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二十二碳六烯酸对大鼠氧糖剥夺脑微血管内皮细胞Ang-2和VEGF表达的影响被引量：2: 2016年; 目的评价二十二碳六烯酸对大鼠氧糖剥夺脑微血管内皮细胞促血管生成素2（Ang-2）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法将原代培养大鼠脑微血管内皮细胞采用随机数字表法分为3组（n＝18）：对照组（C组）、氧糖剥夺组（OGD）组和二十二碳六烯酸组（DHA组）。OGD组和DHA组采用无糖、无血清DMEM培养液培养，DHA组加入二十二碳六烯酸40 μmol，在1%O2-5%CO2-94%N2低氧培养箱中孵育；C组在常糖和常氧条件下培养。培养时间为24 h。采用AnnexinV＆PI法检测细胞凋亡情况，ELISA法测定培养液上清液Ang-2、VEGF、前列腺素E2（PGE2）和前列腺素I2（PGI2）的浓度；RT-PCR法检测细胞Ang-2和VEGF的mRNA表达；Western blot法检测环氧化酶-2（COX-2）蛋白的表达。结果与C组比较，OGD组和DHA组细胞凋亡率升高，上清液Ang-2、VEGF、PGE2和PGI2的浓度升高，细胞Ang-2、VEGF的mRNA和COX-2蛋白表达上调（P〈0.05）；与OGD组比较，DHA组细胞凋亡率降低，上清液Ang-2、VEGF、PGE2和PGI2浓度降低，细胞Ang-2、VEGF的mRNA和COX-2蛋白表达下调（P〈0.05）。结论二十二碳六烯酸可抑制大鼠氧糖剥夺脑微血管内皮细胞Ang-2和VEGF的表达，减少细胞凋亡，其机制与降低COX-2蛋白表达有关。; 陈小波余艳丽方海滨夏中元; 关键词：内皮细胞脑血管损伤血管生成素2 血管内皮生长因子类

二十二碳六烯酸预处理增强血管生成素-1对氧糖剥夺条件下大鼠脑微血管内皮细胞的保护作用被引量：1: 2015年; 目的评价二十二碳六烯酸（DHA）预处理是否增强血管生成素-1（Ang-1）对氧糖剥夺（OGD）条件下大鼠脑微血管内皮细胞（BMVECs）的保护作用。方法大鼠BMVECs传代培养，第3—4代用于实验。采用随机数字表法分为7组：正常对照组、正常对照＋Ang-1组、OGD组、OGD＋Ang-1组、OGD＋DHA组、OGD＋DHA＋Ang-1组、OGD＋DHA＋GW9662＋Ang-1组。在正常对照组和正常对照＋Ang-1组加人含血清、5mmol／L葡萄糖和1．25mmol／L丙酮酸盐的DMEM培养液；在各OGD组用无糖、无血清的DMEM液置换原培养液。在OGD＋DHA、OGD＋DHA＋Ang-1和OGD＋DHA＋GW9662＋Ang-1组加入40μmol／LDHA，同时在OGD＋DHA＋GW9662＋Ang-1组再加入5μmol／L GW9662[过氧化物酶体增殖物激活受体-1（PPAR-γ）的抑制剂]，以上3组在5％CO2和95％空气条件下预处理培养1h。预处理完成后，在正常对照＋Ang-1组、OGD＋Ang-1组、OGD＋DHA＋Ang-1组和OGD＋DHA＋GW9662＋Ang-1组加入浓度为250ng／ml的Ang-1。除正常对照组和正常对照＋Ang-1组在5％CO2和95％空气条件下培养外，其余各组均在94％N2：5％CO2：1％O2低氧条件下培养，培养时间均为24h。采用流式细胞术检测细胞凋亡情况，Westernblot检测Bax、Bel-2、半胱天冬酶-3（easpase-3）、血管生成素受体-1（Tie-1）、Tie-2、磷酸化的Tie-2（pTie-2）、磷酸化的蛋白激酶B（pAkt）和紧密连接蛋白-1（ZO-1）的表达水平。结果与正常对照组比较，OGD、OGD＋Ang-1、OGD＋DHA、OGD＋DHA＋Ang-1和OGD＋DHA＋GW9662＋Ang-1组细胞凋亡显著增加（P=0．000、0．000、0．000、0．004、0．000）；Bax、easpase．3、Tie-1表达显著增加（Bax：0．62±0．03、0．38±0．03、0．45±0．03、0．26±0．02、0．33±0．02比0．16±0．01；caspase．3：0．76±0．05、0．42±0．04、0．52±0．02、0．32±0．02、0．40±0．02比0．15±0．01；Tie-1：0．51±0．03、0．25±0．01、0．33±0．02、0．16±0．0; 陈小波夏中元雷凡薛锐; 关键词：二十二碳六烯酸氧糖剥夺细胞凋亡血管生成素-1 脑微血管内皮细胞

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陈小波

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