该文探讨了白细胞介素-36γ(interleukin-36γ,IL-36γ)对人皮肤成纤维细胞的活化作用及JAK-STAT信号通路的影响。首先使用IL-36γ处理人皮肤原代成纤维细胞,通过CCK-8法和划痕实验检测细胞增殖和迁移水平;qRT-PCR测定纤维化相关基因(COL1A1、COL3A1、COL5A1、α-SMA、CCN2、LUM)的表达情况;使用基因本体(Gene Ontology,GO)功能分析、京都基因与基因组百科全书数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析和基因集富集分析(Gene Set Enrichment Analysis,GSEA)筛选潜在的关键调控途径;Western blot检测JAK-STAT通路中的关键蛋白JAK3和STAT3的表达和活化情况,并利用选择性通路抑制剂来阻断STAT3的磷酸化,进而检测IL-36γ对皮肤成纤维细胞活化作用的影响。研究结果表明,IL-36γ显著增强皮肤成纤维细胞的增殖和迁移能力,并上调与细胞外基质沉积相关的纤维化相关基因的表达;GO功能分析揭示IL-36γ的作用与胞外基质结构成分和胶原蛋白结合等功能有关,KEGG通路富集分析和GSEA进一步显示JAK-STAT通路在IL-36γ的作用下被激活;进一步的实验验证了JAK-STAT信号通路的激活对纤维化相关基因表达的影响。由此提示,IL-36γ可有效促进皮肤成纤维细胞的增殖、迁移和活化,其机制可能与JAK-STAT信号通路的激活密切相关。
