王慈
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
- 供职机构：集美大学食品与生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省科技重大专项福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程生物学农业科学更多>>
- 鲤鱼基质金属蛋白酶--2的基因克隆、表达及性质研究
- 基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases, MMPs）是能够降解细胞外基质（Extracellular matrix, ECM）的最重要的金属离子依赖性蛋白酶。MMPs参与许多生理、病理过程，广...
- 王慈
- 关键词：基质金属蛋白酶-2鲤鱼基因克隆原核表达系统明胶酶谱
- 文献传递
- 鲢小清蛋白的cDNA克隆及在大肠杆菌中的原核表达被引量：1
- 2014年
- 以鲢(Hypophthalmichthys molitrix)肌肉cDNA为模板,利用小清蛋白特异性引物进行PCR扩增,克隆得到β小清蛋白两种不同亚型,即Ⅰ型、Ⅱ型编码区基因。将目的基因片段连接到pET28a(+)表达载体,并在大肠杆菌[E.coli BL21(DE3)]中诱导表达。结果表明,经诱导的小清蛋白重组质粒菌株有特异的蛋白表达。SDS-PAGE分析显示,目的蛋白的分子量约为13 kD,与预期大小一致。菌体超声破碎后发现2种亚型的小清蛋白均为可溶表达。利用Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,得到高纯度的重组小清蛋白PVⅠ和PVⅡ。经Western Blot鉴定,重组小清蛋白PVⅠ和PVⅡ均能与抗鲢小清蛋白单克隆抗体反应。本研究为进一步分析小清蛋白的结构与致敏性的关系提供了重要的基础。
- 王慈曹敏杰郑晓江詹春兰刘光明蔡秋凤
- 关键词：小清蛋白CDNA克隆原核表达
- 凡纳滨对虾丝氨酸蛋白酶抑制剂的原核表达及性质研究
- 2016年
- 通过PCR扩增得到凡纳滨对虾丝氨酸蛋白酶抑制剂（SPI）基因,将其插入大肠杆菌表达载体p ET-28a,实现丝氨酸蛋白酶抑制剂在BL21（DE3）菌中以包涵体的形式大量表达。SDS-PAGE结果显示,目的蛋白分子质量约为15 ku,与预期大小一致。将包涵体溶解后,利用Ni2＋亲和柱层析对重组蛋白进行纯化,得到高纯度的重组SPI。经复性后的SPI对胰蛋白酶具有较高的抑制活性。该抑制剂在90℃内加热1 h,可保留90%以上的抑制活性,且在p H 1~8范围内较稳定。该抑制剂能特异性抑制凡纳滨对虾内源性胰蛋白酶的活性。抑制动力学试验结果表明,该抑制剂是竞争性抑制剂,其抑制常数Ki为1.69×10-9mol/L。结论：重组凡纳滨对虾丝氨酸蛋白酶抑制剂具有较高的抑制活性且较稳定,经优化表达条件后有望应用于新型对虾保鲜剂。
- 詹春兰王慈翁凌蔡秋凤刘光明曹敏杰
- 关键词：凡纳滨对虾丝氨酸蛋白酶抑制剂原核表达
- 鱼类基质金属蛋白酶研究进展被引量：4
- 2014年
- 基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinases,MMPs)是一类高度保守的生物活性依赖于金属离子的内切酶家族,是参与降解细胞外基质(Extracellular Matrix,ECM)的重要蛋白酶,MMP几乎能降解细胞外基质的所有成分.研究发现,MMPs参与鱼类胶原蛋白的降解,是导致鱼类死后肌肉软化的重要原因.综述了基质金属蛋白酶的分类、结构、调节机制以及它们对鱼类肌肉胶原蛋白的作用.
- 曹敏杰张玲王慈
- 关键词：基质金属蛋白酶鱼类肌肉胶原蛋白
- 鲤鱼基质金属蛋白酶-2的基因克隆、原核表达及性质分析
- 基质金属蛋白酶参与动物胶原蛋白的新陈代谢,但其在水产动物中的存在情况少有报道。本研究利用RT-PCR和RACE技术从鲤鱼（Cyprinuscarpio）肌肉中克隆得到基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的cDNA全长共278...
- 王慈詹春兰杜翠红刘光明苏文金曹敏杰
- 关键词：基质金属蛋白酶-2鲤鱼明胶酶谱胶原蛋白
- 文献传递
- 鲤鱼基质金属蛋白酶-2的基因克隆、原核表达及性质分析
- 基质金属蛋白酶参与动物胶原蛋白的新陈代谢,但其在水产动物中的存在情况少有报道.本研究利用RT-PCR和RACE技术从鲤鱼(Cyprinuscarpio)肌肉中克隆得到基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的cDNA全长共278...
- 王慈詹春兰杜翠红刘光明苏文金曹敏杰
- 关键词：基质金属蛋白酶-2鲤鱼明胶酶谱胶原蛋白
