刘金玲
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：河南省高校科技创新团队支持计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 检测鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒双重RT-PCR的建立与初步应用被引量：5
- 2016年
- 为了快速检测临床样品中新城疫病毒(NDV)和鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的混合感染,根据NDV的F基因和IBV的N基因保守序列分别设计了2对特异性引物,优化双重RT-PCR反应条件,建立了可同时检测NDV和IBV的快速双重反转录PCR(RT-PCR)诊断方法。敏感性试验表明,此方法对NDV和IBV的RNA最小检出量分别为0.014 3和0.013 6ng;NDV的扩增片段大小为459bp,IBV的扩增片段为282bp。对其他病毒如IBDV、AIV和EDSV的检测结果均为阴性,表明此方法具有较好的特异性。对58份临床疑似样品进行检测,NDV和IBV的阳性率分别为44.82%和31.03%,NDV和IBV混合感染率为20.68%,表明本研究建立的NDV与IBV双重RT-PCR检测方法,可用于临床发病病料中NDV和IBV混合感染的快速鉴别诊断。
- 刘金玲李晓静李红杰王晓雪高冬生李永涛常洪涛赵军王川庆
- 关键词：新城疫病毒鸡传染性支气管炎病毒
- 基于PEDV中国变异株S蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立与应用被引量：6
- 2014年
- 以纯化的重组猪流行腹泻病毒(PEDV)中国变异株S蛋白为包被抗原,建立了检测PEDV流行株抗体的间接ELISA方法。所建方法最佳反应条件为:抗原最适包被量为1μg/孔,包被时间为37℃1h后4℃过夜;血清工作浓度为1∶100,作用时间为1.5h;二抗选用HRP标记的兔抗猪IgG稀释度为1∶4 000,作用时间为1.5h;显色液TMB作用时间为15min;判定标准为,样品S/P值大于等于0.058判定为阳性,小于0.045判定为阴性。所建ELISA方法具有良好的特异性和重复性。对50份疑似猪流行性腹泻血清样品进行检测,该方法与PEDV病原检测结果有较高的符合率。结果表明本研究所建立ELISA方法可用于PEDV流行株抗体检测和疫病监测。
- 陈静王晓梦杨盼盼雷喜梅刘金玲李晓静赵军王川庆
- 关键词：S蛋白间接ELISA
