王怡婷
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 喜马拉雅旱獭源鹑鸡肠球菌的分离及其耐药性检测被引量：6
- 2016年
- 目的了解青藏高原喜马拉雅旱獭携带院内感染病原菌鹑鸡肠球菌情况,并检测其对临床常用抗菌药物的耐药性。方法选择性培养基、革兰染色、生化反应和16S rRNA基因序列分析方法对细菌进行分离和鉴定;K-B纸片法检测菌株对15种抗菌药物的耐药情况,并应用PCR方法检测毒力基因和耐药基因。结果 79份喜马拉雅旱獭肠道样本中共分离到3株鹑鸡肠球菌,其中1株对利福平中介,3株均对奎奴普丁中介,对其他被检抗菌药物均敏感;未检测到常见肠球菌毒力基因(asa1、esp、hyl、gel E和cyl A)和相关耐药基因。结论首次在青藏高原旱獭粪便中分离到鹑鸡肠球菌,常见的毒力基因检测阴性,对常见抗菌药物敏感。
- 王怡婷金东杨晶卢珊濮吉孟祥莉张桂徐建国
- 关键词：喜马拉雅旱獭鹑鸡肠球菌耐药性毒力基因
- 儿童脑膜炎大肠埃希菌毒力基因ibeC的分布研究
- 2015年
- 目的对Gen Bank的1620株大肠埃希菌基因组中儿童脑膜炎大肠埃希菌毒力基因ibeC的分布进行研究。方法下载Gen Bank现存并公开释放的1620株大肠埃希菌基因组数据,构建数据库,通过序列比对程序BLAST查找分析各菌株携带ibeC情况,使用Clustal X1.83软件对大肠埃希菌代表菌株的ibeC基因序列进行多序列比对。同时应用多位点序列分型方法(multi locus sequence typing,MLST)对1620株大肠埃希菌菌株的分布特点进行分析。用Bio Numerics V4.0软件,对342株不同来源、不同致病性代表菌株及MLST数据库中已经明确分群的72株大肠埃希菌菌株的不同ST型别构建最小生成树,分析菌株之间的种群结构。结果 1620株大肠埃希菌基因组中全部携带ibeC基因,ibeC序列平均相似值为98.21%,MLST将1620株大肠埃希菌菌株分成261个已知ST型,ECOR菌株共有49个ST型别,菌株ST型别与菌株来源关联性不强,不同来源、不同致病型别的菌株分布在不同家系。结论 ibeC基因广泛分布在各类大肠埃希菌中,脑膜炎相关大肠埃希菌与其他致病型大肠埃希菌所携带ibeC基因差异微小,菌株MLST聚类分析显示所有菌株分布广泛,来源复杂,进一步说明ibeC基因非常保守。
- 刘莎金东金东王艺婷王怡婷杨晶周娟许彦梅白向宁濮吉兰瑞廷熊衍文
- 关键词：IBEC基因分布大肠埃希菌
- 结核分枝杆菌Rv2333c在巨噬细胞内功能的初步研究
- 2023年
- 目的:在耻垢分枝杆菌内过表达结核分枝杆菌Rv2333c,探究结核分枝杆菌Rv2333c在细菌侵染巨噬细胞过程中所发挥的功能。方法:构建表达Rv2333c基因的重组质粒pSUM-MCS2-Rv2333c,进而得到过表达Rv2333c的耻垢分枝杆菌菌株;用空载菌株(Ms_Vec)和过表达菌株(Ms_Rv2333c)感染巨噬细胞,并在不同时间点收集样品。随后进行细菌胞内存活实验,检测乳酸脱氢酶(LDH)含量以分析Rv2333c对巨噬细胞毒性的影响;之后通过提取细胞样品的RNA、上清培养液和细胞沉淀裂解物,利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附测定(ELISA)和蛋白免疫印迹(Western blotting)等技术检测Rv2333c对巨噬细胞内相关细胞因子的分泌,以及核因子激活B细胞的κ-轻链增强(NF-κB)和磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)等通路的影响。结果:实验成功构建了Rv2333c表达载体,并获得过表达Rv2333c的重组耻垢分枝杆菌。Ms_Rv2333c菌株感染巨噬细胞后,细胞毒性检测LDH结果显示:Rv2333c在侵染巨噬细胞早期(6 h)即对宿主的毒性明显下降[Ms_Vec:(52.55±0.90)%,Ms_Rv2333c:(27.87±1.77)%;t=17.560,P<0.001],但不影响细菌胞内菌落形成单位(log10CFU)的增殖(Ms_Vec:7.45±0.05,Ms_Rv2333c:7.35±0.16;t=1.069,P=0.345)。RT-PCR结果显示:Rv2333c可使巨噬细胞内早期(6 h)白细胞介素(IL)1βmRNA水平(2^(-ΔΔCt)值)表达下调(Ms_Vec:657.43±20.96,Ms_Rv2333c:521.36±25.97;t=5.767,P=0.005),而在侵染后期(48 h)则促进其表达上调(Ms_Vec:1548.53±125.17,Ms_Rv2333c:2168.13±130.00;t=4.855,P=0.008);但Rv2333c在感染早期(6 h)和晚期(48 h)均可使IL-6 mRNA表达上调(Ms_Vec:2.46±0.49和776.41±15.38,Ms_Rv2333c:6.02±0.37和1642.76±51.15;t值分别为8.234和22.940,P值分别为0.001和<0.001);同时也均上调γ-干扰素(IFN-γ)mRNA的表达(Ms_Vec:2.52±0.09和2.76±0.32,Ms_Rv2333c:17.24±0.47和8.52±0.08;t值分别为43.760和25.090,P值均<0.001)。Western blotting结果显示:Rv2333c可使巨噬细胞
- 何萍王怡婷宋泽萱夏辉王胜芬贺文从郑扬赵雁林
- 关键词：巨噬细胞分枝杆菌结核基因表达调控炎症趋化因子类基因
