李昕 作品数:21 被引量:78 H指数:5 供职机构: 安徽医科大学第二附属医院 更多>> 发文基金: 安徽省自然科学基金 安徽省高校省级自然科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
新型R型噬菌体尾样细菌素对MRSA的抗菌活性研究 2024年 目的探索阴沟肠杆菌SHAMU191747所分泌的新型R型噬菌体尾样细菌素(phage tail-like bacteriocin,PTLB)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的抗菌活性。方法琼脂平板拮抗试验和肉汤微量发酵试验,检测阴沟肠杆菌SHAMU191747对MRSA的拮抗活性。超高速离心法和密度梯度离心法,制备阴沟肠杆菌SHAMU191747发酵上清液粗提物。使用透射电镜检测粗提物中有无新型R型PTLB。琼脂平板点种法,验证粗提物对MRSA的抗菌活性。采用SDS-PAGE电泳检测新型R型PTLB的分子量。结果阴沟肠杆菌SHAMU191747分泌新型R型PTLB,对MRSA具有强拮抗效应。新型R型PTLB的分子量约35 ku,能够高效杀伤MRSA;尾鞘未收缩的功能性分子的物理尺寸为(142.7±4.3)×(13.8±0.6)nm,尾鞘收缩的非功能性分子的物理尺寸为(57.7±1.2)×(20.8±1.5)nm。结论阴沟肠杆菌SHAMU191747产生的新型R型PTLB能够高效杀伤MRSA,具有开发成新型抗菌药物的潜力,临床应用前景很大。 唐伟 刘颖 唐震海 唐颖 李昕 姚杰 李维祖 徐元宏 周强关键词:阴沟肠杆菌 细菌素 金黄色葡萄球菌 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 抗菌活性 金黄色葡萄球菌临床分离株的溶血表型研究 2025年 目的探讨金黄色葡萄球菌临床分离株的溶血表型。方法采用三点接种法检测105株临床样本分离金黄色葡萄球菌的溶血表型;实时荧光定量聚合酶链式反应检测4种溶血素基因(hla、hlb、hlc和hld)mRNA表达量;VITEK 2 GP639药敏卡检测常用抗生素耐药性;DNA凝胶电泳法检测mecA、sea、tst和pvl基因携带率;微孔板成膜结晶紫染色法检测生物膜形成能力;CCK-8法检测巨噬细胞毒性。结果金黄色葡萄球菌临床分离株中检出7种溶血表型。不同溶血表型金黄色葡萄球菌临床分离株在溶血素基因mRNA表达量、常用抗生素耐药性、毒力基因携带率、生物膜形成能力、小鼠巨噬细胞毒性作用等方面均有差异(P<0.05)。结论金黄色葡萄球菌临床分离株的溶血表型多样,应当引起微生物检验、临床治疗和院感防控等多维度重点关注。 高菊 翁胜男 冷贵云 李昕 姚杰 周强 唐伟关键词:金黄色葡萄球菌 临床分离株 溶血素 毒力 CBL-TDL综合模式在实验室生物安全实践教学中的应用评价 2024年 目的:探讨案例教学(CBL)联合任务驱动教学法(TDL)在医学实验室生物安全教育中的应用效果。方法:选取某三甲医院检验科实习医学生68名,按时间顺序分成对照组和实验组,每组34人。对照组以常规方法进行生物安全带教学习,实验组采取CBL-TDL综合教学模式进行带教。分别比较两组学生培训后生物安全理论及操作考核成绩和教学满意度及学生实验室生物安全认知情况。结果:实验组学生的生物安全理论考试成绩、实践操作成绩以及对教学模式的满意度均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组学生在生物安全防护、实验过程中规范操作、实验后正确处理废弃物、离开实验室前进行安全检查这四个方面差异存在统计学意义(P<0.05)。结论:在生物安全教学中采用CBL-TDL综合教学模式对实习生进行带教,能够加强对学生实验室生物安全知识培养,提高实习生实践操作能力,值得在临床带教工作中推广。 储雯雯 李昕 叶乃芳 刘周关键词:生物安全教育 临床带教 案例教学法 任务驱动教学法 CBL联合PBL教学法在临床微生物检验教学中的应用 被引量:13 2021年 目的:探讨CBL联合PBL教学法在临床微生物检验教学中的效果。方法:选取2019-2020年在某医科大学第二附属医院检验科医学检验专业实习同学共计56名,随机分为实验组和对照组,每组28名同学。分别对其进行CBL联合PBL法教学和LBL传统法教学。通过对两组学生理论考试成绩和教学满意度调查来评估教学效果。