- 一种检测肿瘤癌基因扩增的新技术一差别PCR技术
- 1994年
- 一种检测肿瘤癌基因扩增的新技术一差别ＰＣＲ技术方刚，于泽平，刘复坤（南京军区总医院肿瘤室，南京２１０００２）差别ＰＣＲ技术，快速、敏感无同位素污染，该技术的检测原理是在一定的ＰＣＲ反应条件下，ＰＣＲ产物的量与ＰＣＲ模板的拷贝数是正相关，反映了模板拷贝...
- 方刚于泽平刘复坤
- 关键词：基因扩增PCR技术乳癌手术拷贝数人白细胞
- 一种简单、快速的血和组织中DNA的提取法被引量：20
- 1994年
- 一种简单、快速的血和组织中ＤＮＡ的提取法赵权，方刚，王咏梅（南京军区南京总医院临床分子生物学实验室，南京２１０００２）关键词ＤＮＡ提取通常由血液中提取ＤＮＡ的方法是：先得到淋巴细胞，再用蛋白酶Ｋ、ＳＤＳ消化，然后用酚氯仿抽提、乙醇沉淀。这里介绍的一种...
- 赵权方刚王咏梅
- 关键词：DNA
- R-dl-型维拉帕米调低KBv200肿瘤细胞对长春新碱和多柔比星的多药抗药性<英文>
- 1999年
- 目的:研究R-型维拉帕米对多药耐药的降低作用及其急性动物毒性,并与消旋维拉帕米的相应结果作比较。方法:细胞毒性的测定用MTT法;细胞内多柔比星积累的测定用萤光分光光度计法。急性毒性试验用BALB/c小鼠腹腔注射法。结果:R-型维拉帕米部分调低KBv200细胞对长春新碱和多柔比星的耐药性,其调低效应与作用浓度和作用时间有关。1.25μmol·L^(-1)的R-型维拉帕米与长春新碱对细胞作用24h,能够显著增加KBv200细胞对长春新碱的敏感性。在增敏和增加细胞内多柔比星累积方面,R-型维拉帕米与消旋维拉帕米效果一样,但R-型维拉帕米的急性动物毒性明显低于消旋维拉帕米。结论:R-型维拉帕米1.25μmol·L^(-1)提高耐药肿瘤细胞对长春新碱和多柔比星的敏感性,增加对长春新碱敏感性所需的药物作用时间可缩短至24h。
- 方刚杨玉龙黎介寿张祖暄
- 关键词：维拉帕米长春新碱多柔比星多药耐药性
- siRNA抑制小鼠腹腔巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α的实验研究被引量：7
- 2011年
- 0引言
肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）是由激活的巨噬细胞分泌的炎性细胞因子,虽然TNF-a在免疫反应中起着非常重要的作用,但是当它过度表达和分泌的时候会引起一系列的疾病或病态体征,如中毒性休克、风湿性关节炎、急性坏死性胰腺炎。
- 方刚赵建宁陶亮
- 关键词：SIRNA脂多糖肿瘤坏死因子-Α
- RT－PCR法检测胃癌组织mdr－1基因的表达及临床意义
- 1996年
- 应用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测了３０例胃腺癌的ｍｄｒ－１基因的表达，结果发现：术前化疗的胃腺癌ｍｄｒ－１表达阳性率为９１％，明显高于术前非化疗组的阳性率（４７％）（Ｐ＜０．０１）。在术前非化疗组中，中分化胃癌的阳性率高于低分化胃癌的阳性率（Ｐ＜０．０５），ｍｄｒ－１基因的表达与胃癌转移的发生率没有明显的关系。临床上检测胃癌的ｍｄｒ－１基因的表达，可以帮助选择术后的化疗方案。
- 方刚臧静刘福坤黎介寿陈龙邦
- 关键词：胃癌多药耐药基因
- 小分子干扰RNA片段逆转KBv200细胞多药耐药的实验研究被引量：8
- 2006年
