王付海 作品数:10 被引量:12 H指数:3 供职机构: 山东省千佛山医院 更多>> 发文基金: 山东省医药卫生科技发展计划项目 山东省自然科学基金 山东省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
早期胆汁外引流对重症急性胰腺炎大鼠血清高迁移率族蛋白B1和血红素加氧酶1表达的影响 2018年 目的探讨胆汁外引流对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠血清炎性因子高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和抑炎因子血红素加氧酶1(HO-1)表达的影响。方法健康SD大鼠54只,将其随机分为假手术组(SOG组)、模型未引流组(SAP组)和模型引流组(BDG组);SAP组与BDG组采用逆行十二指肠穿刺胰胆管途径注射4%牛磺胆酸钠方法构建大鼠SAP模型;SOG组只行开腹手术,并行早期胆汁外引流处理。建模成功后3组研究对象于第3、6、和12小时各处死大鼠6只,采用酶联免疫法(ELISA)检测血清细胞因子HMGB1、TNF-α和HO-1的表达。结果建模成功后第3、6和12小时SAP组TNF-α水平均显著高于SOG组(P<0.05);建模成功后第3、6和12小时,SAP组与BDG组TNF-α水平比较差异均有统计学意义(P<0.05);建模成功后第3、6和12小时,SAP组HMGB1水平均高于SOG组(P<0.05);建模成功后第6小时,SAP组与BDG组HMGB1水平比较差异有统计学意义(P<0.05);建模成功后第3、6和12小时BDG组HO-1水平均显著高于SAP组(P<0.05);建模成功后第3、6和12小时,SAP组与SOG组HO-1水平比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论早期胆汁外引流胆汁可显著抑制机体促炎细胞因子HMGB1和TNF-α的释放,提高抑炎因子HO-1的表达,从而改善SAP模型大鼠炎症状况。 张赛 王付海 温庆彬 赵玉成 吴志正 田虎关键词:高迁移率族蛋白B1 血红素加氧酶1 胆囊缺如1例报告 被引量:3 2017年 胆囊发育不全或先天性胆囊缺如(congenital absence of gallbladder,CAGB)是一种具有遗传倾向的胆道畸形,临床罕见[1]。我院收治1例外院误诊为胆囊充满型结石的CAGB患者,现报道如下。仝某,女,59岁,因"右上腹部疼痛不适"于外院行B超检查示胆囊充满型结石,未行治疗。2017年2月13日转入我院,自述"右上腹疼痛不适1月余", 张赛 王付海 徐宗珍 程佳林 田虎关键词:先天性胆囊缺如 胆道畸形 GALLBLADDER CONGENITAL 上腹 Cathepsin B影响肝细胞肝癌增殖与凋亡的实验研究 被引量:1 2016年 目的:探讨组织蛋白酶B(Cat B)对肝细胞肝癌增殖和凋亡的影响及其相关作用机制。方法:将pcDNA3-Cat B过表达质粒转染肝细胞肝癌细胞系BEL-7402,RT-PCR及免疫印迹法分别检测Cat B mRNA及蛋白的表达,CCK-8、流式细胞法观察Cat B的过表达对BEL-7402细胞系增殖和凋亡的影响;将Cat B siRNA转染肝细胞肝癌细胞系HepG2,RT-PCR及免疫印迹法分别检测Cat B mRNA及蛋白的表达,CCK-8、流式细胞法观察Cat B的低表达对HepG2细胞系增殖和凋亡的影响;针对转染了Cat B siRNA的HepG2细胞系及经整合素αvβ3抗体预处理的过表达Cat B的BEL-7402细胞系,应用免疫印迹法检测Akt和p-Akt的表达情况。结果:CCK-8法发现,Cat B表达上调能够显著促进肝癌细胞的增殖,相反Cat B的表达下调能够显著抑制肝癌细胞的增殖(P<0.001),流式细胞法发现,Cat B表达上调能够抑制肝癌细胞的凋亡,而Cat B表达下调能够促进肝癌细胞的凋亡(P<0.05);Cat B能显著促进p-Akt的表达,而经过整合素αvβ3抗体预处理的过表达Cat B的肝癌细胞系中,p-Akt的表达情况显著下降。结论:Cat B显著促进肝癌细胞的增殖并且抑制细胞凋亡,这种作用可能是通过整合素αvβ3/PI3K/p-Akt信号通路来实现的。 