李迁
- 作品数:15 被引量:22H指数:3
- 供职机构:海南大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学自动化与计算机技术生物学医药卫生更多>>
- 达卡气单胞菌wecA基因缺失株、回补株及其构建方法和应用
- 本发明提供了达卡气单胞菌wecA基因缺失株、回补株及其构建方法和应用,采用无缝克隆法构建we cA基因重组自杀质粒pRE112‑ΔwecA,将达卡气单胞菌菌株与含pRE112‑ΔwecA的E.coli WM3064进行接...
- 李雪松郑继平王雪倩杨晨露郭桂英范丽霞杨诺李迁
- 死亡黄牛脾肺组织中病原菌的分离与敏感药物筛选被引量:3
- 2020年
- 为明确海南省海口市某养牛场一头黄牛的死亡原因,本研究采集死亡黄牛的脾肺样品进行细菌分离纯化、生理生化鉴定、16S rRNA基因序列分析、药敏试验和小鼠感染试验。结果显示,死亡黄牛脾肺样品在BHI琼脂培养基上形成无色的露珠状优势菌落,镜检为革兰氏阴性杆菌,进一步结合生理生化与细菌16S rRNA基因测序结果确定其为阴沟肠杆菌。该菌对小鼠的半数致死量(LD50)为9.60×10~7cfu/mL,且对死亡小鼠采集病变部位进行细菌分离,得到与原分离菌相同的菌株。药敏结果显示,分离菌对诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星有较高的敏感性。本研究首次在黄牛中分离得到阴沟肠杆菌,具有重要的意义。为本地区的黄牛养殖业提供疾病防控参考。
- 刘亚欣王宇杨诺郭桂英李迁曾纪锋郑继平
- 关键词:黄牛阴沟肠杆菌
- 乳酸乳球菌电击转化方法的优化被引量:3
- 2020年
- 乳酸菌NICE系统是食品级表达系统,本实验以该系统的表达载体pNZ8148和宿主菌NZ9000为研究对象,对电击转化方法进行了优化。结果表明,在培养基中加入2.5%甘氨酸,收集OD600值为0.3的细胞、用配方Ⅰ[(洗涤液Ⅰ:蔗糖0.5 mol·L-1+甘油10%;洗涤液Ⅱ:蔗糖0.5 mol·L-1+甘油10%+EDTA50 mmol·L-1)]洗涤细胞,再转入0.2μg质粒,利用2.5 kV电压和0.2 cm电击杯进行电击转化,恢复培养1.5 h后转化效率最高,达1.6×108 CFU·μg-1。本实验为乳酸乳球菌NZ9000的电击转化参数提供了数据参考,为基于乳酸菌NICE系统的深入研究奠定了基础。
- 刘亚欣王宇杨诺郭桂英李迁曾纪锋郑继平
- 关键词:乳酸乳球菌电击转化
- 一种无痕化双靶点基因组编辑系统
- 本发明公开一种基于CRISPR/Cas9和λ‑Red的无痕化双靶点基因组编辑系统,其特征在于:1.pKS9分子量11,681kb,为温敏性质粒。含有基因:受四环素诱导的<I>cas</I>9和<I>rec</I>X基因;...
- 郑继平郭桂英曾纪锋杨诺周楚新李迁
- 达卡气单胞菌ugd及phoB基因单双缺失突变株、回补株及其构建方法和应用
- 本发明公开了达卡气单胞菌ugd及phoB基因单双缺失突变株、回补株及其构建方法和应用。本发明通过无痕敲除的方法成功构建了达卡气单胞菌Δugd基因单缺失突变株以及达卡气单胞菌ΔugdΔphoB基因双缺失突变株,并通过无缝克...
- 杨诺郑继平曾纪锋李雪松郭桂英范丽霞李迁
- 木薯种质抗螨性及其相关MeCu/ZnSOD和MeCAT1基因克隆与功能验证
- 木薯(Manihot esculenta Crantz)是世界7.5亿人口的主粮和我国热带地区重要的工业原料、饲料、生物质能源和救荒作物,是仅次于水稻、玉米、甘蔗、甘薯的第五大作物。朱砂叶螨(Tetranychus ci...
- 李迁
- 关键词:朱砂叶螨基因克隆
- 文献传递
- 鳄鱼源气单胞菌的毒力基因与耐药特性分析被引量:1
- 2021年
- 对海南地区患病暹罗鳄(Crocodylus siamensis)体内分离出的10株气单胞菌(5株嗜水气单胞菌、3株达卡气单胞菌、1株简达气单胞菌和1株维氏气单胞菌)进行了毒力基因、耐药基因的检测以及抗生素药物敏感性试验。结果表明:气溶素、肠毒素、蛋白酶等基因检出率较高,其中,lip和ela 2种毒力基因检出率高达100%;喹诺酮类、四环素类、磺胺类、β-内酰胺类、氨基糖苷类耐药基因检出率大于50%;气单胞菌对喹诺酮类抗生素、四环素类抗生素、氨基糖苷类抗生素、氯霉素类和碳青霉烯类抗生素的敏感率较高,而对于β-内酰胺类抗生素、磺胺类抗生素和糖肽类抗生素耐药率较高。
- 韩语王昕潘纪汶杨诺郭桂英李迁曾纪锋郑继平
- 关键词:鳄鱼气单胞菌毒力基因耐药基因药物敏感性
- 一种无痕化双靶点基因组编辑系统
- 本发明公开一种基于CRISPR/Cas9和λ‑Red的无痕化双靶点基因组编辑系统,其特征在于:1.pKS9分子量11,681kb,为温敏性质粒。含有基因:受四环素诱导的<I>cas</I>9和<I>rec</I>X基因;...
- 郑继平郭桂英曾纪锋杨诺周楚新李迁
- 文献传递
- 达卡气单胞菌ugd及phoB基因单双缺失突变株、回补株及其构建方法和应用
- 本发明公开了达卡气单胞菌ugd及phoB基因单双缺失突变株、回补株及其构建方法和应用。本发明通过无痕敲除的方法成功构建了达卡气单胞菌Δugd基因单缺失突变株以及达卡气单胞菌ΔugdΔphoB基因双缺失突变株,并通过无缝克...
- 杨诺郑继平曾纪锋 李雪松郭桂英范丽霞李迁
- pSETsac B质粒构建及其对达卡气单胞菌kdp E基因的有痕与无痕敲除效率评价
- 2024年
- 为构建一种新型基因敲除质粒,以pSET4s和pK18mobsac B质粒为基础,通过PCR和酶切连接的方法,构建了新质粒pSETsac B,然后以pK18mobsac B质粒为对照,评价新建质粒对达卡气单胞菌kdp E基因的有痕敲除(带有四环素筛选标记)和无痕敲除效率。结果表明,两种质粒在有痕敲除效率上无差别,但在无痕敲除上,pSETsac B的敲除效率显著高于对照质粒pK18mobsac B。由于p SETsac B为穿梭性温敏质粒,因此,该质粒可望在革兰氏阳性和阴性菌的遗传机制研究中皆可发挥作用,本研究同时也为检视kdp E基因在达卡气单胞菌中的功能提供了前期的突变体材料。
- 凌博陈丽青王宇杨诺范丽霞郭桂英李雪松曾纪锋李迁郑继平
- 关键词:基因敲除