- 目的:研究小分子干扰RNA片段(siRNA)对舌癌多药耐药(MDR)细胞系KBv200细胞的MDR1基因表达及其功能的影响,探讨siRNA作为未来化疗增敏剂的可能性。方法:运用针对MDR1基因序列的siRNA(MDR1-siRNA)在脂质体的介导下转染KBv200细胞;用RT-PCR分析MDR1 mRNA的表达水平;流式细胞术检测P-糖蛋白(P-gp)的表达;荧光分光光度法检测细胞内多柔比星(Dox)的积蓄;MTT法检测KBv200细胞对长春新碱(VCR)和Dox的敏感性变化。结果:MDR1-siRNA作用24和48 h能抑制MDR1基因的表达(P<0.05),其mRNA水平和P-gp水平均明显下降,同时使KBv200细胞对VCR和Dox的敏感性显著增加(P<0.01),并显著增加细胞内Dox的蓄积(P<0.01)。结论:MDR1-siRNA能显著抑制KBv200细胞内MDR1基因介导的MDR。
- 方刚XUE Cheng-yuan韩晓冬
- 关键词：多药耐药长春新碱多柔比星
- 反义技术治疗肿瘤的临床进展
- 2003年
- 反义技术是根据核酸间的碱基互补原理 ,用生物合成或人工合成的互补反义核酸或其化学修饰物与细胞内的特定核酸结合以抑制或封闭其表达。在肿瘤治疗方面 ,人们以癌变过程中的不同突变基因为靶位 ,设计了许多反义抗肿瘤药物 ,其中部分已进入临床试验阶段。
- 闫伟方刚
- 关键词：反义技术肿瘤
- 急性髓性白血病抑制NK细胞功能的实验研究
- 1993年
- NK细胞是肿瘤免疫监视的第一道防线,搞清肿瘤病人NK细胞活性下降的机理是提高肿瘤病人NK细胞功能的前提,也是肿瘤免疫治疗获得成功的关键。我们抽取9例急性髓性白血病(AML)病人的外周血,发现其血清和幼稚细胞(即白血病细胞)培养上清具有抑制NK细胞功能的作用,抑制作用的强弱与孵化正常NK细胞的时间相关。对照组用正常同种异体血清和正常人骨髓单个核细胞培养上清孵化,不呈现抑制作用。本实验提示血清中的抑制物质来源于白血病细胞,其抑制环节是在效靶作用之前预先作用于NK细胞。
- 方刚刘福坤
- 关键词：AML白血病杀伤细胞
- R-型维拉帕米逆转肿瘤细胞多药耐药的实验研究被引量：4
- 2000年
- 目的 :检测 R-型维拉帕米 (R- Verapamil)体外逆转肿瘤细胞多药耐药的作用及动物毒性 ,探讨 R-型维拉帕米成为未来化疗增敏剂的可能性。 方法 :细胞毒性的测定用 MTT法 ,细胞内阿霉素积蓄的测定用荧光分光光度法。动物毒性试验用 BAL B/ c小鼠腹腔注射法。 结果 :1 .2 5 μm ol/ L 的 R-型维拉帕米即可显著增加耐药 KBv2 0 0细胞对长春新碱和阿霉素的敏感性 (P<0 .0 1 ) ,其效应与作用浓度有关。在增敏和增加细胞内阿霉素积蓄方面 ,R-型维拉帕米与混旋维拉帕米效果一样 ,但 R-型维拉帕米的动物毒性低于混旋维拉帕米。 结论 :1 .2 5 μm ol/ L 的R-型维拉帕米能部分逆转耐药 KBv2 0 0细胞的多药耐药性。此浓度能被人体所接受。
- 方刚侯亚义杨玉龙陈龙邦黎介寿
- 关键词：维拉帕米长春新碱阿霉素多药耐药性
- DNA拓扑异构酶Ⅱ在增殖细胞中的表达及其意义被引量：7
- 2004年
- 目的 :探讨DNA拓扑异构酶Ⅱ (TopoⅡ )在增生性细胞中的表达情况以及在肿瘤诊断中的价值。 方法 :应用S P免疫组化法检测 10例良性扁桃体组织、8例垂体腺瘤、5例乳腺癌、16例胃癌和 5例肾癌及其周围正常组织中TopoⅡ的表达情况 ,并与常用的细胞增生标记物P5 3、Ki 6 7和增殖细胞核抗原 (PCNA)进行比较。 结果 :与正常组织细胞比较 ,TopoⅡ在各种肿瘤中的表达显著增高 (乳腺癌组P <0 .0 0 0 1、胃癌组P <0 .0 1、肾癌组P <0 .0 5 )。TopoⅡ标记指数 (LI)与Ki 6 7LI有显著相关性。胃癌组TopoⅡLI与年龄、性别和临床分级、分期无关 (P>0 .0 5 )。垂体腺瘤组TopoⅡLI与年龄和性别无关 (P >0 .0 5 )。在扁桃体淋巴组织中 ,TopoⅡ主要在滤泡基底暗区表达。 结论 :TopoⅡ可能成为反映细胞增生程度较客观的指标 ,特别在胃肠道、乳腺、肾脏肿瘤诊断及预后判断中有比较重要的意义。
- 吴波闫伟方刚孟奎
- 关键词：DNA拓扑异构酶肿瘤