徐宗珍 吕巨伟 王付海 修鹏 李涛 李杰关键词:肝细胞肝癌 组织蛋白酶B 整合素ΑVΒ3 腹腔镜下保留十二指肠全胰头切除术治疗胰头良性及低度恶性病变的近期效果分析 2025年 分析腹腔镜下保留十二指肠全胰头切除术(LDPPHR)治疗胰头良性及低度恶性病变的近期临床效果。收集2019年5月至2024年11月在山东第一医科大学第一附属医院接受腹腔镜下保留十二指肠全胰头切除术的17例患者的临床资料。患者术后平均住院时间为(23.94±9.69)d,平均手术时长为(366.18±77.89)min,术中预估出血量中位数为150 mL。术后3例(17.65%)出现严重并发症(Clavien-Dindo≥Ⅲ级)。无/生化漏12例(70.59%),B级胰漏4例(23.53%),C级胰漏1例(5.88%);术后腹水2例(11.76%);手术24 h后出血2例(11.76%);术后胆漏3例(17.65%)。腹腔镜下保留十二指肠全胰头切除术治疗良性及低度恶性胰头肿瘤安全、有效,且能够保留器官功能。 李汶钢 李杰 徐宗珍 王付海 尉洪龙 李涛Tumstatin活性片段-T7肽抑制血管生成的实验研究 2017年 目的:探讨肿瘤抑素(Tumstatin)的活性片段T7肽在体外对血管生成的影响及相关机制。方法:选取人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为研究对象,在模拟肿瘤缺氧微环境的缺氧培养箱内进行相关实验。分为缺氧对照组、缺氧+T7肽(1.0μmol/L)处理组、缺氧+T7肽(2.0μmol/L)处理组。体外小管形成实验观察T7肽在缺氧环境下对血管生成的影响;CCK-8法检测T7肽对HUVECs活力的影响;Annexin V-FITC法检测细胞凋亡情况;Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白的表达变化;免疫荧光及Western blot检测HUVECs中VE-钙黏蛋白表达变化。结果 :在缺氧环境下,T7肽可明显抑制体外血管生成(P<0.05),并显著降低HUVECs活力,促进其凋亡(P<0.05);T7肽可诱导促凋亡蛋白BAX表达增加(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(P<0.01);T7肽可降低HUVECs内VE-钙黏蛋白的表达(P<0.05)。结论:T7肽可通过抑制内皮细胞活力、促进内皮细胞凋亡及降低VE-钙黏蛋白表达发挥其抗血管生成的作用。 王付海 徐宗珍 李涛 刘锋 修鹏 李杰关键词:血管生成 细胞活力 肝细胞癌组织缺氧诱导因子2α表达及其临床意义 被引量:3 2018年 目的缺氧诱导因子2α(hypoxia-inducible factor-2α,HIF-2α)是肿瘤慢性缺氧反应中的关键性蛋白。本研究检测了缺氧条件下HIF-2α在肝癌细胞系中的表达,并进一步探讨了其在肝癌及癌旁组织中的表达及其临床意义。方法首先利用蛋白质印迹法检测缺氧条件下HIF-2α在不同肝癌细胞系中的表达情况;其次以2013-01-01-2014-12-31在山东省千佛山医院经手术及术后病理确诊的66例肝细胞癌患者为研究对象,应用免疫组织化学及蛋白质印迹法检测肝癌组织、癌旁组织中HIF-2α蛋白的表达,并分析了HIF-2α蛋白表达水平与肝细胞肝癌临床病理特征之间的关系。结果缺氧环境下HIF-2α在肝癌细胞系HepG2、Bel-7402、Huh-7和SMMC-7721中普遍表达升高。12例肝癌组织中HIF-2α的表达水平明显高于癌旁组织中HIF-2α的表达水平,差异有统计学意义,P<0.01。66例肝癌组织HIF-2α阳性表达43例,阳性率为65.2%;66例癌旁组织HIF-2α阳性表达15例,阳性率为22.7%;差异有统计学意义,P<0.01。肝癌组织HIF-2α表达水平与肝癌的TNM分期有关联,P=0.033。结论 HIF-2α在肝癌组织中高表达,并且HIF-2α阳性表达与肝癌的TNM分期有关联,提示HIF-2α与肝癌的发展可能有关。 尉洪龙 王付海 修鹏 田虎 李杰 刘锋关键词:肝细胞癌 缺氧 肝癌新生血管生成与侵袭及靶向治疗分子机制的系列研究 李杰 徐宗珍 修鹏 王付海 刘锋 李涛 邹方 杜娟 肝细胞肝癌(简称肝癌)是最常见的恶性肿瘤之一,全球范围内在癌症相关死因中排名第三位。