任志涛 作品数:3 被引量:11 H指数:2 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
小檗碱对转化生长因子β1诱导人胚肺成纤维细胞转分化及丝裂原活化蛋白激酶信号通路蛋白磷酸化水平的影响 被引量:2 2015年 目的探讨小檗碱对转化生长因子β1诱导的人胚肺成纤维细胞MRC-5转分化过程中细胞外羟脯氨酸和细胞内平滑肌肌动蛋白、纤连蛋白及丝裂原活化蛋白激酶信号通路相关蛋白磷酸化水平的影响。方法体外培养MRC-5细胞,采用MTT法检测不同浓度小檗碱对细胞增殖的抑制作用,确定适合的作用范围;Western blot法检测不同浓度转化生长因子β1刺激MRC-5细胞转分化过程中平滑肌肌动蛋白、纤连蛋白表达水平,确定适宜的转化生长因子β1诱导浓度。不同浓度小檗碱预处理的MRC-5细胞经转化生长因子β1刺激后,采用比色法测定细胞外羟脯氨酸水平,对于细胞内平滑肌肌动蛋白、纤连蛋白表达水平以及丝裂原活化蛋白激酶信号通路相关蛋白p38 MAPK、SAPK/JNK、ERK1/2的磷酸化水平采用Western blot法进行检测。结果参考MTT法检测结果 ,选定小檗碱适宜浓度(20、40、80μmol/L)进行研究。Western blot结果显示2 ng/ml浓度转化生长因子β1可明显诱导MRC-5细胞转分化。小檗碱预处理的MRC-5细胞,较单纯转化生长因子β1诱导细胞,培养液中羟脯氨酸水平明显降低。Western blot法检测结果显示,小檗碱预处理细胞较单纯转化生长因子β1诱导细胞,平滑肌肌动蛋白、纤连蛋白表达水平明显受到抑制,丝裂原活化蛋白激酶信号通路相关蛋白p38 MAPK、SAPK/JNK、ERK1/2磷酸化水平亦受到不同程度抑制。结论小檗碱预处理对转化生长因子β1诱导的MRC-5细胞转分化过程有抑制作用,其机制可能与小檗碱下调丝裂原活化蛋白激酶信号通路相关蛋白的磷酸化水平有关。 任志涛 游雪甫 于会明 杨信怡关键词:小檗碱 转化生长因子Β1 P38丝裂原活化蛋白激酶类 重组溶葡萄球菌酶体外诱导的金黄色葡萄球菌耐药株生物学特征 被引量:2 2015年 目的:探究重组溶葡萄球菌酶体外诱导金黄色葡萄球菌(金葡菌)耐药发生规律和机制。方法用3株临床分离金葡菌,体外以亚抑菌浓度重组溶葡萄球菌酶一步法诱导耐药,观察耐药株对多种抗菌药物的药敏改变情况,测序分析肽聚糖甘氨酸五肽桥联的关键合成酶编码基因 femABX。并观察其中1株耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和1株甲氧西林敏感金葡菌(MSSA)的生长曲线、小鼠感染毒力情况。结果金葡菌耐药发生频率为10-4~10-8水平,与原代株比较,耐药株体外生长速率和小鼠体内毒力显著降低,对β内酰胺类敏感性提高2~4000倍。测序结果显示耐药株 f emA编码基因存在突变,可致终止密码子提前。结论重组溶葡萄球菌酶体外可诱导金葡菌耐药性产生,但耐药株生长繁殖力、致病力及抵抗β内酰胺类抗生素的能力显著降低。 卢曦 任志涛 李聪然 胡辛欣 聂彤颖 黄青山 陆海荣 李雪 李国庆 蒋建东 游雪甫 杨信怡关键词:金黄色葡萄球菌 诱导耐药 FEMA X基因 昆布多糖硫酸酯对H---_2O_2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用 被引量:7 2015年 目的研究昆布多糖硫酸酯(LAPS)对过氧化氢(H2O2)诱导乳鼠心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法分次消化法分离原代培养的乳鼠心肌细胞,建立H2O2诱导心肌细胞损伤模型;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度LAPS对心肌细胞的保护作用;试剂盒检测LAPS对细胞乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量的影响;利用荧光探针二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)检测细胞内活性氧(ROS)含量。结果100μmol/L的H2O2能明显造成心肌细胞损伤,LAPS能改善H2O2所造成的心肌细胞损伤;LAPS能够明显降低的过氧化损伤心肌细胞外液中LDH和CK含量、明显降低过氧化损伤心肌细胞内MDA和活性氧(ROS)的含量、明显提高过氧化损伤心肌细胞内SOD、GSH-Px和CAT的活力。结论 LAPS对心肌细胞的过氧化损伤有保护作用,与其降低或阻断脂质过氧化反应,降低细胞内ROS含量,进而阻断因ROS对细胞造成的损害,及时修复受损细胞有着密切关系。 韦淑娟 任志涛 杨信怡 李聪然 卢曦 胡辛欣 王秀坤 游雪甫关键词:昆布多糖硫酸酯 乳鼠 心肌细胞 过氧化氢