耿卫东
- 作品数:4 被引量:16H指数:2
- 供职机构:石河子大学农学院新疆生产建设兵团绿洲生态农业重点实验室更多>>
- 发文基金:兵团博士基金国家科技重大专项新疆生产建设兵团绿洲生态农业重点实验室开放课题更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 棉花S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因的克隆及低温下的表达分析被引量:11
- 2012年
- 根据棉花S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(S-adenosy lmethionine decarboxylase,SAMDC)基因已知EST序列设计引物,采用RACE和RT-PCR技术克隆获得该基因的全长cDNA序列,命名为GhSAMDC(GenBank登录号为JN020148)。生物信息学分析表明,GhSAMDCcDNA序列全长1874bp,涵盖tiny ORF(tORF)、upstream ORF(uORF)和main ORF(mORF)3个植物SAMDC基因特征ORF。其中mORF长1064bp,编码含355个氨基酸残基的SAMDC酶原,预测分子量为38.25kD,该酶原含有高度保守的酶原剪切位点结构域(LSESSLF)和与SAMDC蛋白快速降解有关的PEST(TIHVTPEDGFSYAS)结构域。GhSAMDC基因组DNA序列全长2743bp,包含3个内含子,均位于5'UTR,其中一个位于uORF内。聚类分析表明,GhSAMDC与葡萄中该蛋白的同源关系最近,并且与其他双子叶植物聚为一类。荧光定量PCR分析结果表明,GhSAMDC表达受低温诱导,在冷敏感品种新陆早1号中基因表达水平明显高于在耐冷品种新陆早33中。
- 耿卫东李艳军张新宇朱华国孙杰
- 关键词:棉花S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶定量PCR
- Gateway技术构建棉花GhSAMDC基因植物表达载体被引量:1
- 2012年
- 为了进一步转化植物,研究棉花GhSAMDC基因在植物抗逆过程中所起作用,用Gateway技术构建棉花Gh-SAMDC基因RNA干扰载体和超表达载体。通过BP反应将干扰片段重组到植物表达载体Hellsgate4中,分别用XbaⅠ和XhoⅠ单酶切,酶切片段大小一致,表明GhSAMDC基因RNA干扰载体构建成功。通过BP反应和LR反应将超表达目的片段重组到植物表达载体pGWB17中,经HindⅢ和SacⅠ双酶切验证,酶切片段大小与目的片段一致,表明GhSAMDC基因超表达载体构建成功。
- 耿卫东李艳军张新宇孙杰朱华国
- 关键词:GATEWAY技术SAMDC植物表达载体
- 棉花S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因(SAMDC)克隆及功能研究
- 目的:棉花是世界上最重要的经济作物之一,在新疆农业生产中占有举足轻重的地位。新疆棉区在生产过程中经常遭受干旱、盐碱和低温等非生物胁迫影响,使产量大幅降低,造成严重的经济损失。多胺是一种与植物适应逆境环境密切相关的调节物质...
- 耿卫东
- 关键词:棉花克隆技术抗逆性能生理机制
- 文献传递
- 新疆耐盐苜蓿根瘤菌的分离和高效菌株的筛选被引量:4
- 2009年
- 【目的】人工接菌苜蓿根瘤菌和筛选高效菌株。【方法】采集新疆14个地州不同生态区、不同类型土样132份,采用苜蓿捕获法分离、纯化获得81个苜蓿根瘤菌菌株。【结果】快速PCR检测鉴定发现,分离得到的根瘤菌菌株均属于苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium Meliloti)。【结论】耐盐实验表明,这些菌株在YMA培养基上的耐盐能力在3.5%~5%NaCl,进一步分析发现土壤中盐含量与苜蓿根瘤菌的耐盐能力没有明显的相关性。对耐5%NaCl的8个根瘤菌菌株的16S rDNA序列进行分析,发现这些其序列同源性很高,相似性达到99.8%。根瘤菌接种实验表明,这8个菌株均能明显增加紫花苜蓿植株地上部分生长,但不同菌株其固氮效率存在显著差异,其中TC-Y菌株共生固氮效率最高。
- 熊志锐张新宇王永宝徐永生耿卫东孙杰
- 关键词:苜蓿中华根瘤菌紫花苜蓿耐盐