沈丽萍 作品数:14 被引量:17 H指数:2 供职机构: 军事医学科学院放射与辐射医学研究所 更多>> 发文基金: 全球变化研究国家重大科学研究计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 核科学技术 生物学 一般工业技术 更多>>
RPS27L基因作为辐射损伤标志物的研究 2015年 以人外周血为研究对象,研究照射后RPS27L基因的时间效应和剂量效应以及本底水平,探究其作为辐射损伤早期生物标志物的可行性。采集3名健康成人外周血,利用γ射线对其进行照射至吸收剂量分别为0、0.5、1、2、4、6和10 Gy,受照后37℃培养2、4、8、12和24 h,利用实时荧光定量PCR检测RPS27L基因的表达变化,并分析在37个健康人个体中的本底水平。结果显示,受照后的4、8、12和24 h RPS27L基因表达变化显著,而且具有很好的剂量依赖关系;在不同年龄和性别的个体中RPS27L本底水平相对稳定。因此,RPS27L基因具有作为新的辐射损伤标志物的潜力。 李孝鑫 扈江伟 张学清 沈丽萍 李琳 常诚 王治东 陈英关键词:核辐射 基因表达变化 实时荧光定量PCR 生物标志物 金属纳米材料的遗传毒性及遗传毒理机制 被引量:5 2015年 金属纳米材料已在各领域得到了广泛的应用,然而其存在的潜在风险仍不可忽视。本文就不同金属纳米材料遗传毒作用表现和毒效应机制方面的内容进行了探讨。金属纳米材料经多途径暴露进入机体,通过循环系统在多个脏器分布。金属纳米颗粒主要经胞吞作用进入细胞,在细胞内直接或经代谢后间接损伤遗传物质,影响细胞周期和基因组稳定性,造成基因突变、染色体畸变,甚至令细胞发生死亡或恶性转化。 沈丽萍 王治东 周平坤关键词:金属纳米粒子 遗传学 氧化应激 生物效应 功能未知基因LOC410296的表达载体构建及小鼠抗血清制备 被引量:2 2014年 目的为深入研究功能未知基因LOC401296,首先获取其全长序列,实现LOC401296分子的真核和原核表达,并制备针对LOC401296蛋白的抗血清。方法采用PCR方法克隆LOC401296编码区全长序列,利用pET28B和pCMV-Myc质粒构建LOC401296原核表达和真核表达载体,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白原核表达,目的蛋白经纯化、复性后免疫小鼠制备抗血清。结果 PCR克隆得到LOC401296编码区全长序列,成功构建LOC401296原核及真核表达载体,IPTG诱导目的蛋白在大肠杆菌体内表达,用纯化蛋白免疫小鼠获得抗人LOC401296蛋白血清,ELISA检测抗血清效价达1∶64 000,Western印迹证实LOC401296真核表达载体成功表达且抗血清特异性良好。结论获得LOC401296基因编码区全长序列,成功构建了LOC401296基因表达载体,分别在大肠杆菌和真核细胞内实现LOC401296蛋白原核表达和真核表达,获得小鼠抗人LOC401296蛋白抗血清,为LOC401296基因功能研究奠定了基础。 沈丽萍 陈虹 张学清 周建平 林仲武 王治东 陈英关键词:原核表达 真核表达 蛋白纯化 抗血清 利用基因芯片筛选辐射损伤早期生物标志物 被引量:9 2014年 以人外周血全血为研究对象,筛选本底值均一的辐射敏感基因,寻找辐射损伤早期的生物标志物。采集3名健康成人外周血,采用?-射线对其分别进行0、0.75、2和6 Gy照射,照射后2 h提取全血总RNA,利用全基因组芯片筛选差异表达基因,并分析差异表达基因在3个个体中的本底值。结果显示,共筛选到15个具有相对均一本底值的辐射诱导基因,这些基因照射后的变化具有一定的剂量依赖性:ISG20L1、TRAF4和TRIAP1等3个基因在0.75、2和6 Gy 3个剂量照射后2 h均上调2倍以上;LOC345537、POLH、SPIB、TNFSF9和TCL1A等5个基因在2 Gy和6 Gy照射后2 h变化2倍以上,其中TLC1A为下调表达,其余4个上调表达;C12orf5、DDB2、GADD45A、MADCAM1和RPS27L仅在6 Gy照射后2 h上调2倍以上。 