和防控提供了重要的基础数据。
- 郁丽琴韩坤陈汉王瑞晨张术斌马江涛殷启凯崔倩倩聂凯付士红李樊王环宇许松涛
- 关键词：乙脑病毒盖塔病毒
- 我国西北地区蚊虫标本中广平病毒的检测被引量：4
- 2022年
- 目的对我国西北地区蚊虫携带病毒开展调查,并快速发现重要的蚊媒病毒。方法通过形态学方法对采集蚊虫进行分类鉴定,深度测序和宏基因组分析方法分析蚊虫携带的病毒,结合Sanger测序法补全病毒基因组全序,应用系统进化分析方法分析病毒分子遗传特征。结果2019年7月采集自陕西省的中华按蚊标本和宁夏回族自治区的三带喙库蚊标本均检测到黄病毒属广平病毒。进化分析结果显示,这两株广平病毒序列与在中国辽宁省发现的广平病毒JM17156株具有较近亲缘关系,核酸序列同源性为99.8%。结论本研究首次在我国西北地区中华按蚊、三带喙库蚊标本中检测到广平病毒。
- 李樊殷启凯胡伟军周莉薇付士红张少白张少白韩坤聂凯许晓光何英梁国栋王环宇
- 关键词：黄病毒虫媒病毒宏基因组
- 宁夏部分地区淡色库蚊和家蝇的抗药性调查被引量：6
- 2021年
- 目的了解宁夏回族自治区银川市淡色库蚊和吴忠市、中卫市以及固原市家蝇对常用卫生杀虫剂的抗药性状况。方法采用浸渍法测定淡色库蚊幼虫现场种群的半数致死浓度(LC50),采用微量点滴法测定家蝇成虫对杀虫剂的半数致死浓度(LD50)。结果双硫磷和吡丙醚对银川市淡色库蚊幼虫LC50值分别为0.0012和0.5632 mg/L,淡色库蚊幼虫对两个药剂的抗性倍数分别为1.09、1.16。高效氯氰菊酯、溴氰菊酯和毒死蜱3种杀虫剂对吴忠、中卫和固原3个市家蝇成虫的平均LD50值分别为0.0707、0.0364和0.0490μg/只,家蝇成虫对3个药剂的抗性倍数分别为23.02、57.83和0.61倍。结论银川市淡色库蚊幼虫对双硫磷和吡丙醚仍处于敏感水平。吴忠、中卫和固原3个市家蝇成虫对毒死蜱敏感,对高效氯氰菊酯、溴氰菊酯产生了抗药性。
- 韩坤张术斌吴建华郑艳娟虎明明马宏宇赵聪王东辉马学平李海军
- 关键词：淡色库蚊浸渍法家蝇点滴法抗药性
- 2018-2019年宁夏皮肤炭疽流行特征及实验室检出情况分析被引量：8
- 2021年
- 目的了解2018-2019年宁夏皮肤炭疽疫情的流行特征及炭疽芽胞杆菌检出情况,为宁夏皮肤炭疽防控工作提供科学依据。方法使用描述性流行病学方法分析2018-2019年宁夏皮肤炭疽疫情的三间分布规律,采集疑似病例样本进行炭疽芽胞杆菌分离培养及Real-time PCR检测。结果2018-2019年共报告皮肤炭疽病例45例,时间集中在8月份(占57.78%),分布在11个县区(占50.00%),职业以农民为主(占58.00%)。对人体标本病原培养70份,共分离到炭疽芽胞杆菌12株,总检出率为17.14%;Real-time PCR检出率为64.29%,在患者使用抗生素前采样的标本分离率(64.29%)明显高于患者使用抗生素后采样的标本分离率(10.71%)。结论宁夏皮肤炭疽疫源地面积较广,处于较低散发水平,炭疽芽胞杆菌检出率较低,使用抗生素前采样检出率明显高于使用抗生素后,Real-time PCR可用于炭疽芽胞杆菌的辅助诊断。
- 杨聪高建炜马学平韩坤邹悦张术斌海娥陈丽莉
- 关键词：炭疽流行病学特征
- 2021年宁夏境外输入和本土SARS⁃CoV⁃2流行病学与基因组特征研究
- 2022年