结果:实验组同学的考试分数均值、分数优秀占比和满意度都高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CBL联合PBL教学法在临床检验实习教学中效果良好,更好地调动了学生学习的积极性、主动性,提高了其探索创新的能力。 李昕 刘周 唐伟 姚杰 储雯雯 周强关键词:临床微生物检验 教学 新型不完全溶血表型金黄色葡萄球菌滤液的抗肿瘤活性 2025年 目的探讨新型不完全溶血表型金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus with incomplete hemolytic phenotype,SIHP)滤液的抗肿瘤活性,为新型抗肿瘤药物的筛选提供参考。方法汇总分析新型SIHP的流行病学特征;采用三点法,在哥伦比亚绵羊血琼脂平板(blood agar plate,BAP)上检测新型SIHP、经典的完全溶血表型金黄色葡萄球菌(Stap-hylococcus aureus with complete hemolytic phenotype,SCHP)以及质控菌株ATCC29213和ATCC25923的溶血表型;将菌株接种LB肉汤,发酵后经离心和滤过制备金黄色葡萄球菌滤液,将金黄色葡萄球菌滤液及其与RPMI1640不同体积分数(1∶1、1∶3、1∶7)的稀释液分别与人非小细胞肺癌HCC827细胞共孵育,镜下观察细胞形态学变化并分类计数。结果新型SIHP的临床样本分离率仅为2.01%;在BAP上的溶血表型独特,具有很强的辨识度;与经典SCHP和质控菌株ATCC25923相比,新型SIHP滤液明显具有更强的肿瘤细胞毒性,能够浓度依赖性地损伤HCC827细胞,导致细胞内容物释放、胞膜气球样变或细胞裸核样变。结论新型SIHP可能是一种具有独特遗传背景的金黄色葡萄球菌新亚种,其滤液中含有高效抗肿瘤活性物质,能够为新型抗肿瘤药物的筛选奠定基础。 李欣雨 刘颖 李昕 姚杰 周强 唐伟关键词:金黄色葡萄球菌 滤液 肿瘤 细胞毒性 安徽地区临床腹泻患者艰难梭菌感染的临床特征及独立危险因素分析 被引量:2 2020年 目的探讨安徽地区艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDI)的临床特征及独立危险因素。方法收集2017年10月~2019年10月安徽医科大学第二附属医院877例临床腹泻患者粪便标本1059例,测定艰难梭菌谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,GDH)抗原及毒素。记录CDI患者临床资料,选取同期非CDI腹泻患者90例为对照组,应用单因素及多因素Logistic回归确定CDI发生的独立危险因素。结果在877例患者中共检出艰难梭菌GDH抗原205例,阳性率为23.4%(205/877)。其中46例毒素检测阳性,CDI发生率为5.2%(46/877)。与对照组比较,CDI组年龄(69.3±14.1岁vs 59.5±16.6岁)明显升高,差异有统计学意义(t=3.403,P<0.05),且肺部感染、住院时间及30天内使用广谱抗生素因素上差异有统计学意义(χ^2=10.120,10.477,21.080,均P<0.05),而血红蛋白(102.1±29.8 g/L vs 113.3±25.7 g/L)及血清清蛋白(30.3±6.4 g/L vs 34.7±6.8 g/L)水平明显降低,差异有统计学意义(t=-2.285,-3.520,均P<0.05)。高龄和30天内使用广谱抗生素(OR=1.042,29.274,均P<0.05)是CDI发生的独立危险因素。结论对住院腹泻患者进行艰难梭菌GDH抗原及毒素测定有重要的临床价值,尤其对高龄和使用广谱抗生素的腹泻患者警惕CDI发生。 叶乃芳 刘周 储雯雯 李昕 管世鹤关键词:艰难梭菌感染 毒素 肾脏内科医院感染危险因素分析 被引量:3 2016年 目的探讨肾脏内科医院感染的临床特征及其危险因素,为肾脏内科医院感染的预防和控制提供依据。方法回顾性分析2012年1月至2013年12月2 506例肾脏内科住院患者的临床资料,对发生医院感染的患者资料分别进行感染部位、病原菌种类及耐药性、发生医院感染的危险因素和原发病进行分类统计分析。结果发生医院感染213例,感染率8.5%,共分离病原菌株195例,以革兰阴性菌居多。病原菌感染部位以呼吸道为首位,构成比为48.76%,其次为泌尿道,构成比20.25%;原发病为狼疮性肾炎时,医院感染率最高,占30.04%。院感染发生的危险因素包括患者年龄、住院天数、是否合并基础疾病以及是否进行过操作性治疗等,与患者性别无相关性。