王治东 沈丽萍 林仲武 张学清 李孝鑫 陈英关键词:电离辐射 基因芯片 生物标志物 辐射早期反应基因LOC401296功能初步研究 LOC401296基因是本实验室前期筛选到的一个辐射诱导基因,对其进行生物信息学分析提示该基因为一种功能未知基因。本研究实现LOC401296基因原核表达并制备LOC401296蛋白的单克隆抗体,初步证实LOC40129... 沈丽萍关键词:单克隆抗体制备 细胞生长 动物模型 文献传递 流式细胞方法分析淋巴细胞和粒细胞中γ-H2AX含量比值:——一种潜在辐射生物剂量计研究 目的本研究建立一种基于流式细胞分析的新方法——即采用γ-H2AX的RL/G值(淋巴细胞中γ-H2AX含量与粒细胞中γ-H2AX的比值)代替在其他报道中采用的淋巴细胞中γ-H2AX荧光强度,评价该方法用于核事故辐射伤员分类... 王治东 胡海亮 胡明 张学清 王琪 乔玉磊 刘海翔 沈丽萍 周平坤 陈英关键词:粒细胞 外周血淋巴细胞 生物剂量计 流式细胞 文献传递 外周血淋巴细胞γ-H2AX的RL/G值分析:一种新的用于辐射事故伤员分类诊断和剂量估算的方法 :本研究目的是评价一种基于流式细胞分析的新的方法——即采用γ-H2AX的RL/G值(淋巴细胞中γ-H2AX含量与粒细胞中γ-H2AX的比值)用于辐射事故早期分类诊断和剂量估算的可行性. 材料和方法:血样收集和照射:... 王治东 胡海亮 胡明 张学清 王琪 乔玉磊 刘海翔 沈丽萍 周平坤 陈英关键词:淋巴细胞 粒细胞 辐射诱导分子lnc-RI稳定敲低细胞系建立及其功能 2016年 制备lnc-RI干涉表达的慢病毒颗粒,建立lnc-RI稳定下调的He La细胞系,探索lnc-RI对细胞辐射敏感性的作用。首先将lnc-RI特异性干涉序列插入干涉表达载体p GLV2中,并制备慢病毒颗粒;然后,将慢病毒颗粒感染He La细胞,建立lnc-RI稳定下调的细胞系,并通过RT-PCR检测不同干涉序列对lnc-RI表达的干涉效果;最后,通过平板克隆形成实验分析lnc-RI表达下调对He La细胞放射敏感性的影响。结果显示,成功制备了携带lnc-RI干涉序列的慢病毒颗粒,并成功感染He La细胞,通过RT-PCR实验鉴定获得两株lnc-RI稳定敲低细胞系。克隆形成实验发现,与对照相比,lnc-RI敲低的He La细胞系的放射敏感性增加。因此,初步证实lnc-RI表达下调增加He La细胞放射敏感性。 常诚 沈丽萍 张学清 李琳 李孝鑫 王治东 周平坤关键词:慢病毒 RNA干涉 POLH mRNA作为辐射损伤分子生物标志物的可行性研究 被引量:1 2015年 目的:研究受γ射线照射后人外周血中POLH mRNA的表达变化,为确立POLH mRNA作为新的辐射损伤分子生物标志物提供实验依据。方法:采取3名健康成人的外周血,利用^(60)Coγ放射源分别对其进行0.5、1、2、4、6、10 Gy照射,在照射后2、4、8、12和24 h收集各个剂量组受试者全血,提取总RNA,利用TaqMan探针实时定量PCR法,检测POLH mRNA的相对表达量。另收集30名不同年龄段(男女各占一半)的健康人外周血作为本底组,检测POLH mRNA在不同个体间的表达差异。结果:照射后2 h,仅10 Gy照射组POLH mRNA表达增加,其余各照射组无显著变化;照射后4、8、12和24 h,在0~2 Gy范围内,POLH mRNA表达量随照射剂量的增加而增加,呈现明显的剂量依赖效应,大于2 Gy照射后增加趋势接近饱和。照射后4~12 h随时间的增加表达量也不断增加,于12 h达到峰值。在对健康人群本底表达水平的分析中发现,POLH mRNA表达水平不受性别、年龄影响,在不同个体间相对均一,波动范围小。结论:POLH mRNA可由为辐射诱导表达,在一定时间和剂量范围内呈现明显的剂量依赖关系,且在不同个体之间本底表达水平相对均一,具备作为辐射损伤分子生物标志物的潜力。 李琳 李孝鑫 林仲武 扈江伟 张学清 沈丽萍 常诚 陈英 葛银林 王治东关键词:分子生物标志物 实时定量PCR 流式细胞术分析淋巴细胞中γ-H2AX含量用于快速分类诊断的可行性研究 王治东 胡海亮 张学清 乔玉磊 刘海翔 沈丽萍 陈英文献传递