翟志鹏
- 作品数：2 被引量：8H指数：1
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸭疫里氏杆菌保护性抗原的筛选及应用
- 鸭疫里氏杆菌（Riemerellaanatipestifer，RA），原名鸭疫巴氏杆菌（PasteurellaAnatipestifer，PA），原为巴氏杆菌科里氏杆菌属的一员，后被划入黄杆菌科，除了进化上的特异性，另一...
- 翟志鹏
- 关键词：鸭疫里氏杆菌保护性抗原PCR检测ELISA检测
- 文献传递
- 鸭疫里氏杆菌多种血清型间接ELISA检测方法的建立被引量：7
- 2015年
- 【目的】鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)是一种重要的禽病病原,分为21个血清型。但一直缺乏一种针对多种血清型广泛适用的抗体检测方法。前期的研究表明,外膜蛋白A(Outer membrane protein A,Omp A)广泛存在于多种血清型的RA菌株中,是一种重要的免疫原性蛋白,并且其基因序列在RA血清型之间具有高度的保守性,提示其可以作为RA感染血清抗体检测的靶点分子。以重组蛋白Omp A建立间接酶联免疫吸附试验检测RA的抗体。【方法】通过诱导表达条件的摸索及蛋白纯化,获得适用于ELISA包被的重组Omp A抗原。通过Western-blot证明重组蛋白Omp A是否与RA多种血清型发生免疫学反应。进行方阵试验以确定ELISA抗原的最佳包被浓度、被检测血清的反应浓度。重复性、特异性和敏感性试验检查该方法的实用性。【结果】实验证实加入1%乙醇的诱导培养基有利于重组蛋白的可溶性表达。Western-blot结果表明,重组蛋白Omp A可以与1、2、6、10、11、13、14和17型多种RA主要流行血清型有良好的免疫反应性。经方阵试验确定抗原的最佳包被浓度为8 mg/L,待检血清的最佳稀释度为1:160。所建立检测方法具有良好的重复性、特异性和敏感性。【结论】实验建立的鸭疫里氏杆菌多种血清型间接ELISA检测方法可以用于免疫后抗体消长以及感染性抗体的检测。
- 季慕寅王晴翟志鹏陈绵绵马彩凤姚火春陆承平张炜
- 关键词：鸭疫里氏杆菌外膜蛋白A间接酶联免疫吸附试验
