目的:探究天然物质蟾酥中的活性成分酯蟾毒配基(Resibufogenin,RBG)对三阴性乳腺癌(Triple negative breast cancer,TNBC)细胞的作用机制.方法:用MTT分析和流式细胞技术检测细胞活力和细胞周期的变化,用划痕实验检测肿瘤细胞迁移,用AnnexinV-FITC/PI双荧光探针染色检测细胞早期凋亡和晚期凋亡比率,用免疫印记分析自噬通路LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ等相关蛋白的表达.结果:酯蟾毒配基(RBG)在1-100μM范围内能抑制三阴性乳腺癌BT549细胞活力,并呈剂量依赖性.RBG作用于BT549细胞24小时和48小时的IC50值分别为(21.62±3.19)μM和(13.34±2.10)μM.RBG引起细胞发生周期阻滞,使三阴性乳腺癌BT549细胞阻滞在G2/M期.酯蟾毒配基引起的早期凋亡和晚期凋亡细胞的数量均显著增加.并且RBG使BT549细胞的划痕愈合能力显著降低,所以限制了BT549细胞的迁移.RBG使细胞的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高,p62蛋白表达明显降低,p-PI3K和p-Akt也明显降低.结论:酯蟾毒配基抑制BT549细胞增殖,可能通过PI3K/Akt信号通路促进肿瘤细胞的凋亡和自噬.