目的:探讨膜联蛋白A6(AnnexinA6,ANXA6)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)及其表达水平与慢性牙周炎的相关性。方法:选择2022年1月~2022年12月于新疆医科大学第二附属医院口腔科就诊的142例慢性牙周炎患者作为研究对象,并选择同期于我院进行健康体检的150名牙周健康者作为健康对照组。对ANXA6基因的2个SNP位点rs11960458(C>T)、rs4958897(C>T)进行基因分型。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)对ANXA6基因mRNA相对表达水平进行测定。结果:慢性牙周炎患者和健康对照组的性别、年龄、BMI、吸烟史和饮酒史比较差异均无统计学意义(P>0.05)。对于rs11960458位点,慢性牙周炎组和健康对照组CC、CT和TT基因型分布比较有统计学差异(P=0.002);两组相加模型和显性模型比较有统计学意义(P<0.05)。对于rs4958897位点,两组CC、CT和TT基因型分布和遗传模型分布均无统计学差异(P>0.05)。两组rs11960458位点C、T基因等位基因频率比较差异有统计学意义(P=0.005),而rs4958897位点C、T基因等位基因频率比较差异无统计学意义(P=0.089)。慢性牙周炎患者ANXA6基因mRNA相对表达水平显著高于健康对照组(P<0.05)。应用ANXA6基因mRNA相对表达水平区分慢性牙周炎患者和健康对照人群曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.876(95%CI 0.835~0.916,P<0.001),灵敏度和特异度分别为72.5%和89.3%。rs11960458位点CT、TT基因型的患者ANXA6基因mRNA相对表达水平均显著高于CC基因型(P<0.05),但CT、TT基因型ANXA6基因mRNA相对表达水平比较无统计学差异(P>0.05)。结论:ANXA6基因rs11960458变异及其基因表达水平与慢性牙周炎的发生有关。
目的探讨山柰酚促进炎症状态下人根尖乳头干细胞(stem cells from the apical papilla,SCAP)增殖和成骨的适宜浓度以及山柰酚对炎症状态下人SCAP成骨/成牙本质向分化的影响。方法采用酶消化法培养SCAP,流式细胞术检测细胞表面标志物。加入10 ng/mL肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),建立炎症模型。设空白对照Control组、TNF-α组、TNF-α+山柰酚(0.001μM)组、TNF-α+山柰酚(0.01μM)组、TNF-α+山柰酚(0.1μM)组、TNF-α+山柰酚(1μM)组、TNF-α+山柰酚(10μM)组,进行CCK-8试剂盒克隆形成实验和碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)染色活性实验检测不同浓度山柰酚对SCAP增殖和ALP分泌水平的影响,得到山柰酚促进炎症状态下SCAP增殖和成骨的适宜影响浓度。茜素红染色检测适宜浓度下山柰酚对炎症状态下人根尖乳头干细胞成牙成骨的影响。结果CCK-8结果显示干预13天,0.001μM组、0.01μM组、0.1μM组能明显促进SCAP的增殖(P<0.05),而1μM组、10μM组对炎症状态下SCAP的增殖产生抑制作用(P<0.05)。与TNF-α组相比较,0.1μM、1μM组、10μM组可显著提高炎症状态下SCAP的ALP活性(P<0.05)。提示0.1μM是山柰酚促进炎症状态下SCAP增殖成骨的适宜影响浓度。茜素红染色表明0.1μM山奈酚可促进炎症状态下SCAP的矿化基质的合成能力。结论:0.1μM山柰酚可显著促进炎症状态下SCAP增殖成牙成骨的能力,该结果为山柰酚促进牙髓牙本质再生、牙根发育研究提供实验依据。
