张惠芳
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 供职机构：福州大学更多>>
- 发文基金：国家基础科学人才培养基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：理学更多>>
- 含N-乙酰化肝素寡糖的制备及序列分析被引量：3
- 2015年
- 建立了含N-乙酰化肝素寡糖的分离提纯及其序列结构分析方法。首先应用肝素酶Ⅰ深度酶解低分子量肝素来富集含N-乙酰化结构寡糖,通过Bio-Gel P10凝胶色谱法分离制备了包括二糖至十四糖的系列肝素寡糖粗样品,Pro Pac PA-1强阴离子高效液相色谱(SAX-HPLC)等方法对粗样品进一步分离,提纯得到4种六糖和3种八糖片段。其次应用肝素酶Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ复合酶解与HPLC法分析各纯化寡糖的二糖组分,并结合肝素酶Ⅰ底物特异性,初步推断4种六糖和3种八糖的序列结构。在寡糖的糖链两端均含有N-硫酸化二糖,而N-乙酰化二糖分布在糖链当中。应用电喷雾离子阱-飞行时间质谱(ESI-IT-TOF-MS)在负离子模式下进一步表征寡糖并分析其裂解规律。结果表明,各寡糖中均出现大量因SO2!3丢失形成的碎片离子峰,六糖中主要有双电荷和三电荷碎片离子峰;在八糖中出现了一系列从双电荷至五电荷的离子峰。各寡糖的双电荷离子峰质荷比进一步确定了上述寡糖的序列结构。六糖的裂解规律表明,裂解主要存在于糖苷键,N-乙酰葡糖胺和糖醛酸上的裂解方式分别为0,2X和0,2Z。本研究提供了切实有效的分离、分析未知结构肝素寡糖序列的新方法。
- 林江慧张建伟肖晓毛高建平张惠芳魏峥
- 关键词：飞行时间质谱肝素酶
- 硫酸类肝素二糖的质谱裂解规律探析被引量：3
- 2015年
- 硫酸类肝素结构决定了它与蛋白之间的相互作用,对硫酸类肝素结构的解析,能够进一步阐明结构与功能之间的关系。本实验采用电喷雾离子阱-多级质谱技术(ESI-MSn)在负离子模式(ESI-)下探析了12种硫酸类肝素二糖的裂解规律。实验发现:二糖中亚硫酸根的位置和数量对其在质谱分析中的稳定性起着决定作用,所含亚硫酸根越多越不稳定;N位亚硫酸根比C—2位和C—6位亚硫酸根更容易丢失。此外,二级质谱表明,同分异构体有其特定的裂解规律。该质谱裂解规律有助于硫酸类肝素二糖同分异构体的鉴定,可为多级质谱在硫酸类肝素结构研究中的应用提供理论依据。
- 林江慧张建伟张惠芳高建平魏峥
- 关键词：裂解规律