结论肾脏内科住院患者发生医院感染几率较高、危险因素多样且病原菌多变。临床应合理采用抗菌药物、控制发生医院感染的危险因素,降低肾脏内科医院感染发生率。 李昕 管世鹤关键词:肾脏内科 医院感染 Garvicin LG6对不同溶血表型金黄色葡萄球菌的抗菌活性 2025年 目的探索格氏乳球菌SHAMU-LG6所分泌的细菌素(初步命名为garvicin LG6)对不同溶血表型金黄色葡萄球菌的抗菌活性。方法收集分离自2021—2023年安徽某医院临床患者的金黄色葡萄球菌,三点接种法检测金黄色葡萄球菌的溶血表型,并根据药敏检测结果将各溶血表型金黄色葡萄球菌进一步划分为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。牛津杯法抑菌试验检测格氏乳球菌SHAMU-LG6对不同溶血表型金黄色葡萄球菌的拮抗活性。对格氏乳球菌SHAMU-LG6进行全基因组测序,使用antiSMASH 7.0和BAGEL4在线数据库,寻找garvicin LG6的生物合成基因簇。经过大孔树脂吸附、梯度乙醇洗脱、旋转蒸发干燥和旋干物复溶,牛津杯法抑菌试验检测garvicin LG6粗提物对金黄色葡萄球菌的抗菌活性。结果格氏乳球菌SHAMU-LG6能够明显拮抗不同溶血表型的MSSA和MRSA。格氏乳球菌SHAMU-LG6的染色体基因组上存在garvicin LG6生物合成基因簇。格氏乳球菌SHAMU-LG6单个菌落或6 mL发酵液所分泌的garvicin LG6抗菌活性至少相当于30μg头孢西丁药敏纸片。结论Garvicin LG6能够高效杀伤不同溶血表型MSSA和MRSA,具有开发成新型抗菌药物的潜力,临床应用前景很大。 唐伟 翁胜男 王亚武 姚杰 姚杰 李昕 周强关键词:细菌素 金黄色葡萄球菌 抗菌活性 耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌全基因组测序及黏菌素耐药分析 2025年 目的通过全基因组测序分析临床耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的分子流行病学及黏菌素耐药基因,为临床诊疗提供参考。方法收集2021—2023年安徽省某三级甲等综合医院住院患者临床标本分离的57株CRKP,对所有菌株进行药敏试验。采用全基因测序技术分析CRKP菌株多位点序列分型、荚膜血清型、耐药基因和毒力基因,并对所有菌株序列进行单核苷酸多态性分析,采用聚合酶链式反应(PCR)方法扩增与黏菌素耐药相关基因。结果57株CRKP对除替加环素外的14种抗菌药物均为耐药。测序结果显示,93.0%(53/57)的CRKP携带bla KPC-2,ST11型CRKP菌株检出率最高(51/57,89.5%)。单核苷酸多态性聚类分析表明,57株CRKP分为11个克隆群,其中有4个克隆群均为ST11-KL64型CRKP。40株(70.2%)CRKP携带多种毒力基因。5株黏菌素耐药CRKP,其耐药机制是在mgr B基因70位点处插入一个ISKpn26元件。结论CRKP菌株以产KPC-2 ST11-KL64型为主要流行型,在重症监护病房有播散性流行。ISKpn26元件插入引起mgr B基因突变与该地区CRKP黏菌素耐药有关。 储雯雯 刘周 李昕 叶乃芳 龚真 曾晓娇 周强关键词:全基因组测序 单核苷酸多态性分析 耐药 格氏乳球菌SHAMU-LG6对葡萄球菌的拮抗活性研究 2025年 目的探索格氏乳球菌SHAMU-LG6对葡萄球菌的拮抗活性。方法利用VITEK 2 GP鉴定卡、Microflex LT MALDI-TOF质谱分析仪和16S rDNA扩增测序3种方法共同鉴定菌株种属。牛津杯法抑菌试验检测格氏乳球菌SHAMU-LG6对不同葡萄球菌的拮抗活性;XAD16非离子型大孔树脂吸附、梯度乙醇洗脱和旋转蒸发干燥初步分离纯化抗菌活性成分。结果格氏乳球菌SHAMU-LG6对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、路邓葡萄球菌、人葡萄球菌、头状葡萄球菌、沃氏葡萄球菌等均具有拮抗效应,抑菌指数分别为3.3、3.0、4.3、2.0、4.0、3.5、3.8和3.5。格氏乳球菌SHAMU-LG6分泌的抗菌活性成分主要存在于70%和80%乙醇洗脱物中。结论格氏乳球菌SHAMU-LG6对葡萄球菌具有强拮抗效应,其分泌的抗菌活性成分有望成为新型抗菌药物开发的先导化合物。 翁胜男 冷贵云 刘颖 王亚武 李昕 姚杰 周强 唐伟关键词:葡萄球菌 拮抗活性 分离纯化