中国肝癌发病人数约占全球的55%,在癌症相关死因中位居第二。大多数肝癌患者在确诊时已失去手术机会。传统的全身化疗疗效低,副作用明显。以索...关键词:关键词:肝癌 细胞增殖 肿瘤治疗 组织蛋白酶S表达降低致肝癌细胞凋亡的机制研究 被引量:4 2014年 目的:探讨组织蛋白酶S(Cathepsin S,Cat S)表达降低后对肝癌细胞凋亡的影响及其机制。方法:选择2种肝癌细胞系MHCC97-H、Bel-7402,将肝癌细胞分为对照组、Con sh RNA组、Cat S sh RNA组。慢病毒介导的Cat S sh RNA转染肝癌细胞48 h后,Western blot检测Cat S表达变化;Annexin V/PI双染流式测细胞凋亡;Western blot检测内源性凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达变化;Western blot检测外源性凋亡相关蛋白Fas、Fas-L表达变化。结果:在肝癌细胞MHCC97-H、Bel-7402中,Cat S sh RNA可显著降低肝癌细胞中Cat S表达(P<0.01);Cat S表达降低后,凋亡细胞显著增多(P<0.01);内源性促凋亡蛋白Bax表达升高(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(P<0.01);外源性促凋亡蛋白Fas-L表达明显增强(P<0.01),Fas表达无明显变化(P>0.05)。结论:Cat S可同时通过内源性及外源性凋亡途径对肝癌细胞的凋亡进行调控。 董小锋 王付海 李涛 钟敬涛 修鹏 刘锋 徐宗珍 李杰关键词:肝细胞肝癌 组织蛋白酶S SHRNA TMEM106C在肝细胞癌中的表达及其与预后的相关性 2019年 目的:探讨跨膜蛋白106C在肝细胞癌中的表达情况及其与肝细胞癌患者预后的相关性;方法:运用实时定量PCR检测TMEM106CmRNA在肝癌细胞系及肝正常细胞系中的表达,通过癌症基因组图谱肝癌数据集,研究TMEM106CmRNA在肝癌组织及正常组织中的表达,分析TMEM106CmRNA表达与肝癌患者临床病理特征及预后的关系,Cox回归模型分析与肝癌患者预后的影响因素。结果:TMEM106CmRNA在肝癌细胞系中的表达明显高于肝正常细胞系(P<0.05),与正常肝组织相比,TMEM106CmRNA在肝癌组织中的表达明显升高(P<0.001)。生存分析显示TMEM106CmRNA高表达患者较低表达患者预后差(P<0.05),Cox回归模型分析显示TMEM106CmRNA高表达与TNM分期是影响肝细胞癌患者预后的独立危险因素(P<0.01)。结论:TMEM106C在肝细胞癌中高表达,其与临床病理分级及与患者预后相关,可作为肝细胞癌预后的生物学指标。 杨光升 王付海 刘炳琪 郭亚迅 王琪 李杰关键词:肝细胞癌 预后 HIF-1α介导缺氧环境下肝癌Bel-7402细胞自噬的激活 被引量:1 2014年 目的:探讨缺氧环境肝癌细胞自噬的激活与H IF-1α的关系。方法:将肝癌B el-7402细胞分为常氧组、缺氧+C on sh R N A组和缺氧+H IF-1αsh R N A组,将慢病毒介导的H IF-1αsh R N A转染细胞,继续培养36 h,W estern blot检测H IF-1α蛋白表达;吖啶橙(A O)荧光染色检测自噬溶酶体的形成,丹酰尸胺(M D C)荧光染色检测自噬小体的形成,并应用流式细胞技术定量自噬溶酶体或者自噬小体的荧光强度;W estern blot检测自噬激活的标志蛋白LC 3-Ⅱ表达。结果:慢病毒介导的H IF-1αsh R N A降低了缺氧诱导的肝癌细胞中H IF-1α蛋白的生成(缺氧+H IF-1αsh R N A组vs缺氧+C on sh R N A组,P<0.01),H IF-1α降低后,细胞中自噬小体及自噬溶酶体明显减少(缺氧+H IF-1αsh R N A组vs缺氧+C on sh R N A组,P<0.01),自噬激活标志蛋白LC 3-Ⅱ明显减少(缺氧+H IF-1αsh R N A组vs C on sh R N A组,P<0.01)。结论:缺氧环境下H IF-1α介导了肝癌细胞自噬的激活。 董小锋 王付海 李涛 徐宗珍 刘锋 修鹏 李杰关键词:缺氧诱导因子 SHRNA