- 研究宁夏境外输入性和本土SARS⁃CoV⁃2感染者流行病学特征及其感染病毒的基因组变异特征,为防控策略的制定和病毒溯源提供参考依据。境外输入感染者信息来源于中国疾病预防控制信息系统传染病报告信息管理系统,收集2021年宁夏入境新冠病毒核酸阳性人员信息和本地区新冠疫情的流行病学报告,采用Illumina Miseq平台上进行高通量测序,用Mafft对基因组序列多重比对,用RAxML构建最大似然法进化树(GTR+G模型,bootstrap=1000)。2021年宁夏共报告50例新冠病毒核酸阳性感染者,其中境外输入5例,本土疫情感染者45例。男性20例,女性30例;年龄小于18岁4例,18~30岁6例,30~49岁10例,大于等于50岁26例。11例病例未接种新冠肺炎疫苗,其他均完成2针剂的新冠肺炎疫苗的免疫程序。无症状感染者为4例,确诊病例为46例。获得47例病例全基因组序列,测序结果显示均为Delta变异株,境外输入病例核苷酸变异位点与10月疫情病例具有明显差异,系统进化树在不同的分支,10月疫情聚集于一簇。Delta变异株具有病毒载量高,传播速度快的特点,境外输入SARS⁃CoV⁃2变异株存在引起本地暴发与流行的风险。
- 吴忠兰蒯文和刘翔裴建新韩坤司冰倩马学平龚瑞赵建华张银豪
- 应用PCR技术检测中华按蚊蚊胃血血源被引量：3
- 2015年
- 【目的】应用PCR技术检测甘肃地区中华按蚊Anopheles sinensis蚊胃血来源,研究其吸血习性。【方法】根据中华按蚊可能吸血对象(人、牛、猪、羊、鼠、鸡)的线粒体DNA细胞色素b序列的差异,设计种特异引物,建立聚合酶链反应(PCR)体系鉴定中华按蚊蚊胃血来源。同时,对人血、猪血、牛血、羊血、鼠血、鸡血及未吸血中华按蚊中提取的DNA进行检测,验证该方法的特异性;对吸饲人血后不同时间(6、12、24、36、48、60 h)的中华按蚊进行检测,测试该方法的敏感性。【结果】该方法可从已知动物血样和中华按蚊提取的DNA中分别扩增得到689 bp(人)、271 bp(牛)、453 bp(猪)、225 bp(羊)、485 bp(鼠)、266 bp(鸡)和468 bp(中华按蚊)大小的特异性条带;吸人血36 h内的中华按蚊均能扩增出特异性条带,在吸人血后48 h、60 h的中华按蚊中,均未扩出特异性条带。共检测10只现场中华按蚊,血源来自人、牛、猪分别为5只、2只、3只,其中1只蚊子兼吸人血和猪血。【结论】建立的PCR检测方法可鉴定中华按蚊蚊胃血来源,结果稳定可靠;甘肃地区中华按蚊不仅嗜吸人血,也可兼吸其他动物血。
- 朱长强韩坤艾乐乐墙世贵韩招久姜志宽谭伟龙
- 关键词：中华按蚊PCR
- 马达里亚加病毒TaqMan RT-PCR检测方法的建立被引量：2
- 2022年
- 目的建立马达里亚加病毒(Madariaga virus,MADV)早期且快速的TaqMan反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法。方法从GenBank中下载MADV基因序列,根据多序列比对结果选择MADV的NSP1基因中的高保守序列片段设计引物与探针,利用体外转录的RNA标准品建立了MADV的绝对定量分析模型,并进行灵敏度和特异性评价以及重复性验证。结果该检测方法的灵敏度为1.0×10^(2)拷贝/反应,与其它虫媒病毒无交叉反应,重复性检测变异系数均小于1.5%。通过本研究建立的快速检测方法对源自宁夏回族自治区、浙江省和云南省的共计81份不明原因脑炎病例血清标本及161批库蚊标本进行了测定,检测结果均为阴性。结论成功建立了MADV TaqMan RT-PCR的快速检测方法,可应用于实验室的早期检测。
- 殷启凯刘文婧王国玮张维嘉付士红韩坤许崇晓许松涛李樊刘亚宁何英何英王振海聂凯
- 关键词：分子诊断
